回答下列（一）、（二）小题。

(一）某研究小组欲用苹果汁为原料，利用发酵瓶制作果酒和果醋，请分析回答：

(1)将苹果汁放入发酵瓶，要预留约________的空间。为得到酒精和糖含量较高的果酒，可在果汁中加入一定比例的______。若发酵瓶内持续无气泡产生，则需加入更多的_______，使发酵作用尽快发生。

(2)变酸的果酒表面有一层醋杆菌形成的菌膜，若要在该菌膜中筛选高表达量的醋杆菌菌株，可通过获得_______的方法来分离筛选。若要统计获得菌种的数目，则常采用_________法。对获得的优质醋杆菌菌种常用划线法接种在固体培养基______上低温保存。

(3)下图是果酒和果醋的发酵装置，关于果醋发酵叙述错误的是_______

A.发酵前，瓶内酒—冰混合物的pH需调至7.0

B.发酵过程中，充气口要适时适量充气

C.发酵过程中，排气口排出醋酸发酵产生的CO₂

D.发酵完成后，出料口的pH值不再减少

 (二）请回答杂交瘤技术和单克隆抗体制备的有关问题。

(1)杂交瘤技术制备单克隆抗体时，利用一定的物质，如生物诱  导剂_____作介导，使经免疫的小鼠脾细胞与________细胞融合，筛选出融合的细胞再进行细胞的______培养，获得纯系细胞，同时还要进行________检验，以保证获得的是所需的特定杂交瘤细胞。

(2)有关杂交瘤细胞体外培养的叙述，正确的是________

A.用固体培养基培养          B.用滋养层细胞支持生长

C.能进行传代培养            D.需要对细胞进行研磨破碎获得产物

(3)现在欲利用基因工程技术生产单克隆抗体，科研小组将与抗体形成有关的关键基因通过噬菌体导人到受体细胞，该技术的核心步骤是______________,噬菌体是这些关键基因的___________。

酸菜，古称菹，《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答：

（1）酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期，很多杂菌会大量繁殖，其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物是_______

______________。 

（2）实验室可采用___________________________法进行菌种纯化，所用培养基一般用___________法进行灭菌。 

（3）为了保持所获得菌种纯净，需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏，也可以利用____________的方法长期保存。

（4）市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持___________，理由是____________________。 

某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

(1)为了缩短泡菜制作时间，可在冷却的盐水中加入少量陈泡菜液，目的是___________________。

(2)泡菜液中的乳酸的产生场所是乳酸菌的___________。在制作泡菜初期，泡菜坛水槽总是有气泡冒出的主要原因是_______________。随着泡制时间的延长，泡菜坛中亚硝酸盐的含量变化趋势为__________

(3)为分离纯化出优质的乳酸菌，应挑选_________________的菌落作为候选菌。

(4)乳酸菌发酵产酸奶，发酵到后期时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是：___________________。

在白酒发酵的窖池中，培养液的pH≤4.5后，酵母菌的代谢活动逐渐受到抑制，甚至停止发酵。耐酸性酵母菌能在pH≤3.5的环境下继续表现出较强发酵能力，适宜作白酒发酵生产用菌种。为选育适合白酒生产的耐酸性强的酵母菌，研究者进行实验。

（1）酵母菌的呼吸作用类型是________。在发酵过程中，窖池中培养液的pH会逐渐下降，原因是___________________________。

（2）取适量窖底泥、酒糟和黄浆水，分别溶于10 mL________中，再各取1 mL上清液接入10 mL麦芽汁培养基中培养，2天后分别接种到不同酸碱度的麦芽汁培养基上，培养结果见下表。

注：“+”越多表示菌体长得越好，“—”表示几乎不生长。

（3）在pH≤3.5的环境下，仍可检测到少量耐酸性酵母菌生长，这些菌株是________形成的。

（4）从pH为________的培养基中获得菌种，可通过________法接种到培养基上，进行纯化培养。

（5）实验获得了三个耐酸性强的酵母菌菌株，特点如下表。

依据菌株特点，研究者认为C菌株更适合作为白酒发酵菌株，作出这一判断的理由是_____________________________。

请回答下列有关微生物及其技术的问题。

 (1)进行酒精发酵的酵母菌与醋酸发酵的醋酸菌在结构上最大的区别是__________________，在代谢方式上的区别是__________________________。

下表是微生物培养基成分。请据图回答:

