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            • 1．
              将马铃薯去皮切块，加水煮沸一定时间，过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂，用水定容后灭菌，得到M培养基。
              回答下列问题：
              （1）M培养基着用于真菌的筛选，则培养基中应加入链霉素以抑制 ______ 的生长，加入了链霉素的培养基属于 ______ 培养基。
              （2）M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质，营养物质类型除氮源外还有 ______ （答出两点即可）。氮源进入细胞后，可参与台成的生物大分子有 ______ （答出两点即可）。
              （3）若在M培养基中用淀粉取代蔗糖，接种土壤滤液并培养，平板上长出菌落后可通过加入显色剂选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 ______ 。
              （4）甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量，在同一稀释倍数下得到以下结果：
              甲同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是110、140和149，取平均值133；
              乙同学涂布了3个平板，统计的菌落数分别是27、169和176，取平均值124。
              有人认为这两位同学的结果中，乙同学的结果可信度低，其原因是 ______ 。
              难度：中等
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            • 2．
              为了调查某河流的水质状况，某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量，并进行了细菌分离和培养等工作。回答下列问题：
              （1）该小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量。为了检测培养基平板灭菌是否合格，可在涂布接种前， ______ ；然后，将1mL水样稀释1000倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．lmL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37，据此可得出每升水样中的活菌数为 ______ 。
              （2）该小组釆用平板划线法分离水样中的细菌。操作时，接种环通过 ______ 灭菌，为了将聚集的菌体逐步稀释以便获得单个菌落，在第二次及以后的划线时，一定要 ______ 。示意图A和B中， ______ 表示的是用稀释涂布平板法接种培养后得到的结果。通常，对获得的纯菌种可以依据 ______ 对细菌进行初步的鉴定和分类。
              （3）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培筹。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。分析其原因是：振荡培养能提高培养液中 ______ 的含量，同时可使菌体与培养液充分接触，提高 ______ 的利用率。
              难度：中等
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            • 3． 请回答下列与玉米秸杆处理有关的问题：
              （1）秸杆的主要成分是纤维素，牛本身没有相应的消化酶，但胃内有一种微生物可以帮助其分解，这种微生物与牛的种间关系为 ______ ．尿素并不是牛马的必须营养，过多甚至有害，但有经验的农民常在其草料内喷少量尿素，据此题的信息你认为尿素的作用是 ______ ．
              （2）分离纯化能分解秸秆的微生物时，需对培养基和接种针进行灭菌处理，常用的方法依次是 ______ ．
              （3）将玉米秸秆人工收获后，将其铡碎、压实、密封储藏．秸杆经此处理后，气味微酸芳香（主要由乳酸菌代谢产物造成）．上述“压实密封”的目的是：人为造就一个 ______ 环境，利于乳酸菌的 ______ ．用这样处理后的秸杆饲喂牲畜的好处是 ______ ．
              （4）下面是分离分解纤维素的微生物的实验流程图：

              步骤（二）中选择培养基的营养物质的特点是 ______ ，步骤（三）中稀释的目的是 ______ ．
              难度：中等
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            • 4． 某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A．研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌（目的菌）．实验的主要步骤如图所示．请分析回答下列问题．

