某一单基因遗传病家庭，女儿患病，其父母和弟弟的表现型均正常。

（1）根据家族病史，该病的遗传方式是_________________________；母亲的基因型是________（用A、a表示）；若弟弟与人群中表现型正常的女性结婚，其子女患该病的概率为______（假设人群中致病基因频率为1/10，结果用分数表示）。

（2）检测发现，正常人体中的一种多肽链（由146个氨基酸组成）在患者体内为仅含45个氨基酸的异常多肽链。异常多肽链产生的根本原因是_________________，由此导致正常mRNA第________位密码子变为终止密码子。

（3）分子杂交技术可用于基因诊断，其基本过程是用标记的DNA单链探针与____________进行杂交。若改致病基因转录的mRNA分子为“…ACUUAG…”，则基因探针序列为__________________；为制备大量探针，可利用___________技术。

玉米自交系（遗传稳定的育种材料）B具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株，为使其获得抗除草剂性状，需依次进行步骤I、II试验。

Ⅰ．获得抗除草剂转基因玉米自交系A，技术路线如下图。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是______（单选）。

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A．①③ B．①④ C．②③ D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是_______________，自交系_______________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含_____________________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_______________（多选）。

A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织

B．无农杆菌附着的转化愈伤组织

C．农杆菌附着的未转化愈伤组织

D．农杆菌附着的转化愈伤组织

（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占_____________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系A。

II．通过回交使自交系B获得抗除草剂性状

（6）抗除草剂自交系A（GG）与自交系B杂交产生F₁，然后进行多轮回交（下图）。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代______________。

（7）假设子代生活力一致，请计算上图育种过程F₁、H₁、H₂、H₃各代中含G基因植株的比例，并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选，直接回交，请在图2中画出相应的折线图。________

（8）下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中，4种方法检出的含G基因植株的比例，从小到大依次是________。

对H_n继续筛选，最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系。

现代生物工程技术推动了医药学、免疫学和生态学的发展，依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题：

（1）科学家将生长激素基因与_______________的启动子等调控组件重组在一起，通过显微注射等方法，导入哺乳动物的_______________中，获得转基因动物，再利用_________________技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器，来生产生长激素，用于治疗矮小症。

（2）单克隆抗体的制备中，将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合，再用特定的____培养基进行筛选，获得杂交瘤细胞后，还需进行__________培养和抗体检测，经过多次筛选，就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是_____________________________________________________。

（3）为建设美丽乡村，积极推进生态农业建设，依据生态工程_______________的原理，合理设计食物链，使生态系统中的物质和能量得到分层次多级利用，使废弃物资源化，提高了能量的_____________，减少了环境污染。

应用生物工程技术可以获得人们需要的生物新品种或新产品。据图回答下列问题。

(1)在培育转人生长激素基因牛的过程中,①过程需要的酶是 ,

②过程常用的方法是     。 

(2)可通过转人生长激素基因牛分泌的乳汁来生产人生长激素,在基因表达载体中,人生长激素基因的首端必须含有                 。

(3)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体时,Ⅱ最可能是   细胞,Ⅲ代表的细胞具有                 的特点。 

(4)在抗虫棉培育过程中,④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞,则与采用叶肉细胞相比较,其优点是          ,⑤过程采用的技术是      。 

(5)要确定目的基因(抗虫基因)导入受体细胞后是否能稳定遗传并表达,需进行检测和鉴定工作,请写出在个体水平上的鉴定过程:                                            。 

人的内皮抑素（一种蛋白质）能诱导血管内皮细胞凋亡，进而抑制新血管的产生。临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞，使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素，抑制新生血管的形成，使肿瘤细胞进入休眠状态并诱导其凋亡。

回答下列问题：

（1）从肝细胞中提取总mRNA，利用逆转录酶合成          ，根据内皮抑素基因的          设计并合成引物，利用PCR技术得到大量内皮抑素基因。

（2）在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导入受体细胞的过程中，以      作为工具酶，以        作为载体。

（3）血管内皮细胞被重组腺病毒感染后，若通过              方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡，则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性。

（4）临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞，使肿瘤生长受到抑制，这种治疗方法属于          （填“体内”或“体外”）基因治疗。

干扰素是治疗癌症的药物，它必须从血中提取，每升人血只能提取O．05μg，所以价格昂贵。现在美国加利福尼亚的基因公司用下图的方式生产干扰素。试分析原理和优点：

 (1)从人的淋巴细胞中取出            ，使它同细菌质粒相结合，然后移植到酵母菌体内，让酵母菌                  。

 (2)酵母菌能用         方式繁殖，速度很快，能大量生产           ，不但提高了产量也降低了成本。

 (3)中国青年科学家陈大炬成功地把人的干扰素基因移植到烟草的DNA分子上，使烟草获得了抗病毒的能力，试分析：

①人的基因之所以能接到植物体内，其物质基础是                            。②烟草有了抗病能力，这表明烟草体内产生了                      。这个事实说明，人和植物共用一套                       ，蛋白质合成方式               

A．胸腺嘧啶、非编码区、内含子、外显子  C．尿嘧啶、非编码区、外显子、密码子

B．胸腺嘧啶、非编码序列、外显子、内含子D．尿嘧啶、非编码序列、内含子、外显子

自交不亲和性是指某一植物的雌雄两性机能正常，但不能进行自花传粉或同一品系内异花传粉的现象。如某品种烟草为二倍体雌雄同株植物，却无法自交产生后代。

（1）烟草的自交不亲和性是由位于一对同源染色体上的复等位基因(S₁、S₂……S₁₅)控制，以上复等位基因的出现是            的结果，同时也体现了该变异具有            特点。

（2）烟草的花粉只有通过花粉管伸长（花粉管由花粉萌发产生）输送到卵细胞所在处，才能完成受精。下表为不亲和基因的作用规律：

①将基因型为S₁S₄的花粉授于基因型为S₂S₄的烟草，则子代的基因型为              ；若将上述亲本进行反交，子代的基因型为               。自然条件下，烟草不存在S系列基因的纯合个体，结合示意图说出理由：                                。

②在杂交育种时，用两种自交不亲和的植株做亲本，可以省略杂交过程的          操作。

（3）科学家将某抗病基因M成功导入基因型为S₂S₄的烟草体细胞，经植物组织培养后获得成熟的抗病植株。如图，已知M基因成功导入到S₂所在II号染色体上，但不清楚具体位置。现以该植株为        （父本或母本），与基因型为S₁S₂的个体杂交，根据子代中的抗病个体的比例确定M基因的具体位置。

I．若后代中抗病个体占        ，则说明M基因插入到S₂基因中使该基因失活。

II．若后代中抗病个体占       ，则说明M基因插入到S₂基因之外的其它部位。

用遗传图解分析I情况（转基因亲本基因型S₄M，亲本表现型不做要求）。