（一）下列问题是有关大肠杆菌的培养实验，请回答：

(1)配制培养大肠杆菌的培养基时，根据“细菌喜荤，霉菌喜素”的规律，通常在培养基中加入蛋白胨和__________作为营养物质，为维持一定的渗透压，常需加入一定量的_______。

(2)大肠杆菌培养和分离的实验中，在____________中进行扩大培养，培养液经________后，在LB固体培养基上进行_______，并将培养皿_______放在恒温培养箱中培养，可以获得如图效果。为了检测接种、培养过程是否受杂菌污染以及________________，应同时将未接种的培养基放入恒温培养箱培养。

（二）现代人吃什么都讲究天然，所以目前市场上果汁饮料、果酒、果醋越来越受到人们的青睐。请回答：

(1)果汁中的果胶不仅影响______率，还使果汁浑浊，制备时常加入来自________等微生物的果胶酶。为便于工业化使用，常对酶采用___________技术，常用方法有吸附法、包埋法等。

(2)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其②生产过程中利用了__________的发酵作用，①过程需将温度控制在__________。

(3)若要提高果醋的产量，发酵过程中关键要提供___________、_________等条件。

下列关于微生物的培养和分离的叙述中，不正确的是

为了调查某城市自来水的水质情况，某研究小组对自来水水样中的大肠杆菌进行了分离和含量测定，请回答下列问题：

（1）该小组采用平板划线法分离水样中的细菌，操作时，每次划线之前都要对接种环进行灭菌目的是_____________。在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线，这样做的目的是____________________。

（2）在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，结果发现空白对照组的平板上出现了5个菌落，请分析说明可能的原因（写出两点）：①________；②_______。

（3）检测自来水中大肠杆菌的数量，可采用稀释涂布平板法，选用__________鉴别培养基。该研究小组在统计菌落数目时，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这样可以防止因___________而遗漏菌落的数目。

（4）稀释涂布平板法测定细菌数量，实际活菌数量要比测得的数量______，因为________。

下列有关培养基和菌种鉴定的叙述不正确的是( )

苯酚是工业生产排放的有毒污染物质，自然界中存在着降解苯酚的微生物。某工厂产生的废水中含有苯酚，为了降解废水中的苯酚，研究人员从土壤中筛选获得了只能降解利用苯酚的细菌菌株，筛选的主要步骤如图所示，①为土壤样品。请回答下列问题：

(1)②中培养目的菌株的培养基中应加入_____作为碳源，从功能上讲，该培养基属于

_________培养基。②中不同浓度碳源的培养基________ (填“影响”或“不影响”)细菌的数量，如果要测定②中活细菌数量，常采用______________法。

(2)④为对照，微生物在④中不生长，在⑤中生长，④与⑤培养基的主要区别在于____________________________________________________；使用______________________法可以在⑥上获得单菌落。采用固体平板培养细菌时进行倒置培养的原因是__________________________________________________________。

(3)实验过程中如何防止其他微生物的污染？

_______________________________________________________（至少填两种方法）。

选修1：生物技术实践]

 临床试用抗生素前，有时需要做细菌耐药实验。实验时，首先要从病人身上获取少量样本，然后按照一定的实验步骤操作，以确定某致病菌对不同抗生素的敏感性。                           

回答下列问题：

（1） 为了从样本中获取致病菌菌落，可用_______法或_________法将样本接种于固体培养基表面，经过选择培养、鉴别等步骤获得。

（2） 取该单菌落适当稀释，用______法接种于固体培养基表面，在37℃培养箱中培养24h，使其均匀生长，布满平板。

（3） 为了检测该致病菌对于抗生素的敏感性，将分别含有A，B，C，D四种抗生素的滤纸片均匀置于该平板上的不同位置，培养一段时间后，含A的滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对抗生素A_______（填“敏感”或“不敏感”）；含B的滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对抗生素B_____（填“敏感”或“不敏感”）；含C的滤纸片周围的透明圈比含A的小，说明________；含D的滤纸片周围的透明圈也比含A的小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是抗生素D的________。

