（一）下列问题是有关大肠杆菌的培养实验，请回答：

(1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和__________作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的_______。

(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在____________中进行扩大培养，培养液经________后，在LB固体培养基上进行_______，并将培养皿_______放在恒温培养箱中培养，可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及________________，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。

（二）现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。请回答：

(1)果汁中的果胶不仅影响______率，还使果汁浑浊，制备时常加入来自________等微生物的果胶酶。为便于工业化使用，常对酶采用___________技术，常用方法有吸附法、包埋法等。

(2)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其②生产过程中利用了__________的发酵作用，①过程需将温度控制在__________。

(3)若要提高果醋的产量，发酵过程中关键要提供___________、_________等条件。

下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是

研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如下图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水，并用________浸泡处理。

（2）培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供________________________。

（3）做抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4)柚皮油也可以用萃取法来提取，原因是________________________。从下图分析，提高萃取效果的方法是__________________________、__________________________。

回答下列有关微生物培养的相关问题：

Ⅰ．已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可以用于生物柴油的生产。回答下列问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用____________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可用____________（填"萃取法"或"水蒸气蒸馏法"）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_______为碳源的______（物理状态）培养基进行培养。培养的结果发现没有得到微生物B的菌落或者数量极少，可在此操作之前增加____________这一操作步骤。

（3）若要测定微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________直接计数，若要测定活菌数量，可选用____________法进行计数。

Ⅱ．某医院有一个罕见的细菌感染患者，医生想通过抑菌实验，从常用的抗生素一青霉素（A），氨苄青霉素（B），庆大霉素（C），氯霉素（D），环丙沙星（E）中寻找对病人最有效的一种．部分实验步骤如下：

第一步：按下方所列配方配置培养基：

第二步：取单菌落适当稀释，用3支无菌滴管吸取从此病人体内分离到的细菌悬浮液2滴，滴于3个平板培养基表面，然后分别用3个无菌涂布棒涂匀，37℃恒温箱中培养，使细菌长满平板表面。

（4）上述培养基配方中作为蛋白胨为微生物的生长提供了____________________。

（5）如图圆环表示一个培养皿平面，用浸有不同抗生素的圆纸片间隔放到培养基土，如下图所示。

培养2d后，A滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对青霉素____________；B滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对氨苄青霉素____________；C滤纸片周围的透明圈比A滤纸片周围的透明圈小，说明____________；D滤纸片周围的透明圈比A滤纸片的也小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是氯霉素的____________。

（6）经测量透明圈大小，得到如下结果（单位mm）：

那么，你建议医生使用哪一种抗生素？____________．

回答下列与酵母菌有关的问题：

（1）培养酵母菌的培养基应采用________法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是_______________。

（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进_______（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）；若进行厌氧培养,可促进______（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）。

（3）制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是___________。

（4）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用 ____________培养基，常用的接种方法____________和____________．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为__________个/mL．该统计结果_____________（低于、高于）实际值。

某生物兴趣小组按下图所示过程从土壤中筛选能降解纤维素的细菌。回答下列问题:

（1）步骤②是___________。为了筛选目的菌，步骤③的培养基中加入的唯一碳源为___________，这种培养基属于___________（填“鉴别”或“选择”）培养基。

（2）上述接种等操作都应在酒精灯火焰附近进行的原因是___________。一般在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线，原因是______________________。

（3）将接种后的培养基和作为对照的______________同时放入恒温培养箱中培养，为了对初步筛选出来的菌种作进一步的鉴定，可在培养基中加入_________________。选取鉴定出的具有较大透明圈的菌种可接种到___________培养基上临时保藏。

某同学配制含琼脂的牛肉膏蛋白胨培养基后,对培养基和培养皿进行高压蒸汽灭菌,当培养基温度下降到50℃时,在酒精灯火焰附近倒平板,待培养基冷却至室温,按下表处理。将处理完毕的培养皿置于适宜温度下培养2~3天,观察每个培养皿中的菌落特征和数目。回答下列问题:

(1)配制乳酸杆菌的培养基时，除了几种主要的营养物质外，还需要在培养基中添加________________。

(4)为了使测量结果更加准确，该实验对照组的设置是________________________________。

下图是生物兴趣小组为研究“XXX牌酸奶中乳酸菌种类及其耐药情况”而制定的流程图。请分析回答：

—→—→

(1)与酵母菌相比，乳酸菌在结构上的主要区别是________________________，________(填“有”或“无”)染色体。

(2)本研究使用的细菌培养基中特别加入了一定量的碳酸钙，乳酸菌在________(生理过程)中产生的乳酸能与不溶性的碳酸钙生成可溶性的乳酸钙，从而在菌落周围形成溶钙圈。从物理形态分析，本研究使用的培养基属于________(类型)。

(3)在利用高压蒸汽灭菌锅对培养基灭菌时，把锅内水加热煮沸，必须将锅内冷空气彻底排除后，将锅密闭，继续加热以保证锅内气压上升，达到121℃。灭菌后的培养基应适当冷却后，在________附近倒平板。

(4)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”实验操作步骤：

步骤1：分别取__________________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到50℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3：将接种后的三组培养基和一个__________都置于适宜温度等条件下培养若干天，观察比较培养基中菌落生长情况。