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            • 1． Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞．科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗．其技术流程如图：

              （1）步骤①中，在核移植前应去除卵母细胞的    （结构）．
              （2）步骤③中，需要构建含有Rag2基因的表达载体．可以根据Rag2基因的    设计引物，利用PCR技术扩增Rag2基因片段．用Hind III和Pst I限制酶分别在片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段．为将该片段直接连接到表达载体，所选择的表达载体上应具有    酶的酶切位点．
              （3）为检测Rag2基因的表达情况，可提取治疗后小鼠骨髓细胞的    ，用抗Rag2蛋白的抗体进行杂交实验．
              难度：中等
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            • 2． 如图所示为人类“治疗性克隆”的大概过程，请据图作答．

              （1）人类“治疗性克隆”属于生物工程中的    技术．
              （2）科学家为何不直接用体细胞进行细胞培养？    ．
              （3）“治疗性克隆”的结果说明高度分化的体细胞的核仍然具有    ．相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是胰岛细胞，有的是血细胞，有的是心肌细胞，究其本质原因是基因    的结果，上述“克隆”过程是建立在胚胎干细胞的    和    的基础上的．
              （4）若将上述结果用于白血病人的骨髓移植，如图中患者是A型血，提供卵细胞的女性是AB型血的，则骨髓移植成功后患者的血型是    型．
              （5）按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是    ．
              难度：中等
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            • 3． 图1为动物的克隆研究过程，其中Ⅰ～Ⅶ代表有关过程，a～h代表有关结构或个体．

              （1）Ⅰ→Ⅱ→Ⅲ→Ⅳ→Ⅵ过程证明了    ．
              （2）过程Ⅴ取出的细胞f是    ，它在功能上的特点是    ，
              （3）动物细胞培养基中为防止培养过程中的杂菌污染需要添加    ．
              （4）Ⅳ过程用的技术是    ．若d为囊胚时期，可以取    对克隆早期胚胎进行性别鉴定．
              （5）若不考虑环境因素影响，克隆羊的性状全部像提供细胞核的绵羊吗？    ．原因是    ．
              难度：中等
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            • 4． 科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

              （1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为    ，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为    ．
              （2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为    ；也可从灰鼠体内取出卵子，通过    后进行早期胚胎培养获得．
              （3）图中重组囊胚通过    技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用    方法保存．
              （4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的    分离培养获得．iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向    后用于疾病的细胞治疗．
              （5）哺乳动物胚胎干细胞的特点    ．
              难度：中等
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            • 5． 图一是培养小鼠胚胎成纤维细胞（MEF细胞）的示意图，图二是在用MEF细胞制成的饲养层上培养胚胎干细胞（ES细胞）的示意图．

              （1）图一所示，制备细胞悬液时，常用    酶来消化剪碎的组织块．配制培养液时，通常需要在合成培养基的基础上添加    等一些天然成分．当MEF细胞分裂生长到细胞表面相互接触时就停止分裂，这种现象称为细胞的    ．
              （2）ES细胞是由    中分离出来的一类细胞，ES细胞在功能上具有发育的    ．
              （3）MEF细胞能够分泌某些蛋白质，其合成到分泌至细胞外的过程是：核糖体→    →囊泡→    →囊泡，再通过    方式分泌到细胞外．在培养液中单独培养ES细胞时，ES细胞容易发生分化，结合图二可推知MEF细胞的作用是    ．
              （4）在治疗性克隆过程中，细胞核取自患者细胞，这是为了避免向患者移入组织细胞后体内发生    反应．
              难度：中等
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            • 6． 科学家仅使用小分子化合物的组合对体细胞进行处理，成功地将已高度分化的小鼠成纤维上皮细胞诱导成多潜能干细胞，并将其命名为化学诱导的多潜能干细胞（GiPS细胞）．图是利用GiPS细胞对镰刀形细胞贫血症小鼠进行基因治疗的技术流程：

              请据图回答：
              （1）过程①中，在培养液中加入胰蛋白酶使上皮组织细胞彼此分散，若用传代培养的细胞应不超过10代，以保证细胞的    不发生变化．
              （2）科学家用小分子化合物的组合对小鼠成纤维上皮细胞进行处理，促使已经    的成纤维细胞“重新编程”产生GiPS细胞，这些GiPS细胞与囊胚中的    细胞性质相同．
              （3）过程③中，导入的重组质粒中调控目的基因表达的组件是    和    ，    的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞．
              （4）若利用GiPS细胞诱导分化形成    ，再经    技术，可较容易得到高等动物的体细胞克隆个体．
              （5）GiPS细胞经体外诱导分化，可以直接培育出人造组织器官．图中培育骨髓造血干细胞移植回该小鼠体内与异体骨髓造血干细胞移植相比，最大的优点是    ．
              难度：中等
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