人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

（1）htPA基因与载体构建重组表达载体需要用到的工具酶有__________。基因表达载体中除了要有目的基因以外，还要有启动子，它是_________识别和结合点部位；除上述外还需有_____________________。检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用____________技术。

（2）为获取更多的卵(母)细胞，要对供体母羊注射促性腺激素使其超数排卵，采集的卵子必须发育到________(时期)；采集的精子需要经过________处理，才具备受精能力。

（3）将重组表达载体导入受精卵常用的方法是__________。生产上常用________期的胚胎进行移植；为了获得母羊，移植前需对已成功转入目的基因的胚胎进行___________。利用______________技术可获得多个转基因个体，这体现了早期胚胎细胞的全能性。

（4）若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到__________，说明目的基因成功表达。

(1)过程①中加入无水乙醇的作用是                 。纸层析法分离两种果皮中的色素后，两个滤纸条上共有的色素带的颜色最可能是                 。

(2)过程②获得的果肉提取液用斐林试剂检测，与未成熟香蕉相比，成熟香蕉果肉提取液中砖红色沉淀更多，说明其中还原糖含量较高，分析其原因                 。

(3)过程③需加入食盐和      ，再进行充分地搅拌和研磨。若要进一步探究一定量的果肉与食盐用量的最佳比例，主要实验思路                             。

(4)生产实践中，过程④通常将未成熟香蕉在一定浓度的          溶液中浸泡1 min后取出催熟。研究表明，香蕉成熟过程中必须经过一个呼吸速率急剧上升，达到高峰后又急剧下降的阶段。因此，为保证香蕉的品质，催熟时应注意                。

某校课外兴趣小组同学以未成熟香蕉（绿色）和成熟香蕉（黄色）为实验材料，进行了相关探究实验（如下图）。请回答下列问题：

（1）过程①中加入无水乙醇的作用是________。纸层析法分离两种果皮中的色素后，两个滤纸条上共有的色素带的颜色最可能是_______________。

（2）通过过程②获得的果肉提取液用斐林试剂检测，与未成熟香蕉相比，成熟香蕉果肉提取液中砖红色沉淀更多，说明其中还原糖含量较高，分析其原因__________。斐林试剂的颜色为____________。

（3）过程③需加入食盐和________，再进行充分地搅拌和研磨。若要进一步探究一定量的果肉与食盐用量的最佳比例，主要实验思路是________。

（4）研究表明，香蕉成熟过程中必须经过一个呼吸速率急剧上升，达到高峰后又急剧下降的阶段。因此，为保证香蕉的品质，催熟时应注意_______。

29. （9分）临床上常常利用血液中DNA进行身份鉴定、基因诊断等，但血液中DNA含量少、不易提取。为了从血液中获取更多的DNA，科研人员以大鼠血液为材料，尝试比较两种提取DNA的方法，主要操作如下：

实验结果（表中OD260反映溶液中核酸的浓度，OD280反映溶液中蛋白质或氨基酸的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8）：

试回答下列问题：

（1）补全相关实验步骤：①        ，②       。

（2）实验中 利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是                            。

（3）与用鸡血作实验材料相比，从哺乳动物的血液中提取的DNA总是很少，这是因为        。

（4）两种方法中OD₂₆₀/OD₂₈₀均低于1.8，主要原因是       ；其中方法A的OD₂₆₀/OD₂₈₀更接近1.8，原因是                。

（5）根据实验结果，从人血液中提取DNA时应优先选择方法        （“A”、“B”）。

步骤二：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL体积分数95%的冷酒精溶液，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。

步骤三：取6支试管，分别加入等量的      （填浓度）NaCl溶液溶解上述絮状物。

步骤四：在上述试管中各加入4mL       试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如下表：

 分析上述实验过程，回答下列问题：

（1）该探究性实验课题名称是    ▲    。

（2）步骤一中研磨液中洗涤剂的作用是    ▲    。该步骤研磨时，要轻缓、柔和，不能快速进行，其原因是    ▲    。

（3）步骤二中“缓缓地”搅拌，这是为了    ▲    ，所加酒精溶液需冷却的原因之一是低温抑制的    ▲    活性，可以防止DNA降解。

（4）上述实验中步骤三、步骤四的空白处依次为    ▲    、    ▲    。

（5）实验表明：    ▲    获取的DNA量最多。

应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题。

(1)要使人的生长激素基因在牛的垂体细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、_________、__________________、标记基因等部分.在③之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入人生长激素基因,宜采用_________________技术.③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用______           _____技术,培育出多头相同的转基因牛犊。

(2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅰ最可能是___________细胞,Ⅱ代表的细胞具有____              ________的特点.

