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            • 1. 如图表示人体内部分结缔组织细胞的形成过程,成纤维细胞是疏松结缔组织的主要细胞成分,其形成过程未经人为调控;A细胞到单核细胞、红细胞的几种途径中部分属于人为调控过程,PU、GATA为两种蛋白质,是细胞内的调控因子。请回答下列问题:

              (1)过程①发生的根本原因是______,过程②中,染色体组数目发生倍增的时期是______。
              (2)为长期培养胚胎干细胞,需建立一种培养体系,可按过程③操作。首先在培养皿底部用胚胎成纤维细胞制备饲养层,当饲养层细胞分裂生长到细胞表面相互接触时,细胞会停止增殖。此时,理论上培养皿底部形成的细胞层数为______。然后将干细胞接种在饲养层上进行培养,由此推测,胚胎成纤维细胞可以分泌抑制______的物质。
              (3)若要使血红细胞前体直接转变成单核细胞,则可行的人为调控措施是______。
            • 2.
              Rag2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:

              (1)步骤①中所选的卵母细胞应处于 ______ 期.
              (2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其 ______ 分离出ES细胞,ES细胞在形态上表现为 ______ 的特点.
              (3)步骤③中,需要构建含有Rag2基因的 ______ .可以根据Rag2基因的核苷酸序列设计合成 ______ ,利用 ______ 技术扩增Rag2基因片段.用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有 ______ 酶的酶切位点.
              (4)为检测Rag2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗Rag2蛋白的抗体进行 ______ .
            • 3.
              日前,英国研究人员利用最新的3D打印技术,“打印”出了活体胚胎干细胞.实验证明,这些干细胞仍保持着人体胚胎干细胞的正常分化能力.科学家使用活体卵子及皮肤成纤维细胞,在实验室已成功克隆出了数个人体胚胎,进而可以开发出有研究价值的胚胎干细胞.请回答:
              (1)自然状况下的胚胎干细胞是由哺乳动物的早期胚胎或 ______ 中分离出来的一类细胞.
              (2)上述过程中要应用到的动物细胞工程技术有 ______ 、 ______ .胚胎干细胞在形态上表现为体积小,细胞核大, ______ 明显,在功能上具有 ______ .
              (3)将胚胎干细胞用于检测有毒物质是否引起了基因突变,在分子水平上需要采用 ______ 技术.
              (4)若选用囊胚进行胚胎分割,要注意对其 ______ 做到均等分割.
              (5)胚胎移植是否成功,与供体和受体的生理状况有关.在胚胎移植操作中,应对供体和受体母畜进行 ______ 处理才能使胚胎在移植前后所处的生理环境保持一致.
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