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            • 1.

              下列是与微生物培养有关的问题,请回答:

              ⑴某细菌固体培养基的组成成分是、葡萄糖、尿素、琼脂和蒸馏水,其中碳源是_____,氮源是_____。已知只有能合成脲酶的细菌才能在该培养基上生长,该培养基属于_____培养基。按照化学成分分类,该培养基属于_____培养基。从同化作用类型看,用该培养的细菌属于_____

              ⑵一小组采用稀释涂布平板法检测水样中细菌含量.在涂布接种前,随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间,这样做的目的是 ______ ;然后,将1mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37,据此可得出每升水样中的活菌数为 ______ .
              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过 ______ 灭菌,在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线,这样做的目的是 ______ .
              (4)纯化微生物,可以用_______________方法
            • 2. 金黄色葡萄球菌是一种具有高度耐盐性的微生物,可引起人类肺炎、肠炎等疾病。金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时,可破坏菌落周围的红细胞,使其褪色。下图为定性检测鲜牛奶中是否存在金黄色葡萄球菌的操作流程,请回答相关问题。

              (1)按细胞结构分类,金黄色葡萄球菌属于______生物,从培养过程分析,金黄色葡萄球菌可进行_______呼吸。

              (2)7.5%NaCl肉汤培养基可为微生物提供的营养成分包括________________,用7.5%NaCl肉汤培养基进行选择培养的主要目的是______________________。

              (3)操作中在血平板上的接种方法是____________,接种操作前后需要对接种工具进行___________灭菌。

              (4)在制备血平板时需将pH调节至________(“微酸性”或“微碱性”)后灭菌,待培养基冷却后,再加入适量血液。经多次规范操作、重复实验,血平板上均出现_____________________的菌落,初步证明鲜牛奶中存在金黄色葡萄球菌,但鲜牛奶供应商仍认为此菌并非鲜牛奶所携带,因此要对本操作进行完善,完善的方案是_______________________________。

            • 3.

              土壤中含有大量的难溶性磷酸盐,为了从土壤中筛选出能够将难溶性磷酸盐转化为植物能吸收的可溶性磷的优良解磷菌株,以便将其添加到有机肥中,改善植物磷元素供应。科研人员进行如下实验:


                                             图1                                                               图2

              实验原理:固体培养基中难溶性磷酸盐在微生物的作用下溶解,会在菌落周围形成透明圈(如图),透明圈直径(D)与菌落直径(d)的比值(D/d)代表微生物溶解磷的能力大小。实验步骤:

                  步骤1 取某地区土样5 g制得土壤溶液后稀释,取稀释液1 mL接种到基础培养基A上,在适宜温度下培养72 h。                  

                  步骤2 在基础培养基A上用接种环挑取代表性菌落再次接种,培养3~4 d后观察菌落特征和透明圈的大小。

              菌株

              透明圈直径(D)

              菌落直径(d)

              D/d

              M-3-01

              18.8

              12.3

              1.5

              B3-5-6

              20.7

              8.0

              2.6

              T1-4-01

              9.1

              6.5

              1.4

              (1)从物理形态看,培养基A属于________培养基。培养基中磷源应该是_____________。

              (2)步骤1中接种方法是________,步骤2中接种环的灭菌方法是________。

              (3)根据实验结果可以确定溶解磷能力最强的菌株是________。

              (4)为进一步测定初步筛选的三种菌株实际溶解磷的能力,研究人员将它们接种到基础培养基B中,并在37 ℃、200 r·min-1摇床培养,定期取上清液,测定溶液中可溶性磷含量,得到图2所示曲线。

              ①用摇床进行培养的好处是____________________、___________________。

              ②结果表明最优良的解磷菌株是________________________________________。

            • 4.

              牛奶富含蛋白质长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。

              (1)图中步骤①称为_______消毒法。步骤②是_______________。

              (2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供_________________。进行步骤③操作时,应选用下列中的哪种工具?______。为了避免杂菌污染,此步骤应在____________附近进行。

              (3)将接种后的培养基和作为对照的________________同时放入37℃恒温培养箱中,培养36小时。取出后统计各平板的菌落数,结果如表所示。应该选择其中稀释倍数为______的平板进行计数,经过消毒后的牛奶中,细菌数大约是_________/mL。

            • 5.

              某生物兴趣小组通过测定土壤中的微生物的种类、含量等来了解其土质情况,并做了相关微生物的分离工作。回答相关问题。

              ⑴获得纯净培养物的关键是___________________________,这是研究和应用微生物的前提。

              ⑵从土壤中分离纤维素分解菌时,常从公园里、街道旁、花盆中的土壤或是农田、菜园土选取土壤时,原因是___________________________。

              ⑶该小组对某种菌进行扩大培养时等分为两组,A组静置培养,B组振荡培养。结果发现B组比A组的细菌要多得多,原因是_______________________________(答两点)。

              ⑷小组进一步发现,该土壤中只有一种真菌,欲使其从土壤中与其它细菌分离开,可在牛肉膏-蛋白胨培养液中加入___________。分离纯化后提取DNA测序发现含有产脲酶的基

              因序列,请设计实验证明该种真菌可合成脲酶(简要说明实验步骤,结果,结论。相关试剂、仪器、菌种等都可提供)____________________

            • 6.

              苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中,对环境有严重危害。某同学准备依据如图操作步骤,从处理废水的活性污泥中分离筛选苯酚降解高效菌株。请回答下列问题:

              (1)苯酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K2HPO4、MgSO4、苯酚和水,其中可作为碳源的有___________。

              (2)将采集到的样品接种培养,苯酚用量应随转接次数增加而逐渐_______,以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集,应进一步__________,以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外,还必须添加_________。

              (3)下图为连续划线法示意图,在图中________(填图中序号)区域更易获得单菌落。

              (4)采用比色测定法(使用苯酚显色剂)检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应,下表中1~5号比色管的苯酚浓度应分别为______。

              试管号

              1

              2

              3

              4

              5

              6

              苯酚浓度(mg/L)

               

               

               

               

               

              1

              如果废水为50 mg/L苯酚溶液,降解后约有21%的苯酚残留,则需将残留液稀释_____(填序号:①5 ②10 ③20)倍后,再进行比色。

            • 7.

              如下表所示为某微生物培养基的配方,请回答:


              成分

              含量

              成分

              含量

              NaNO3

              3 g

              FeSO4

              0.01 g

              K2HPO4

              1 g

              (CH2O)

              30 g

              琼脂

              15 g

              H2O

              1 000 ml

              MgSO4·7H2O

              0.5 g

              青霉素

              0.1万单位


              (1)依物理性质,该培养基属于__________培养基。依用途划分,则属于_________培养基。

              (2)根据培养基原料,所培养微生物的同化作用类型是______________,培养的微生物可能是_______________。

              (3)该培养基中的碳源是_____________。不论何种培养基,在各成分都溶化后分装前,要进行灭菌。

              (4)若用该培养基培养尿素分解菌,应除去的物质是________________,加入的物质是_____________。

              (5)为检测尿素分解菌的存在与否,还应加入________________,将呈___________反应。

            • 8.

                Ⅰ.某同学以新鲜的泡菜滤液为实验材料纯化乳酸菌。请回答:

                  (1)分离纯化乳酸菌时,首先需要用无菌水对泡菜滤液进行梯度稀释,进行梯度稀释的目的是保证在            培养基上获得__________。

                  (2)制作的培养基必须使用__________(填仪器名称)灭菌后才能使用。如果在配制培养基的过程中加入碳酸钙,制出的培养基就显得不透明,用这种培养基来分离纯化乳酸菌,碳酸钙起到的作用有____________和____________。肉眼能明显观察到菌落时应挑选出__________的菌落作为候选菌。

                  (3)获得的乳酸菌菌种若要采取临时保藏,首先要将菌种接种到试管的____________上,并在适宜的温度下培养,当菌落长成后才放入40度的冰箱保存。

                  Ⅱ.回答下列与芳香油提取相关的内容。

                  (1)实验室提取胡萝卜素常用____________法,而提取植物芳香油常用____________法。

                  (2)如果蒸馏过程中不进行冷却,则芳香油提取量会____________。

                  (3)在对玫瑰精油粗提取的过程中,玫瑰花瓣与清水的质量比为__________,向乳浊液中加入质量浓度为0.1g/mL的NaCI溶液的目的是__________用分液漏斗分离得到油层后,为了进一步去除水分,可以加入__________。

            • 9.

              下表所示为某微生物培养基配方,请分析回答:

              (1)根据物理性质,该培养基属于_______培养基;根据用途划分则属于________培养基。

              (2)根据培养基原料,所培养的微生物的代谢类型,同化作用类型:_____________,异化作用类型:______________培养的微生物可能是____________

              (3)该培养基中的碳源是_____________,氮源是_____________。

              (4)如果要鉴别自来水中的大肠杆菌是否超标,至少要加入__________和________,除去___________________。

            • 10.

              利用微生物分解淀粉生产糖浆具广阔的应用前景。某同学为了从长期种植马铃薯的土壤中分离出能够高效分解淀粉的细菌,进行如下实验:

              (1)实验步骤:

              ①配制以           为碳源的固体培养基,为了使培养基凝固成固体,应该向培养基中加入的物质是               

              ②将土壤样品接种到已灭菌的培养基上,在恒温培养箱中培养一段时间后,培养基上出现        

              ③将接种针用                   法灭菌后,从②中的培养基上挑取一定量细菌,接种入          (固体、液体)培养基,在恒温摇床上培养24h,使细菌大量繁殖。

              ④配制与①相同的培养基,并加入少量碘液,使培养基呈蓝紫色。用                  法将上一步大量繁殖后的细菌接种到已灭菌的培养基上。

              ⑤培养一段时间后,观察菌落周围培养基的颜色变化和变化范围的大小。周围出现较大的          现象的菌落即为初选菌落,经进一步分离、纯化后即可达到实验目的。

              (2)上述实验步骤中,从用途看,①所用培养基属于             培养基,⑤所用培养基属于             培养基。

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