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【生物——选修3：现代生物科技专题】乳铁蛋白是乳汁中一种重要的铁结合糖蛋白，乳铁蛋白不仅参与铁的转运，而且具有抗氧化、调节免疫系统等强大生物功能，被认为是一种极具开发潜力的食品添加剂。下图是培育表达人乳铁蛋白的
乳腺
生物
反应器的技术。图中tet
R表示四环素抗性基因，amp
R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答：
（1）获取人乳铁蛋白基因：可构建 文库。构建该文库的第一步是从 细胞中提取 。
（2）图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用限制酶BamH I 和 同时酶切载体和人乳铁蛋白基因,用两种酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因的优点是 。
（3）重组质粒筛选方法是用经限制酶切割和DNA连接酶作用过的质粒转化大肠杆菌，先用含 的培养基进行培养，若能生长，再影印到含 的培养基上培养，若不能生长，说明该菌落的大肠杆菌导入的质粒是重组质粒。
（4）培育转基因牛时可用 法将重组质粒导入牛的受精卵中。在体外培育成早期胚胎后，再移植至代孕母牛的子宫中，在移植前某一段时间需给代孕母牛注射 激素。
（5）为检测人乳铁蛋白在牛乳腺中是否表达成功，采用的方法是 。
