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            • 1.

              酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:

              (1) 从土壤中筛选酸性脲酶生产菌,其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等,从功能上分析,该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

              (2) 筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时,需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

              (3) 对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液,分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则前者的数量___(多于/等于/小于)后者,其原因是________。

              (4) 若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时,应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况,从表中看出,海藻酸钠的浓度应选用__g/dL。若利用固定化酶技术,它的优点是___________________。

              海藻酸钠质量浓度(g/dL)

              凝胶强度

              凝胶气泡量

              成球难度

              凝珠形状

              1.0

              没有

              较易

              扁圆形

              2.0

              少量

              圆球形

              3.0

              较多

              稍难

              有托尾

              4.0

              大量

              难成球形

            • 2. 为了检测抗生素作用,需要做细菌耐药实验。
              (1)为了统计某治病菌活菌数,可用________________法将样本接种于固体培养基表面。该接种方法中的接种工具是________________。
              (2)为了检测致病菌对于抗生素的敏感性,将分别含有A、B、C、D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置,培养一段时间后,含A的滤纸片周围出现透明圈,说明该致病菌对抗生素A  ________________;含B的滤纸片周围没有出现透明圈,说明该病菌对抗生素B________________;含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小,说明________________;含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小,且透明圈中出现了一个菌落,在排除杂菌污染的情况下,此菌落很可能是抗生素D的________________。
              (3)根据(2),抗生素________________抗菌效果最好。

              (4)人类经常使用抗生素,细菌抗药性不断增强是________________的结果。

            • 3. 纤维素分解性细菌是能分解纤维素的细菌。这类细菌多见于腐植土中,下面是分离纤维素分解菌的实验流程。

              土壤取样→①→梯度稀释→接种到②→挑选产生透明圈的菌落

              (1)以上实验流程中①是_________,①过程中使用的培养基是___________(液体培养基、固体培养基);②是__________________。

              (2)过程②用到的培养基中加入了一种染料与______形成红色复合物,刚果红染色法有两种,一种是先培养__________,再加入刚果红进行颜色反应;另一种是在________加入刚果红。

              (3)菌落周围出现透明圈说明纤维素分解菌能分泌纤维素酶,该酶是一种复合酶至少包括_____________________,并最终把纤维素分解成______________。

              (4)某实验小组为了研究pH对纤维素分解菌产生的纤维素酶活性的影响,将纤维素分解菌分别接种在pH不同的刚果红—纤维素培养基中,通过观察出现透明圈的最早时间和24h后透明圈直径的大小来判断纤维素酶活性的高低,该实验小组设置了pH分别为6、7、8的三组实验进行观察,得到了如下的实验结果:

              pH

              出现透明圈的最早时间(h)

              24h后透明圈的直径(cm)

              6

              6

              4.42

              7

              10

              3.66

              8

              24

              1.33

              通过上述结果可知,该实验的自变量是_______,因变量是________和____________,纤维素分解菌更适合在偏_______(填“酸”、“碱”或“中”)性环境下生长。

              (5)纤维素酶的测定方法,一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的_________进行定量的测定。

            • 4.

              尿素是一种重要的农业氮肥,不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。回答下列问题:

              成分

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              含量

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              (1)该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供_________________。

              (2)该培养基可以选择出分解尿素的细菌,原因是_________________________________。

              (3)某同学用0.1ml的稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数(取10克该土壤加90ml无菌水制成稀释液)。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为:231、212、256,则每克该土壤样品中的菌落数为_______________。

              (4)若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,可以向培养基中加入__________________。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中pH升高,pH升高的原因是__________________________。

              (5)细菌的数目可以通过滤膜法来测定,例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,在该培养基上,大肠杆菌的菌落呈现__________,根据培养基菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。

            • 5.

              艾弗里等人的肺炎双球菌体外转化实验为证明DNA是遗传物质做出了重要贡献,回答下列问题:

              (1)科研人员在实验室验证了艾弗里的实验,为了更直观的观察到培养基内有无转化发生,用于体外培养肺炎双球菌的培养基应选择___________(“固体”或“液体”),如果选用牛肉膏蛋白胨培养基培养,牛肉膏的作用是___________,接种方法为____________。

              (2)为确保操作环境(接种室、接种箱、超净工作台等)无污染,应采用___________消毒,为加强消毒效果还应喷洒适量的______________等化学抑菌剂。

              (3)接种后经过恒温培养24小时后,可通过________________________现象确定发生了肺炎双球菌的“转化”。

            • 6.

              表格是某公司研发的一种培养大肠杆菌的培养基配方,请结合所学知识,回答下列相关问题。

              成分

              蛋白胨

              乳糖

              蔗糖

              K2HPO4

              伊红美蓝

              琼脂

              含量

              10.0g

              5.0g

              5.0g

              2.0g

              0.2g

              12.0g

               

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000mL

              (1)根据用途划分,该培养基属于________培养基,若要分离能分解尿素的细菌,需对培养基作出的最关键的调整是_______________,若还需鉴定分解尿素的细菌,需作出的调整是____________。

              (2)从培养基的成分上看,大肠杆菌的同化类型为__________。该培养基中能作为大肠杆菌碳源物质的有________________。

              (3)在实验室培养微生物时,获得纯净培养物的关键是_______________,紫外线可对空气进行灭菌的原因是_____________。

            • 7.