              （1）培养基中加入化合物A的目的是，这种培养基属于 ______ 培养基．
              （2）“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的 ______ ．实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是 ______ ．
              （3）在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是 ______ ．
              （4）转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是 ______ ，操作时采用灭菌的方法．
              （5）实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理才能倒掉，这样做的目的是 ______ ．
              （6）某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10-4、10-5、10-6稀释液进行平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿．从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是 ______ ，此对照实验的目的是过程中 ______ 是否被杂菌污染．
              难度：中等
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            • 5． 据报道，从部分企业生产的速冻食品中检出葡萄球菌超标，“细菌门”事件引起公众普遍关注．葡萄球菌能分解卵黄中的卵磷脂，在含卵黄的固体培养基上形成的菌落周围会出现特有的乳白色的乳浊环．请回答下列问题．
              （1）某兴趣小组欲检测某果汁类食品中含有葡萄球菌，请帮他们完善下列步骤．
              ①配制培养基：称取适量的牛肉膏、蛋白胨．NaCl、琼脂等，加入蒸馏水，搅拌加热至完全溶解后调节PH，分装到锥形瓶后进行 ______ ，在无菌状态下加入卵黄液（100mL10%灭菌NaCl溶液中加一个鸡蛋黄，振荡均匀）摇匀后立即倒平板．
              ②接种：取待检测果汁2.5ml加入22.5mL灭菌生理盐水中，制成接种样液．
              实验组：将接种样液用 ______ 法接种在含卵黄的固体培养基上．
              对照组：将 ______ 用划线法接种在含卵黄的固体培养基上或不接种作为 ______ 对照．
              将上述接种后的培养皿同时放在36℃的恒温箱中培养48h．
              ③观察：观察培养基表面 ______ ．
              （2）培养基中的牛肉膏和蛋白胨为葡萄球菌生长和繁殖提供 ______ ．
              葡萄球菌能耐受高浓度的NaCl溶液，所以在配制培养基时加入高浓度的NaCl溶液可以将它分离出来，此培养基属于 ______ 培养基．
              （3）若要统计某土壤样品中该活菌数目，宜采用 ______  法．
              难度：中等
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            • 6． 为获得果胶酶高产菌株，科研人员进行了下列分离、筛选、鉴定工作．
              （1）为分离果胶酶产生菌，科研人员配制了下表所示成分的培养基，该表空白处的两种成分是 ______ ．制备的培养基常用 ______ 法进行灭菌．
              K2HPO4 MgSO4 NaNO3 FeSO4 琼脂
              0.1g 0.5g 3g 0.01g 2g 15g 加至1L
              （2）科研人员将采集的果园土壤放入无菌水中，震荡混匀，制成悬液．为获得较均匀分布的单菌落，还需要将悬液进行 ______ ，用 ______ 法接种于固体培养基上．接种后的培养基 ______ 状态放入培养箱．
              （3）选择单菌落数目适宜的培养基，加入一定浓度的刚果红溶液（果胶与刚果红结合后显红色），一段时间后洗去培养基表面的刚果红溶液，观察并比较菌落和 ______ 直径的比值，筛选果胶酶高产菌株．
              （4）将获得的菌株进行液体培养后，从培养液的 ______ （填“上清液”或“沉淀物”）获得粗提的果胶酶．将一定量的粗提果胶酶与适量果胶溶液混合，一定时间后测定吸光值来测定酶活性．进行吸光值测定时，需将 ______ 与等量果胶溶液混合，作为实验的对照．
              难度：中等
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            • 7． 尿素是一种重要的农业肥料，但是不经过细菌的分解，就不能更好地被植物利用．生活在土壤中的微生物种类和数量繁多，同学们试图探究土壤中微生物对尿素是否有分解作用，设计了以下实验，并成功筛选到能高效降解尿素的细菌（目的菌），培养基成分如下表所示，实验步骤如图所示，请回答下列问题：

              KH2PO4 1.4g
              Na2HPO4 2.1g
              MgSO4•7H2O 0.2g
              葡萄糖 10g
              尿素 1g
              琼脂 15g
              将上述物质溶解后，用自来水定容到1000m3
              （1）此培养基能否用于植物组织培养？ ______ ，理由是 ______ ．
              （2）培养基中氮源是 ______ ，这种培养基在功能上属于 ______ 培养基，目的是只允许能合成 ______ 的微生物生长，其他微生物均不能生长．
              （3）欲从土壤中分离获取上述特定微生物，可采用 ______ 法进行接种．
              （4）在以尿素为唯一碳源的培养基中加入 ______ ，使指示剂变红色，而筛选纤维素分解菌的方法是 ______ 法．
              难度：中等
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            • 8． 回答下列有关果酒制作的问题：
              （1）将葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，瓶内空气的主要作用是 ______ ．制作葡萄酒的过程中，要将温度严格控制在18～25℃的原因是 ______ ．
              （2）为提高果酒的品质，需要获得纯净的酵母菌，这样需要制备培养基纯化酵母菌．
              ①在制备培养基过程的步骤中，下列操作不需要的是 ______ （填序号）．
              A．灼烧灭菌                   B．高压蒸汽灭菌
              C．在酒精灯火焰附近倒平板      D．操作者的衣着和手进行消毒
              ②纯化某种微生物，常用平板划线或稀释涂布平板法，这两种方法都可以达到 ______ 的目的．若要测定微生物的数量，需选用 ______ 法进行计数．从功能上分析，纯化所用培养基属于 ______ 培养基．
              ③在实际操作中，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养，以保证能从中选择出菌落数在 ______ 之间的平板进行计数．
              难度：中等
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            • 9． 临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验．实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性．
              回答下列问题：
              （1）为了从样本中获取致病菌菌落，可用 ______ 法或 ______ 法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得．
              （2）取该单菌落适当稀释，用 ______ 法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板．
              （3）为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A ______ ；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B ______ ；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明 ______ ；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的 ______ ．
              （4）根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素 ______ ．
              难度：中等
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            • 10． 微生物培养与分离技术是生物中重要的实验技术．根据有关的微生物知识，回答下列问题：
              （1）培养基的制备需经过计算、称量、溶化和 ______ 、 ______ 等过程．上述过程中，需要在超净工作台上操作的是 ______ ．
              （2）纯化菌种时为了得到单一菌落，常采用的接种方法是 ______ 和 ______ ；在对培养液中酵母菌的种群数量进行统计时，计数的方法是 ______ ．
              （3）为达到筛选土壤中分解尿素细菌的目的，平板内的固体培养基应选择尿素作为唯 ______ ；培养基中加入指示剂 ______ 以鉴定其中是否含有能分解尿素的细菌．
              （4）若要筛选分解纤维素的细菌，在土壤取样、选择培养后，需进行 ______ 和 ______ 操作，通过染色并观察 ______ 的有无挑选出所需菌种．
              难度：中等
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