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            • 1. 下图甲、乙是微生物接种常用的两种方法,请回答相关问题:

              (1)图甲是利用__________法进行微生物接种,图乙是利用________法进行微生物接种。这两种方法所用的接种工具分别是______和_________;对这两种接种工具进行灭菌和消毒的方法依次是________和酒精消毒。

              (2)接种操作为什么一定要在火焰附近进行?___________________。

              (3)接种后,在固体培养基上培养细菌时为什么进行倒置培养?__________________。

              (4)下图是采用上述接种方法接种后培养的效果图解,其接种方法是____(填“图甲”或“图乙”)。

            • 2.

              如下图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题:


               

               

              (1)微生物生长繁殖所需的主要营养物质有无机盐、水、________四类。①是制备培养基时________中的主要操作,该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰,目的是通过灼烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基,实验操作中的灭菌方法还有_________。

              (2)该纯化醋酸菌的接种方法是______________;完成步骤④的操作,接种共需要________次灼烧处理。如果需要统计醋酸菌液中活菌的数目可以采用______________法进行接种;培养过程中,常选择菌落数在__________的平板统计计数。

              (3)食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成__________酶的微生物能够降解纤维素,该酶是一种复合酶,它至少包括__________________。为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入__________染料,形成________色复合物,若产生__________,则证明有纤维素分解菌存在。

            • 3.

              图示为稀释涂布平板法的操作流程。请回答下列问题:

              (1)实验室获得纯净培养物的关键是________。

              (2)图示流程的主要操作包括________和________。

              (3)一般选择菌落数在________的平板进行计数,结果比较准确。

              (4)当培养基中纤维素成为唯一碳源时,可筛选出________。要证明其有选择作用,可以用________作对照,比较菌落数目;还可以在培养基中加入刚果红染料,如果________,也证明其选择作用。

            • 4. 在农业生产中发现一种广泛使用的除草剂(含氮有机化合物)在土壤中不易降解,长期使用可污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤,可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌(已知该除草剂在水中溶解度低,含一定量该除草剂的培养基不透明)。

              (1)制备土壤浸出液时,为避免菌体浓度过高,需将浸出液进行________处理。

              (2)要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌,上述培养皿中培养基为________体培养基。

              (3)在第2次及其后每次划线前需对接种环进行________,并且从上次划线________端开始。

              (4)培养后发现,只有很少菌落出现,大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是________或有氧条件抑制了这些细菌的生长。

              (5)在固体培养基上形成的菌落中,无透明带菌落利用的氮源主要是________,有透明带菌落利用的氮源主要是________,据此可筛选出目的菌。

            • 5. 为了调查某河流的水质状况,某研究小组测定了该河流水样中的细菌含量,并进行了细菌分离等工作。请回答下列问题:

              (1)若想检测水样中细菌含量,常采用________法进行接种。从物理性质看选用的培养基属________ 培养基。在接种前,需要先选取若干灭菌后的空白平板进行培养,其目的是________。

              (2)该研究小组将1 mL水样稀释100倍,在3个平板上用涂布法分别接人0.1 mL稀释液;经适当培养后,3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为________。

              (3)该小组采用平板划线法分离水样中的细菌,操作时,接种环通过________灭菌。在第二次及以后的划线时,总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是________。

            • 6.

              [生物——选修 1:生物技术实践]

              下表为培养某种微生物的培养基配方,请回答有关问题:

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              蒸馏水

               

               

               

               

               

               

              1.4 g

              2.1 g

              0.2 g

              10.0 g

              1.0 g

              定容至1000 mL

               

               

               

               

               

               


              (1)该种培养基可用来培养 ________的细菌。从用途看,这种培养基称为_______培养基。

              (2)如果要通过统计培养基中的菌落数来估算样品中的细菌数,则在上述培养基中还需要添加作为凝固剂,接种时应采用法才能达到目的。这种方法统计到的是样品中_______的数目,除了这种方法,还有也是测定微生物数量的常用方法。在用不同浓度的稀释液培养得到的平板中,为保证统计的数目结果较为准确,一般选择菌落数在_______的平板进行计数。

              (3)某同学从土壤中分离出目的细菌以后,若要对其作进一步的鉴定,可在上述的培养基中加入_______指示剂,培养该菌后,如果指示剂变_______,可初步鉴定该种细菌能够分解尿素。

            • 7. (13分)同学们为了探究土壤中的微生物对尿素是否有分解作用,设计了以下实验,并成功筛选到能高效降解尿素的细菌(目的菌)。培养基成分如下表所示,实验步骤如下图所示。请分析回答问题:

              KH2PO4

              1.4 g

              Na2HPO4

              2.1 g

              MgSO4·7H2O

              0.2 g

              葡萄糖

              1 g

              尿素

              10 g

              琼脂

              15 g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL

              (1)简述土壤中可分解尿素的细菌的鉴定方法及原理:在以尿素为唯一氮源的培养基中加入________指示剂,细菌合成的________将尿素分解为________,pH升高,使指示剂变为红色。

              (2)培养基中加入尿素的目的是筛选目的菌, 这种培养基属于_____培养基。

              (3)“目的菌”生长所需的氮源和碳源分别来自培养基中的________和________,实验中需要振荡培养,原因是______________________。

              (4)下图是利用________法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

              (5)关于下图的操作方法和结果,叙述正确的是    __。

              A.操作前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌

              B.划线操作须在火焰上进行

              C.在5区域中才可以提到所需菌落

              D.在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环灭菌

            • 8. (10分).在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数。

              (1) 下图是利用              法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步       分散到培养基的表面。

              (2) 分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述        成分,并加入       物质,以补充       源。若用于培养纤维素分解菌,应加入            物质,为检测纤维素分解菌的存在与否,还应加入          染料,将呈            反应。

              (3) 三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量。在对应稀释倍数为106的培养基中,得到以下统计结果:

              甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,取平均值248;

              乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233;

              丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;

               在三位同学的统计中,只有一位同学的统计是正确的,指出另两位同学的统计为什么不正确?

                                                                                                                                                      

            • 9. (8分)酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答: 

              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是__________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_________________。

              (2)在对该菌种进行培养时,与常规培养基相比还需要额外在培养基中添加______________;在泡菜的腌制过程中,要注意控制腌制的时间、温度和_____________,否则容易造成细菌大量繁殖。

              (3)为了保持所获得菌种纯净,需要进行菌种的保藏。若采用临时保藏,则应将菌种接种到试管的__________________上,放入4℃冰箱中可保藏3~6个月;若要长期保存,可将菌液与灭菌的_____________混匀,放在-20℃的冷冻箱中保存。

              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持_____________,理由是___________________________________________________。

            • 10. 22、研究发现柚皮精油和乳酸菌素(小分子蛋白质)均有抑菌作用,两者的提取及应用如图所示。


               

              (1)柚皮易焦糊,宜采用_________法提取柚皮精油,该过程得到的糊状液体可通过___________除去其中的固体杂质。

              (2)筛选乳酸菌A时可选用平板划线法或____________法进行接种。对新配制的培养基灭菌时所用的方法是_______________。实验前需对超净工作台用____________进行消毒处理。

              (3)培养基中的尿素可为乳酸菌A生长提供____________。在对该菌种进行培养时,与常规培养基相比,还需要额外在培养基中添加          

              (4)抑菌实验时,在长满致病菌的平板上,会出现以抑菌物质为中心的透明圈。可通过测定透明圈的______________来比较柚皮精油和乳酸菌素的抑菌效果。

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