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            • 1.

               牛奶中富含蛋白质,长期饮用有助于增强体质,但牛奶同时也是多种疾病的传播载体。国家标准是每毫升牛奶中细菌数小于30000个。以下是牛奶消毒及细菌检测实验。


              (1)图中步骤①称为          消毒法。步骤②是                 

              (2)培养基中的蛋白胨可以为微生物提供        。进行步骤③操作时,应选用下列中的哪种工具进行涂布?                 。为了避免杂菌污染,此步骤应在          附近进行。

               

              牛奶稀释倍数

              102

              103

              104

              平板1菌落数

              87

              10

              1

              平板2菌落数

              83

              12

              1

              平板3菌落数

              85

              10

              0

              (3)将接种后的培养基和作为对照的      同时放入37℃恒温培养箱中,培养36小时。取出后统计各平扳的菌落数,结果如上表所示。应该选择其中稀释倍数为               的平板进行计数,经过消毒后的5ml牛奶中,细菌数大约是           个。

            • 2. 为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。请回答下列问题:

              (1)若想检测水样中细菌含量,常采用________法进行接种。从物理性质看选用的培养基属________ 培养基。在接种前,需要先选取若干灭菌后的空白平板进行培养,其目的是________。

              (2)该研究小组将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接人0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过________灭菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________。

            • 3. 微生物接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法,下列关于这两种接种方法的叙述中,不正确的是
              A.都只能用于固体培养基接种
              B.都能用于微生物的计数
              C.接种培养后均可获得单菌落
              D.接种工具使 用后需要灭菌
            • 4.

              [生物——选修 1:生物技术实践]

              下表为培养某种微生物的培养基配方,请回答有关问题:

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              蒸馏水

               

               

               

               

               

               

              1.4 g

              2.1 g

              0.2 g

              10.0 g

              1.0 g

              定容至1000 mL

               

               

               

               

               

               


              (1)该种培养基可用来培养 ________的细菌。从用途看,这种培养基称为_______培养基。

              (2)如果要通过统计培养基中的菌落数来估算样品中的细菌数,则在上述培养基中还需要添加作为凝固剂,接种时应采用法才能达到目的。这种方法统计到的是样品中_______的数目,除了这种方法,还有也是测定微生物数量的常用方法。在用不同浓度的稀释液培养得到的平板中,为保证统计的数目结果较为准确,一般选择菌落数在_______的平板进行计数。

              (3)某同学从土壤中分离出目的细菌以后,若要对其作进一步的鉴定,可在上述的培养基中加入_______指示剂,培养该菌后,如果指示剂变_______,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

            • 5. (13分)同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题:

              KH2PO4

              1.4 g

              Na2HPO4

              2.1 g

              MgSO4·7H2O

              0.2 g

              葡萄糖

              1 g

              尿素

              10 g

              琼脂

              15 g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂,细菌合成的________将尿素分解为________,pH升高,使指示剂变为红色。

              (2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌, 这种培养基属于_____培养基。

              (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验中需要振荡培养,原因是______________________。

              (4)下图是利用________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

              (5)关于下图的操作方法和结果,叙述正确的是    __。

              A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

              B.划线操作须在火焰上进行

              C.在5区域中才可以提到所需菌落

              D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

            • 6. (10分).在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。

              (1) 下图是利用              法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步       分散到培养基的表面。

              (2) 分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述        成分,并加入       物质,以补充       源。若用于培养纤维素分解菌,应加入            物质,为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入          染料,将呈            反应。

              (3) 三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,取平均值248;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

               在三位同学的统计中,只有一位同学的统计是正确的,指出另两位同学的统计为什么不正确?

                                                                                                                                                      

            • 7. 在以尿素作为唯一氮源的培养基上大部分微生物无法生长;在培养基中加入青霉素可以抑制细菌和放线菌;在培养基中加入10%酚可以抑制细菌和霉菌。利用上述选择培养基依次能从混杂的微生物群体中分离出(      )
              A.乳酸菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
              B.分解尿素的细菌、大肠杆菌、放线菌
              C.分解尿素的细菌、霉菌、放线菌
              D.固氮细菌、金黄色葡萄球菌、放线菌
            • 8. “筛选”是分离和培养生物新类型常用的手段,下列有关技术中不能筛选成功的是(      )
              A.在全营养的LB培养基中,筛选大肠杆菌
              B.在以尿素为唯一氮源的固体培养基中,筛选能够分解尿素的微生物
              C.用纤维素为唯一碳源的培养基,筛选能分解纤维素的微生物
              D.在培养基中加入不同浓度的氯化钠,筛选抗盐突变体植物
            • 9. (8分)酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答: 

              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是__________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_________________。

              (2)在对该菌种进行培养时,与常规培养基相比还需要额外在培养基中添加______________;在泡菜的腌制过程中,要注意控制腌制的时间、温度和_____________,否则容易造成细菌大量繁殖。

              (3)为了保持所获得菌种纯净,需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏,则应将菌种接种到试管的__________________上,放入4℃冰箱中可保藏3~6个月;若要长期保存,可将菌液与灭菌的_____________混匀,放在-20℃的冷冻箱中保存。

              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持_____________,理由是___________________________________________________。

            • 10. 办公和学习产生大量废纸,其主要成分是木质纤维,人类正努力将其转化为一种新的能源乙醇.如图是工业上利用微生物分解纤维素生产乙醇的基本工作流程,请回答相关问题:

              (1)自然界中①环节需要的微生物大多分布在            的环境中.将从土壤中获得的微生物培养在以            为碳源,并加入            的培养基上,筛选周围有            的菌落.

              (2)分解废纸中纤维素的微生物能分泌纤维素酶,该酶是由3种组分组成的复合酶,其中的葡萄糖苷酶可将           分解成           

              (3)根据测定结果,①环节常选择毛霉,则②中获得的酶是           .该酶至少包括三个组分                       

              (4)纸张加工过程中,有时要加入一些由植物芳香油制成的香精,芳香油的提取方法有                          等(至少写出2种);也可以用植物色素使纸张着色,根据植物色素易溶于有机溶剂的特点,可以考虑使用           法提取植物色素.

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