绞股蓝细胞中含有抗烟草花叶病毒(TMV)基因,可以合成一种抗TMV 蛋白,叶片对 TMV具有抗感染性.烟草是重要的经济作物,由于 TMV 的感染会导致大幅度减产.研究人员利用转基因技术培育出了抗TMV的烟草,主要流程如图所示.
(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA,然后合成目的基因.图中过程①表示 ______ ,获得的DNA必须在两侧添加 ______ 和 ______ .
(2)过程③构建的重组Ti 质粒时,必须使用 ______ 和 ______ 两种工具酶.
(3)由图分析,在过程③构建的重组Ti 质粒上应该含有卡那霉素抗性基因作为 ______ ,重组Ti质粒导入烟草体细胞的方法是 ______ .
(4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外,还必须添加 ______ ,以保证受体细胞能培养成再生植株.
(5)过程⑥可采取 ______ 的方法,检测植株是否合成了抗TMV蛋白.在个体水平的鉴定过程中,可通过的 ______ 方法来确定植株是否具有抗性.