(1)上述培养基可培养的微生物类型是             。

(2)此培养液能否用于植物的无土栽培？          ，理由是                   。若用于无土栽培，还应注意培养液中          的含量。

(3)若除去成分①，加入蔗糖，该培养基可用于培养                   。

(4)表中营养成分共有        类。

(5)不论何种培养基，在各种成分都溶化后分装前，要进行的是                 。

人和哺乳动物的尿中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有脲酶，可通过降解尿素作为其生长的氮源。现对土壤中的这类细菌进行分离实验，请回答下列问题：

(1)分离培养细菌时必须进行无菌操作，包括培养基和各种器皿都必须是无菌的，常用的灭菌方法有：高压蒸汽灭菌、灼烧灭菌和________________。

(2)将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在______________进行操作。接种后的培养皿____________于37℃的________________中培养。

(3)用含有酚红指示剂的培养基筛选能分泌脲酶的细菌，从功能上划分该培养基属于____________培养基。若培养基中存在有分解尿素的细菌，其菌落周围会出现红色环带，这是由于尿素被分解产生的____________使pH升高，酚红指示剂产生的颜色变化，从而证明这一菌株可以尿素为氮源。变色区域越大，表明该菌株利用尿素的能力______________。

(4)与全营养培养基中的菌落相比，以尿素为氮源的培养基中菌落数( )

A．多     B．少    C．相等      D．几乎为零

小球藻是一种单细胞绿藻，能进行高效的光合作用，可以有效除去污水中的N、P等。其繁殖能力(生长量)在一定程度上可以反映藻细胞消耗N、P等的能力。科研人员对此进行了相关研究，结果如下图。请回答下列问题：

（1）图1说明固定化小球藻生长周期比游离小球藻________，使用固定化小球藻处理污水的好处是________。

（2）固定化小球藻的常用方法是________。根据图2判断，固定化小球藻最适的海藻酸钠溶液浓度为________，固定形成的凝胶珠颜色是________。若海藻酸钠浓度过高，细胞生长量反而降低，原因是形成的凝胶珠网格过于致密，导致________。

（3）据图3可知，制备的凝胶球直径为________较适宜，凝胶珠直径过大，不利于小球藻获得充足的________。

土壤酶是由土壤微生物产生的，具有催化作用的一类蛋白质，如脲酶、蔗糖酶等。土壤酶易受到环境中外源物质（如除草剂、重金属、肥料等）的影响。科学家研究了氟磺胺草醚和甲咪唑烟酸两种除草剂对土壤中脲酶和蔗糖酶活性的影响。

（1）研究者从近年________（填“喷洒”或“未喷洒”）过除草剂的环境中选取表层土壤作为实验样品。

（2）各实验组称取200g的土壤置于棕色广口瓶中，分别添加等量的不同质量浓度的除草剂溶液，同时设置空白对照组。广口瓶用________（填“脱脂棉”或“保鲜膜”）封口，置于________中培养。分别在培养不同天数后取样，测定土壤中脲酶和蔗糖酶的活性。结果如下表所示。

（3）本实验的自变量是处理时间和________。实验结果显示，两组除草剂中的________的各实验组对土壤脲酶活性的影响随时间变化，均呈现“抑制-激活-抑制”的趋势。对土壤蔗糖酶活性激活率最高的处理条件是________。

（4）欲从上述土壤中筛选出蔗糖分解菌或尿素分解菌，则应将土壤浸出液采用________法接种到经________灭菌法处理的相应的固体平板培养基上。

某科研兴趣小组欲对土壤中分解尿素的细菌进行分离纯化和计数，请帮助完成实验。

（1）实验原理：分解尿素的细菌由于含有       ，可将           而使周围环境的pH上升，在以       为唯一氮源的培养基中加入       指示剂，对其进行分离、鉴别；通过平板上的菌落数可以推测样品中的活菌数。

（2）实验简要步骤：

①土壤取样并制备培养基：用                 法对培养基进行灭菌。

②分离纯化该细菌：用稀释涂布平板法进行接种，首先需对土壤滤液进行           ，再分别取土壤滤液0.1mL涂布在每一平板上。

③培养、观察与计数。   

（3）有同学发现，稀释倍数为10⁴ 的5个平板上，长出的菌落数分别为9、147、150、153和360，则每升土壤样液中的细菌数量为       个。

（4）某些同学想将分离出的目的菌在－20℃长期保存，菌液中常需要加入一定量的________（填化学物质，1分）。