[生物---一选修1:生物技术实践]

在葡萄酒酿制过程中，有许多需要注意的环节，请回答下列有关问题：

(1)用于酿制葡萄酒的主要微生物是          ，酒精发酵一般将温度控制在            。

(2)工厂化生产果酒，为提高果酒的品质，需更大程度地抑制其他微生物的生长，采取的措施是对原料和设施进行          和               ,并接入合适的菌种。

(3)在制作葡萄酒的实验中，向发酵瓶中装人葡萄汁时，要留有大约           的空间。如果要继续制作葡萄醋，在发酵后期要向发酵液中通入           ，以保证发酵液处于          环境，并将发酵液置于           的温度环境中，一段时间后，发酵液中会出现醋酸菌。

根据生物技术实践的有关知识，回答下列问题：

（1）欲从土壤中分离出能高效降解有机磷农药的细菌，可在培养基中加入      制成选择培养基进行分离。若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是       。

（2）微生物培养过程中，获得纯净培养物的关键是            。

（3）在月季花粉发育的过程中，只有某一个时期对离体刺激敏感，一般来说，在     期，花药培养成功率高。

（4）在香料工业提取的“液体黄金”玫瑰精油，要求不含任何添加剂和化学原料，其提取方法主要是                ；玫瑰精油的提取过程中向获得的乳化液中加入NaCl，增加盐浓度的目的是                 。

（5）某兴趣小组将豆腐块灭菌，接种微生物后培养2天，加入适量食盐，经密封放置10天后制的豆腐乳。在保质期内，豆腐乳放置时间越长，蛋白质含量越低，其原因是豆腐中蛋白质被微生物产生的         分解。最终使         含量增加，因此保质期内豆腐乳放置越久风味越佳。

（6）血红蛋白的分离一般采用法和电泳法，前一种分离方法是根据来分离蛋白质。

[生物—选修1：生物技术实践]

   牛的食物主要是草茎类，其中含有大量的纤维素。牛胃内的微生物，在帮助消化和利用植物纤维素方面起了决定性的作用。回答下列问题：

（1）纤维素是地球上含量最丰富的多糖类物质，组成纤维素的单体为________。牛胃中某些微生物能够产生纤维素酶，这种酶是一种复合酶，其中的________能使纤维素分解成纤维二糖。

（2）实验室培养牛胃内的微生物，分离得到高纯度纤维素分解菌的关键环节是________。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行；倒平板用的培养皿需要保持干燥，可以采用________法进行灭菌。

（3）为了从牛胃的食糜中分离出纤维素分解菌，配制的选择培养基要以________作为唯一碳源。筛选纤维素分解菌时，常用的刚果红染色法有两种，一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应，另一种是________。在涂布平板时滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多，原因是________。

请回答下列生物技术实践方面的问题：

（1）在果酒的制作中，在有氧条件下酵母菌进行有氧呼吸，进行________；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵，产生________。在果醋的制作中，当________都充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸；当缺少________时，醋酸菌将乙醇→乙醛→醋酸。

（2）微生物接种的方法很多，最常用的是________和稀释涂布平板法，其操作方法各不相同，但核心都是要________，保证培养物的纯度。为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）DNA的粗提取实验中两次使用蒸馏水，但其目的不同。第一次的目的是使鸡血细胞吸水涨破；第二次的目的是________，使DNA逐渐析出。

请回答下列与大肠杆菌有关的问题：

（1）从生态系统的成分上看，大肠杆菌属于            ；它的同化作用类型是           。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于         培养基（选择、鉴别）。该培养基中的碳源是             ，氮源是               。

（3）培养大肠杆菌时，常用的接种方法是              和               。为防止杂菌污染需要对培养基和培养皿进行             。

（4）现有一升水样，用无菌吸管吸取1mL转至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释10³稀释度。各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原水样中大肠杆菌数为           。

（5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是                                            。

（6）以下微生物发酵生产特定产物时，所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是____________。

A．制作果酒        B．制作果醋    C．制作泡菜         D．制作腐乳

金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起食物中毒、肺炎、肠炎等。某研究小组的同学用所学的微生物的实验室培养的方法进行“变质牛奶中金黄色葡萄球菌的分离和计数实验”，部分实验处理和结果如下图。（注:培养皿旁的数字代表菌落数目；实验室条件满足金黄色葡萄球菌的生长繁殖；实验操作规范；实验过程严格做好各项防护防扩散等工作）

