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          50条信息

            • 1.

              利用雌雄同株的野生型青蒿(二倍体),可培育抗病高产青蒿素的植株。下列叙述中不正确的是( )

              A.利用人工诱变的方法处理野生型青蒿,筛选可能获得抗病高产青蒿素的植株
              B.选择抗病低产青蒿与易感病高产青蒿杂交,再连续自交,筛选抗病高产青蒿素的植株
              C.提取抗病基因导入易感病高产青蒿体细胞中,用植物组织培养获得抗病高产青蒿素的植株
              D..抗病低产青蒿与易感病高产青蒿杂交得F1,利用花药离体培养获得能稳定遗传的抗病高产青蒿素植株
            • 2.

              pET表达系统是原核蛋白表达引用最多的系统,其自身基础表达水平很低,并能实现目的基因的高效表达。pET载体上的目的基因被转移到大肠杆菌后,大肠杆菌RNA聚合酶不能直接与T7启动子结合,需通过T7RNA聚合酶间接调控。另外IPTG(乳糖类似物)可实现图1功能外,还可以使lac抑制子失活,激活lac启动子。请结合图示分析回答下列问题:

              图1   图2图3

              (1) 大肠杆菌时刻感知培养基的营养信息并传递到细胞内启动相应的应答机制,据图1分析,不含乳糖的条件下结构基因Z将____。 

              (2) Z基因广泛用于基因表达调控的研究,当目的基因插入Z基因,用蓝白斑来筛选工程菌非常方便。X-gal(某种指示剂,无色)是β-半乳糖苷酶的底物,水解后呈蓝色,据此原理,应从图2的____菌落中挑选工程菌。 

              (3) pET表达载体在构建时用限制酶EcoRⅠ和SmaⅠ同时切割,与单用限制酶EcoRⅠ相比,采用EcoRⅠ和SmaⅠ双酶切的优点能减少质粒自身环化的概率,并__________。 

              (4) 根据图3信息,大肠杆菌RNA聚合酶不能直接与T7启动子结合,说明酶具有____。从图中可看出,____基因能够抑制自身基因的基础表达水平,而____可将更多的细胞资源用于目的基因表达,因此可以____以控制靶基因的过度表达。 

            • 3.

              下列与真核细胞内DNA分子复制有关的叙述,正确的是( )

              A.复制过程是先全部解旋,再半保留复制
              B.复制过程主要发生在有丝分裂前期
              C.DNA连接酶催化两个游离的脱氧核苷酸之间的连接
              D.复制后两个子代DNA分子的碱基序列可能不同
            • 4.

              在基因工程操作中,基因的“剪刀”指的是( )

              A.RNA聚合酶
              B.DNA连接酶
              C.解旋酶
              D.限制酶
            • 5.

              为探究植物免疫的作用机制,科研人员以拟南芥为材料进行研究。

              (1)病原菌入侵植物时,植物细胞膜表面的____________可以识别病原菌,病原菌可向植物体内注入一些效应因子来抑制植物的免疫。植物通过让感病部位出现类似于动物细胞凋亡的现象,阻止病原菌的进一步扩散。植物和病原菌在相互影响中不断进化和发展,称为__________________。

              (2)植物对抗病原体的免疫包括两方面,一方面是细胞表面的物理屏障,如质膜和细胞壁间形成胝质沉淀,有效防御病原体的入侵;另一方面是植物细胞分泌的起防御作用的化学物质,如H2O2。科研人员用白粉菌侵染拟南芥突变体,得到下图1和图2所示结果。

              据图可知,E基因敲除导致______________________________,据此推测E基因的功能是______________________________。

              (3)研究表明,水杨酸和茉莉酸信号作用通路在植物免疫中具有重要作用。已知P基因控制水杨酸的合成,C基因是茉莉酸信号通路上的关键基因。科研人员利用P基因敲除突变体和C基因敲除突变体进一步研究,实验结果如图3。

