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          50条信息

            • 1.
              将马铃薯去皮切块,加水煮沸一定时间,过滤得到马铃薯浸出液。在马铃薯浸出液中加入一定量蔗糖和琼脂,用水定容后灭菌,得到M培养基。
              回答下列问题:
              (1)M培养基着用于真菌的筛选,则培养基中应加入链霉素以抑制 ______ 的生长,加入了链霉素的培养基属于 ______ 培养基。
              (2)M培养基中的马铃薯浸出液为微生物生长提供了多种营养物质,营养物质类型除氮源外还有 ______ (答出两点即可)。氮源进入细胞后,可参与台成的生物大分子有 ______ (答出两点即可)。
              (3)若在M培养基中用淀粉取代蔗糖,接种土壤滤液并培养,平板上长出菌落后可通过加入显色剂选出能产淀粉酶的微生物。加入的显色剂是该方法能筛选出产淀粉酶微生物的原理是 ______ 。
              (4)甲、乙两位同学用稀释涂布平板法测定某一土壤样品中微生物的数量,在同一稀释倍数下得到以下结果:
              甲同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是110、140和149,取平均值133;
              乙同学涂布了3个平板,统计的菌落数分别是27、169和176,取平均值124。
              有人认为这两位同学的结果中,乙同学的结果可信度低,其原因是 ______ 。
            • 2.
              酵母的蛋白质含量可达自身干重的一半,可作为饲料蛋白的来源。有些酵母可以利用工业废甲醇作为碳源进行培养,这样既可减少污染又可降低生产成本。研究人员拟从土壤样品中分离该类酵母,并进行大量培养。如图所示为操作流程,请回答下列问题:

              (1)配制培养基时,按照培养基配方准确称量各组分,将其溶解、定容后,调节培养基的 ______ ,及时对培养基进行分装,并进行 ______ 灭菌。
              (2)取步骤②中不同梯度的稀释液加入标记好的无菌培养皿中,在步骤③中将温度约 ______ (在25℃、50℃或80℃中选择)的培养基倒入培养皿混匀,冷凝后倒置培养。
              (3)挑取分离平板中长出的单菌落,按步骤④所示进行划线。下列叙述合理的有 ______ 。
              a.为保证无菌操作,接种针、接种环使用前都必须灭菌
              b.划线时应避免划破培养基表面,以免不能形成正常菌落
              c.挑取菌落时,应挑取多个菌落,分别测定酵母细胞中甲醇的含量
              d.可以通过逐步提高培养基中甲醇的浓度,获得甲醇高耐受株
              (4)步骤⑤中,为使酵母数量迅速增加,培养过程中需保证充足的营养和 ______ 供应。为监测酵母的活细胞密度,将发酵液稀释1000倍后,经等体积台盼蓝染液染色,用25×16型血细胞计数板计数5个中格中的细胞数,理论上 ______ 色细胞的个数应不少于 ______ ,才能达到每毫升3×109个活细胞的预期密度。
            • 3. (12分)[生物――生物技术实践]


              乳糖酶能够催化乳糖水解为葡萄糖和半乳糖,具有重要应用价值。乳糖酶的制备及固定化步骤如下:

              产乳糖酶微生物L的筛选 产乳糖酶微生物L的培养 乳糖酶的提取纯化 乳糖酶的固定化

              (1)筛选产乳糖酶的微生物L时,宜用          作为培养基中的唯一碳源。培养基中琼脂的作用是            。从功能上讲,这种培养基属于              。 

              (2)培养微生物L前,宜采用            方法对接种环进行灭菌。 

              (3)纯化后的乳糖酶可用电泳法检测其分子量大小。在相同条件下,带电荷相同的蛋白质电泳速度越快,说明其分子量越              。 

              (4)乳糖酶宜采用化学结合法(共价键结合法)进行固定化,可通过检测固定化乳糖酶的            确定其应用价值。除化学结合法外,酶的固定化方法还包括                             、离子吸附法及交联法等。

            • 4. 人工瘤胃模仿了牛羊等反刍动物的胃,可用来发酵处理秸秆,提高秸秆的营养价值。为了增强发酵效果,研究人员从牛胃中筛选纤维素酶高产菌株,并对其降解纤维素能力进行了研究。请回答下列问题:


              (1)在样品稀释和涂布平板步骤中,下列选项不需要的是    (填序号)。

              ①酒精灯 ②培养皿 ③显微镜 ④无菌水

              (2)在涂布平板时,滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是                        

              (3)向试管内分装含琼脂的培养基时,若试管口粘附有培养基,需要用酒精棉球擦净的原因是          。 

              (4)刚果红可以与纤维素形成红色复合物,但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应。研究人员在刚果红培养基平板上,筛到了几株有透明降解圈的菌落(见图)。图中降解圈大小与纤维素酶的      有关。图中降解纤维素能力最强的菌株是    (填图中序号)。 

              (5)研究人员用筛选到的纤维素酶高产菌株J1和J4,在不同温度和pH条件下进行发酵,测得发酵液中酶活性的结果见下图,推测菌株    更适合用于人工瘤胃发酵,理由是                   。 

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