(3)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，则与采用叶肉细胞相比较，其优点是_______________________________，⑤过程采用的技术是___________________________。科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，将出现不抗虫的植株，此现象来源于_______________。

某校课外兴趣小组同学以未成熟香蕉（绿色）和成熟香蕉（黄色）为实验材料，进行了相关探究实验（如下图）。请回答下列问题：

（1）过程①中加入无水乙醇的作用是            。纸层析法分离两种果皮中的色素后，两个滤纸条上共有的色素带的颜色最可能是               。

（2）通过过程②获得的果肉提取液用斐林试剂检测，与未成熟香蕉相比，成熟香蕉果肉提取液中砖红色沉淀更多，说明其中还原糖含量较高，分析其原因                。

（3）过程③需加入食盐和              ，再进行充分地搅拌和研磨。若要进一步探究一定量的果肉与食盐用量的最佳比例，主要实验思路是           。

（4）生产实践中，过程④通常将未成熟香蕉在一定浓度的                 溶液中浸泡1min后取出催熟。研究表明，香蕉成熟过程中必须经过一个呼吸速率急剧上升，达到高峰后又急剧下降的阶段。因此，为保证香蕉的品质，催熟时应注意            。

下图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作和利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图，图2是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤。请回答下列问题：

                       图1                                                             图2 

（1）图1中，X溶液为       ，其作用是使        。发酵过程中用搅拌器搅拌的目的是为了使      。

（2）在配制海藻酸钠溶液的过程中,加热溶解海藻酸钠时需注意用        加热,然后将溶化好的海藻酸钠溶液        后,再加入酵母菌充分搅拌混合均匀.此固定酵母细胞的方法是  法,制备固定化酶则不宜用此方法,原因是酶分子很小,容易从包埋材料中漏出 。与直接使用酶相比,固定化酶的优点是    。

（3）图2中，a表示释放核物质后进行过滤的过程，过滤后取        （填“滤液”或“析出物”）进行下一步实验；b表示的相关操作过程中，加入2mol/LNaCl溶液的作用是        ；c表示在滤液中加入冷却的95%的酒精，其目的是           。

下图表示生物实验中通过研磨提取有关物质的操作过程，请回答下列问题。

（1）若图示为“DNA的粗提取与鉴定”的实验操作：

①图中实验材料A可以是下面的            。（填字母）

a．花菜       b．香蕉    c．猪肝    d．猪血

②若选用植物组织，研磨前加入的B一般为洗涤剂和           ，加入洗涤剂的作用是           。

③实验中，将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入2mL下表所示的3种溶液中，经搅拌后过滤，获得相应的3种滤液，含DNA最少的是滤液       。

（2）若图示为“检测生物组织中的还原糖”的实验操作：在检测滤液C中是否含有还原糖时，向C中加入的是            色的斐林试剂，欲得到实验结果，还需要进行的步骤是           。

（3）若图示为“叶绿体色素的提取和分离”的实验操作：

①研磨前加入的B应包括无水乙醇、                   ，将研磨液进行过滤时，需要在漏斗基部放上              。

②分离色素时用培养皿盖住小烧杯的目的是                      。

（1）体内DNA复制过程中用解旋酶打开双链DNA，而PCR技术中应用__________。

（2）Taq DNA聚合酶是从水生耐热细菌Taq中分离的。

①Taq DNA聚合酶的功能是催化脱氧核苷酸之间形成____________________。

②Taq DNA聚合酶的化学本质为蛋白质，可用________法和__________法进行分离。

（3）相对于细菌分离，DNA分子的分离和提取操作要复杂的多。

①在DNA提取中两次用到蒸馏水，其目的分别是____________、_____________。

②实验中能否以哺乳动物成熟的红细胞为实验材料？为什么？__________________。

（4）与体内DNA复制相比较，PCR反应要在________________中才能进行，并且要严格控制________条件。

（5）PCR中加入的引物有____________种，加入引物的作用是作为______________________的起点。