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【生物——选修3:现代生物科技专题】乳铁蛋白是乳汁中一种重要的铁结合糖蛋白,乳铁蛋白不仅参与铁的转运,而且具有抗氧化、调节免疫系统等强大生物功能,被认为是一种极具开发潜力的食品添加剂。下图是培育表达人乳铁蛋白的
乳腺
生物
反应器的技术。图中tet
R表示四环素抗性基因,amp
R表示氨苄青霉素抗性基因,BamHⅠ、Hind Ⅲ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。
据图回答:
(1)获取人乳铁蛋白基因:可构建 文库。构建该文库的第一步是从 细胞中提取 。
(2)图中将人乳铁蛋白基因插入载体,需用限制酶BamH I 和 同时酶切载体和人乳铁蛋白基因,用两种酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因的优点是 。
(3)重组质粒筛选方法是用经限制酶切割和DNA连接酶作用过的质粒转化大肠杆菌,先用含 的培养基进行培养,若能生长,再影印到含 的培养基上培养,若不能生长,说明该菌落的大肠杆菌导入的质粒是重组质粒。
(4)培育转基因牛时可用 法将重组质粒导入牛的受精卵中。在体外培育成早期胚胎后,再移植至代孕母牛的子宫中,在移植前某一段时间需给代孕母牛注射 激素。
(5)为检测人乳铁蛋白在牛乳腺中是否表达成功,采用的方法是 。