将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱，是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上，有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液，研究细菌的种类和数量。请回答下列问题：

（1）该研究小组需配制用于培养微生物的培养基，配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

（2）为了避免培养基污染，在培养过程中，需将平板________（填“正置”或“倒置”）。为了观察浸出液中微生物的种类和数量，采用____法接种。接种时，为了避免环境中微生物的污染，实验操作应在________附近进行。

（3）在培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，说明西瓜的浸出液中有________（填“一种”或“多种”）细菌。细菌总数越多，说明西瓜被细菌污染的程度越________（填“高”或“低”）。

【生物——选修1 生物技术实践】

胡萝卜素是一种常用的食用色素，可分别从胡萝卜或产生胡萝卜素的微生物体中提取获得，流程如下：

（1）筛选产胡萝卜素的酵母菌R时，可选用       或平板划线法接种。采用平板划线法接种时需要先灼烧接种环，其目的是              。

（2）培养酵母菌R时，培养基中的蔗糖和硝酸盐可以分别为酵母菌R提供       。

（3）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，干燥过程应控制好温度和            以防止胡萝卜素分解；萃取过程中宜采用           方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行         ，以除去固体不溶物。

（4）纸层析法可用于鉴定所提取的胡萝卜素，常用           作为层析液。鉴定过程中需要用胡萝卜素标准品作为             。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

某小组同学为了调查湖水中细菌的污染情况而进行了实验。实验包括制备培养基、 灭菌、接种及培养、菌落观察计数。请回答与此实验相关的问题。

（1）培养基中含有蛋白胨、淀粉分别为细菌培养提供了氮源和_ _____。除此之外，培养基还必 须含有的基本成分是_____和______。

（2）对培养基进行灭菌，应该采用的方法是_______。

（3）为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水样品的平板置于______中培养，培养 的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照 进行实验。

（4）培养20小时后，观察到平板上有形态和颜色不同的菌落，这说明湖水样品中有_____种细菌。 一般说来，菌落总数越多，湖水遭受细菌污染的程度越_______。

（5）如果提高培养基中NaCl的浓度，可以用于筛选耐__细菌，这种培养基（按功能分）被称为_        。

[生物——选修1：生物技术实践]

在调查和分离湖水中耐盐细菌的实验中，先将10升湖水水样浓缩至10毫升，然后各取浓缩水样1毫升，涂布到多个培养皿中培养。请回答： 

(1)可以通过提高培养基中____的浓度，筛选被调查细菌，这种培养基被称为____培养基。

(2)要提高实验结果的可靠性，排除培养基未彻底灭菌的可能性，应该设置的对照组是_____________。为检验(1)中筛选方法的效果，可以设置的对照组是______________。 

(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是_________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿______培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为_______。 

(4)根据培养皿上菌落的平均数可以计算湖水中该种细菌的密度，但计算的数据要比实际活菌的数目少，原因是__________________________。

某化工厂的污水池中含有一种有害的、难以降解的有机化合物A，研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基成功筛选到能高效降解化合物A的细菌。实验的主要步骤如下图所示，请分析回答：

(1)培养基中加入化合物A的目的是筛选______________，这种培养基从用途上分属于______________培养基。培养基灭菌的常用方法是利用高温可以使微生物的________________________等物质发生变性。

(2)化合物A为“目的菌”生长提供_________。培养过程中震荡的目的是_____________。

(3)转为固体培养时，常采用_____________________的方法接种，以便于分离和计数。

(4)若研究“目的菌”的群体生长规律，将单个菌落进行液体培养，可采用__________的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm³)有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为B，菌液稀释倍数为C，那么原菌液的菌群密度为_____个/mL。

(5)实验结束时，使用过的培养基应该进行______处理后，才能倒掉。

(6)为研究化合物A初始浓度对菌株降解能力的影响，做了有关实验并得到下图。结果由图可知，若要得到较好的降解效果，化合物A的初始浓度应该为____________________。

(A、小于1600 mg/L B、小于1200 mg/L C、1200 mg/L与1600 mg/L之间)

[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列与果酒制作、微生物的培养有关的问题：

（1）葡萄酒是一种由纯果汁发酵制成的酒精饮料。在酒精发酵过程中所利用的微生物是________，检测发酵是否产生酒精的试剂是________。

（2）酒精发酵所需的微生物可以从葡萄酒中分离获得，方法是：

第一步：配制琼脂固体培养基。

第二步：对培养基进行________灭菌。

第三步：采用________法进行接种。

第四步：在20℃左右温度下培养，挑选符合要求的________。

一、[生物——选修1：生物技术实践]人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质——培养基，培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐。

（1）培养微生物常用牛肉膏蛋白胨培养基，其中牛肉膏可以为微生物提供________（填“碳源”、“氮源”或“碳源和氮源”），培养基中常加入________作为凝固剂。

（2）培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加________，培养霉菌时需要将培养基的pH调至________（填“酸性”、“中性”或“碱性”）。如果要鉴定大肠杆菌，培养基中需要加入________，大肠杆菌的菌落呈现黑色；如果要纯化大肠杆菌，可采用平板划线法或________法进行接种。

（3）制作果酒时，在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。该过程中，缺氧、呈酸性的发酵液相当于一种________（功能）培养基，温度一般控制在________。

二、[生物——选修3：现代生物科技专题]

科学家利用基因工程技术创造出了“蜘蛛羊”、“抗虫棉”等转基因生物。请回答有关基因工程的问题：

（1）科学家要想成功获得上述生物，其实施基因工程的第一步是获取________，可采用________技术大量扩增上述物质。

（2）基因工程的核心步骤是________；其中启动子是________识别和结合的部位；终止子相当于一盏红色信号灯，使________（过程）在所需要的地方停止下来；标记基因的作用是________。

（3）检测目的基因是否翻译成蛋白质常用的方法是________法；在检测导入目的基因的棉花植株是否抗虫时，需要进行________水平的鉴定。

[生物——选修1：生物技术实践]

牛奶是微生物生长的良好培养基。生鲜牛奶中的微生物情况反映了奶牛的健康状况,也影响奶制品的运输和贮藏。牛奶在饮用前都要经过巴氏消毒,以杀死有害微生物。为检测消毒前后牛奶中细菌含量变化情况,做如下图所示操作。用无菌吸管从锥形瓶中吸取1mL生牛奶稀释液至盛有9mL无菌水的试管中,混合均匀,如此再重复2次。请回答下列有关问题:

（1）巴氏消毒的方法是_______________,使用这种方法对生鲜牛奶进行消毒的好处是______________________________。

（2）取最终的牛奶稀释液0.1mL滴在培养基上进行涂布,应选择的涂布工具是下图中的_______________。

（3）图中所示方法为稀释培养法,理想情况下,培养一段时间后可在培养基表面形成菌落。若用该方法培养设置了3个培养皿,菌落数分别为35个、33个、34个,则可以推测生牛奶中每毫升含细菌数为_______________个。运用这种方法统计的结果往往较实际值_______________(填“偏大”或“偏小”),原因是_______________。

（4）消毒后的牛奶中绝大部分细菌被杀死,若继续用该方法检测消毒后的牛奶中细菌的数量,则在操作步骤上应做什么改动? _______________。

（5）从生牛奶取样培养得到的菌落中,混有各种杂菌,从中检测出大肠杆菌的方法是在培养基中加人_______________,菌落具有_____________特征的可以认定为大肠杆菌。