              传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中,无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨)。回答下列问题:

              (1)配制培养基时各种成分在溶化后分装前一般需要先_______;平板冷却凝固后一般要_______放置,这样操作的目的是____________________。

              (2)在菌株筛选过程中,应将污泥样品稀释液接种于______________固体培养基上;并加入_________指示剂加以鉴别。平板划线法时在第二次及其后的划线操作时,总是从____________开始划线,原因是_______________________________ 

              (3)如何设计实验判断培养基是否被污染?_________________________________________________________

              (4)对于频繁使用的菌种,可以采用______的方法进行保藏,但该方法具有________________________缺点。

            • 8.

              三孢布拉霉菌能用来生产胡萝卜素,但该菌株的高产性状容易退化,需要定期筛选出高产菌株,研究表明菌体细胞内的[H]可将无色的TTC还原为红色复合物(颜色深浅与[H]的含量成正相关),且菌体细胞内[H]含量越高,还原能力越强,胡萝卜素合成能力也越强。请结合下列筛选菌株及提取胡萝卜素的流程图。回答下列问题:

              三孢布拉霉菌液→梯度稀释→涂布到含有TTC的培养基上→挑取单菌落→扩大培养→收集菌丝并处理→萃取→过滤→浓缩→鉴定

              (1)工业生产上提取天然胡萝卜素的方法主要有三种,除可利用上述微生物的发酵生产之外,还可以从植物中提取和从___________中获得。

              (2)将菌液涂布到含TTC的培养基上前,需要用_________(物质)对菌液进行梯度稀释;接种时,如何对接种工具涂布器进行灭菌?________。

              (3)挑取单菌落时,若菌落周围_________________,则菌株合成胡萝卜素的能力较强。扩大培养时,需要使用________________(物理状态)培养基。

              (4)从该微生物中提取胡萝卜素时,扩大培养后要收集三孢布拉霉菌菌丝进行的处理是粉碎和________,以提高萃取效率。萃取法提取胡萝卜素时,经常使用石油醚作为萃取剂,除其能够充分溶解胡萝卜素外,还具有的优点有____________________(答出两点);萃取液的浓缩可以直接使用________装置。

            • 9.

              磷是植物生长发育的必需元素,土壤中存在大量溶磷微生物,能够将难溶性磷酸盐转化为植物可吸收利用的有效磷,这种微生物统称为溶磷微生物,溶磷微生物主要包括溶磷细菌和溶磷真菌,溶磷真菌的溶磷效率远远高于细菌,某实验小组通过制备含有难溶性磷酸盐的培养基,根据微生物溶磷后形成的溶磷圈筛选出溶磷真菌,回答下列问题:

              (1)和液体培养基相比,用于分离溶磷真菌的培养基需要加入的特殊物质(成分为多糖)是__________,其作用是_________________,实验室对培养基灭菌的常用方法是______________;菌落是指_______________,菌落特征包括菌落的______________等(至少答出3个)。配制培养大肠杆菌的培养基,一般都含有水、碳源、无机盐和氮源等四类营养物质。试从细胞的元素组成分析,其原因是____________。配制培养基时除了满足基本的营养条件外,还需满足微生物生长对特殊营养物质、____________的要求。由于实验中使用的平板较多,为避免混淆宜在使用前用记号笔在培养皿__________做好标记。

              (2)该实验小组先制备一定稀释梯度的土壤悬浮液,将土壤悬浮液涂布于含有难溶磷酸盐的培养基中进行培养,然后分离出产生溶磷圈的菌株,在该培养基中还需要加入一定的抗生素,其作用是______________,分离时要每隔24h统计一次溶磷圈的数目,直至溶磷圈的数目不再发生变化,其目的是防止_____________________;分离出来的溶磷微生物可利用______________法进行长期保存,需在温度为______________条件下保存。

              (3)接种时可选用的工具是_______,接种过程中应采用无菌技术,其目的是防止______________。若涂布后培养一段时间后,发现培养基上的溶磷圈连接成一片,则导致该现象的可能原因是___________________________________。

              (4)该实验小组筛选出两株溶磷真菌,溶磷真菌在培养基上形成的菌落的直径(d)和溶磷圈的直径(D)大小如下表所示,据表分析溶磷能力较强的菌株是_______,最容易被真菌利用的磷酸盐是_______。

              菌株

              磷酸盐

              Ca3(P04)2

              Zn3(P04)2

              FePO4

              D

              d

              D/d

              D

              d

              D/d

              D

              d

              D/d

              P1

              5.9

              3.7

              1.59

              2.6

              0.9

              2.89

              6.4

              5.2

              1.23

              P2

              5.8

              3.3

              1.76

              3.8

              1.2

              3.17

              6.6

              5.1

              1.29

            0/40

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