(4)根据上述实验结果，为达到抗菌目的，最好应选择抗生素_______。

下表为某培养基的配方，下列叙述不正确的是

研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用，两者的提取及应用如下图所示。

（1）柚皮易焦糊，宜采用________法提取柚皮精油，新鲜的柚皮干燥去水，并用________浸泡处理。

（2）培养基中的尿素和牛肉膏可为乳酸菌A生长提供________________________。

（3）做抑菌实验时，在长满致病菌的平板上，会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

(4)柚皮油也可以用萃取法来提取，原因是________________________。从下图分析，提高萃取效果的方法是__________________________、__________________________。

回答下列有关微生物培养的相关问题：

Ⅰ．已知微生物A可以产生油脂，微生物B可以产生脂肪酶。脂肪酶和油脂可以用于生物柴油的生产。回答下列问题：

（1）显微观察时，微生物A菌体中的油脂通常可用____________染色。微生物A产生的油脂不易挥发，可用____________（填"萃取法"或"水蒸气蒸馏法"）从菌体中提取。

（2）为了从自然界中获得能产生脂肪酶的微生物B的单菌落，可从含有油料作物种子腐烂物的土壤中取样，并应选用以_______为碳源的______（物理状态）培养基进行培养。培养的结果发现没有得到微生物B的菌落或者数量极少，可在此操作之前增加____________这一操作步骤。

（3）若要测定微生物B的菌体数，可在显微镜下用____________直接计数，若要测定活菌数量，可选用____________法进行计数。

Ⅱ．某医院有一个罕见的细菌感染患者，医生想通过抑菌实验，从常用的抗生素一青霉素（A），氨苄青霉素（B），庆大霉素（C），氯霉素（D），环丙沙星（E）中寻找对病人最有效的一种．部分实验步骤如下：

第一步：按下方所列配方配置培养基：

第二步：取单菌落适当稀释，用3支无菌滴管吸取从此病人体内分离到的细菌悬浮液2滴，滴于3个平板培养基表面，然后分别用3个无菌涂布棒涂匀，37℃恒温箱中培养，使细菌长满平板表面。

（4）上述培养基配方中作为蛋白胨为微生物的生长提供了____________________。

（5）如图圆环表示一个培养皿平面，用浸有不同抗生素的圆纸片间隔放到培养基土，如下图所示。

培养2d后，A滤纸片周围出现透明圈，说明该致病菌对青霉素____________；B滤纸片周围没有出现透明圈，说明该致病菌对氨苄青霉素____________；C滤纸片周围的透明圈比A滤纸片周围的透明圈小，说明____________；D滤纸片周围的透明圈比A滤纸片的也小，且透明圈中出现了一个菌落，在排除杂菌污染的情况下，此菌落很可能是氯霉素的____________。

（6）经测量透明圈大小，得到如下结果（单位mm）：

那么，你建议医生使用哪一种抗生素？____________．

回答下列与酵母菌有关的问题：

（1）培养酵母菌的培养基应采用________法灭菌。若将酵母菌划线接种在平板上，培养一段时间后会观察到菌落，菌落的含义是_______________。

（2）酵母菌液体培养时，若通入氧气，可促进_______（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）；若进行厌氧培养,可促进______（填“菌体快速增殖”、“乙醇产生”或“乳酸产生”）。

（3）制作面包时，为使面包松软通常要在面粉中添加一定量的酵母菌，酵母菌引起面包松软的原因是___________。

（4）为筛选和纯化酵母菌，根据用途应选用 ____________培养基，常用的接种方法____________和____________．扩大培养过程中需要对酵母菌进行计数，取0.2mL样品，用固体培养基对其培养，最后统计了三个平板，菌落数分别是200、180、220．则样品中微生物的数量为__________个/mL．该统计结果_____________（低于、高于）实际值。