请回答相关问题

（1）在实验室培养微生物，获得纯净培养物的关键是                    。

（2）据图，研究小组采用的是_______法分离和计数金黄色葡萄球菌。由样品到4号试管的操作中，第一步，将分别盛有9mL生理盐水的4支试管______，并编号1—4号；第二步，用移液管从样品中吸取1mL牛奶，注入1号试管中，充分摇匀；第三步，重复第二步骤操作，以此类推，4号试管的稀释倍数是_____。

（3）资料显示，金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10%—15%NaCL的肉汤中生长;本实验可配制含10%氯化钠的培养基，使之成为_______培养基，以利金黄色葡萄球菌的生长，抑制或阻止其他微生物的生长

（4）通过观察菌落特征可区分不同种类微生物，这些特征包括菌落的________、     、     和     等方面；在统计菌落数目时，需按照菌落计数的要求计数，以保证计数结果准确。据图可得出1mL牛奶样品中金黄色葡萄球菌的活菌数为_____。

[生物——选修1：生物技术实践]

高温淀粉酶在大规模工业生产中是极为重要的酶制剂。研究者从热泉中筛选出了能高效产生高温淀粉酶的嗜热菌。其筛选过程如下图所示。

(1)进行①过程的目的是               ；②过程所使用的接种方法是                     。

(2)I、II号培养基配制和灭菌时，灭菌与调节pH的先后顺序是            ；对培养基常用              方法进行灭菌。对于空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能              。如果要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是：                    。

(3)部分嗜热菌在I号培养基上生长时可释放            分解培养基中的淀粉，在不同菌落周围形成大小不同的透明圈，应挑出              的菌落，接种到II号培养基。

(4)欲对样品中微生物计数，一般常用      培养基（选“Ⅰ或Ⅱ”）所示接种方法；通过统计平板上的菌落数，就能推测样品中的活菌数目，其依据是                                        。

[生物——选修1：生物技术实践]

空气中的微生物在重力等作用下，可以一定程度地沉降。某研究小组欲用平板收集教室空气中的微生物，以了解教室内不同高度空气中微生物的分布情况。实验步骤如下：

①配制培养基（成分：牛肉膏、蛋白胨、NaCl、X、H₂O）;

②制作无菌平板；

③设置空白对照组和若干实验组，进行相关操作；

④将各组平板置于37℃恒温箱中培养一段时间，统计各组平板上菌落的平均数。

回答下列问题:

（1）  该培养基中微生物所需的氮来源于_________________。若要完成步骤②，该培养基中的成分X通常是_________________。

（2） 步骤③中，实验组的操作是___________________________________________________。

（3） 若在某次调查中，某一实验组平板上菌落平均数为36个/平板，而空白对照组的一个平板上出现了6个菌落，这种结果说明在此次调查中出现了____________现象。若将30（即36－6）个/平板作为本组菌落数的平均值，该做法_______________（填“正确”或“不正确”）。

回答有关问题：

（1）“超级细菌”可以清除原油泄漏导致的土壤和沙滩油污，基因工程要筛选出这样的超级细菌，过程是将工程菌样品稀释液接种于以________为唯一碳源的固体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。

（2）纯化菌种时，为了得到单菌落，常采用的接种方法有两种，即________和________。

（3）为了筛选出高效菌株，可比较单菌落周围分解圈的大小，分解圈大说明该菌株的降解能力________________.

（4）若要测定“超级细菌”培养液中的菌体数，可在显微镜下用________直接计数；若要测定其活菌数量，可选用________平板法且选取具有________个菌落的平板进行计数。

（5）培养基灭菌常用________，检测灭菌的效果是将平板倒放在恒温箱中，在适宜的温度下培养适当的时间，再观察有无________，如果有需要重新灭菌。

[生物——选修1：生物技术实践]

   为调查我市自来水的水质状况，某研究小组测定自来水水样中的细菌含量，并进行了细菌分离等作请回答下列问题：

（1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中的细菌含量，涂布平板所用的培养基是________（填“固体”或“液体”）培养基，该培养基的制备过程是计算→称量→溶化→灭菌→________

（2）在涂布接种前，小组成员随机取若干灭菌后的空白培养基培养了一段时间，观察培养基上是否出现菌落。若空白培养基上出现了菌落，其可能的原因是：①________；②________（填两个）

（3）培养基灭菌后，将1ml水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液，经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为51、50和49，据此可得出每升水样中的活菌数为________。

（4）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，实验操作时，连续划线的目的是________。

（5）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了水样的平板置于________中培养。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平扳上接种________作为对照进行实验。