              ①据实验结果推测,P基因对植株免疫有____________(填“促进”或“抑制”)作用。

              ②依据实验结果判断,E基因的作用与水杨酸信号通路有关,并且E基因是P基因________(填“上游”或“下游”)的调控基因。判断依据是_____________________________________________________________________________________________________________________________________。

              ③一种验证上述推测的方法是:检测并比较_____________________________________________________________含量。

            • 6. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题:

                



              (1)过程①所需的酶是 __________________________。
              (2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 ________存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
              (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是 ________________。原生质体经过________再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
              (4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和 ________________植株的根尖,通过解离、漂洗、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
              (5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组 DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断,再生植株1~4中一定是杂种植株的有________。


              (6)对杂种植株进行 ________接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。

            • 7. (一)发酵工程是通过大量培养微生物以生产某种产品.请回答下列问题:

              (1)欲从多种微生物中分离某种细菌并抑制其他微生物的生长.应使用________培养基.纯化菌种时可采用比较简单的________法进行接种,接种操作应在________进行.

              (2)纯化的菌种常采用固体斜面培养基临时保藏,该方法保存的时间较________,而且菌种易________.常用的凝固剂是________.

              (3)从培养基所含的成分来看,从土壤中分离出固氮菌的培养基特点是________,从土壤中分离出纤维素分解菌的培养基特点是________.

              (二)人组织纤溶酶原擞活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得.流程如下:

              (1)卵母细胞可以从活体________中采集,还可从已处死的雌羊卵巢中获取.对供体母羊用________处理,可以获取更多的卵(母)细胞.采集的精子需要经过________处理,才具备受精能力.

              (2)欲用有限的早期胚胎获得多个转基用个体,可以利用________技术.由于代孕母羊对移入其子宫的外来胚胎________,才使早期胚胎能在代孕母羊体内存活.

              (3)质粒上应有________,才能使htPA基因插入其中.在转htPA基因母羊的肌肉细胞中________(能、不能)检测到目的基因.若在其羊乳中检测到________,说明目的基因成功表达.

            • 8.

              苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图,据图回答下列问题。

              (1)将图(一)①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反应管中有________种DNA片段。过程②需要用到________酶。

              (2)假设图(一)中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列,现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒,则该图(一)中①的DNA右侧还能选择BamⅠ进行切割,并能获得所需重组质粒吗?________,请说明理由_____________________________________________________________________________。

              (3)若上述假设成立,并成功形成重组质粒,则重组质粒_____________________________。

              A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

              B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

              C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

              D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

              (4)图中③的Ti质粒能调控合成一种蛋白,可以协助带有目的基因的T—DNA导入植物细胞,并防止植物细胞中________对T—DNA的降解。

              (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体,使细胞膜穿孔,肠细胞裂解,昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小,原因是人类肠上皮细胞______________________________________________________________。

              (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种,其目的是降低害虫种群中的________________________________基因频率的增长速率。

            • 9.

              草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,影响植物正常生长,最终导致植物死亡。目前,发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,获得的转基因植物能耐受高浓度的草甘膦。取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过转基因处理,但是否成功未知。图l为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。据图回答︰


              (1)若A、B、C浇清水,D、E、F浇含有草甘膦的水,则A~F植物中,一定能正常生长的是________。

              (2)一个完整的基因表达载体除复制原点、启动子和终止子外,还应包括________。若利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是________和________。

              (3)通常用_________法将EPSPS基因导入植物体内。假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F没有表现出抗性,分析可能的原因________。

              (4)图甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000对碱基)与大肠杆菌pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图。图中Ap是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)。


              ①图乙培养基中含有氨苄青霉素,则培养基中出现的________(白色/蓝色)菌落中会含有重组质粒。

              ②现用EcoRI酶切重组成功的质粒(重组质粒上目的基因的插入位点与ECORI的识别位点之间的碱基对忽略不计),酶切后进行电泳观察,会出现K度为________kb的片段。

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