食品用果胶酶由黑曲霉境发酵精制而得，外观呈浅黄色粉末状。果胶酶主要用于果蔬汁饮料和果酒的榨汁及澄清，对分解果胶具有良好的作用。其最佳贮藏条件为：4℃至15℃，一般为温室贮藏，避免阳光直射。请完成以下问题：

⑴果胶酶的基本单位是___________________,它可以将果胶分解为___________________，从而使浑浊的果汁变得澄清。

⑵在低温下贮藏果胶酶的原因是：低温不会破坏______________________________。

⑶如果果胶酶的酶促反应最适温度为45℃，最适pH为4.8，需进一步探究果胶酶的最适用量。此时，实验的自变量是___________________。合理的设置果胶酶用量的梯度后，可通过苹果泥出汁的多少来判断酶用量是否合适。根据所给材料和用具设计一下探究实验。

①材料用具：制备好的苹果泥、恒温水浴装置、试管、漏斗、滤纸、量筒、试管夹、质量浓度为2%的果胶酶溶液、体积分数为0.1%的NaOH和HCl溶液。

②实验步骤：a、取6支试管，编号1~6，分别加入5ml的苹果泥，调节pH至4.8，放入45℃恒温水浴装置中保温一段时间。  b、向1~6号试管中分别加入相同体积质量浓度为2%的果胶酶溶液，然后放在45℃恒温水浴装置中保温足够长的时间。  c、1~6号试管同时取出，过滤苹果泥（时间相同）并记录果汁体积。

③结果与讨论：（略）

上述实验步骤中有两处明显错误，请指出来：_______________________；_________________________。

 ④预测实验结果，请在坐标上画出表示果胶酶最适用量（不超过0.8ml）的曲线图。

    某同学进行苹果汁制作实验，工艺如图所示。

(1)图中用KMnO₄的溶液浸泡苹果的目的是__________________。黑曲霉提取液中含有的__________________可水解果胶，从而使果汁澄清。固定化柱中填充的石英砂通过______________方式将酶固定化。

(2)实验中，操作流程A和B的先后顺序为___________。在苹果汁澄清过程中，应关闭的流速调节阀是_________。

(3)试验后，将洗涤过的固定化柱在低温环境中保存若干天，该固定化柱仍可用于苹果汁制作实验，说明固定化酶可被____________使用。

分离筛选降解纤维素能力强的微生物，对于解决秸秆等废弃物资源的再利用和环境污染问题具有重要意义。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐、硫酸盐、KCl、酵母膏以及水解酪素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。请回答下列问题：

(1)培养基中加入的化合物A是________。本实验将样品稀释涂布到鉴别培养基之前要进行选择培养，目的是______________________。

(2)为了筛选出能产生纤维素酶的微生物，向培养基中加入________溶液，等培养基上长出菌落后，能产生纤维素酶的菌落周围会出现________。

(3)为在培养基表面形成单个菌落，若以接种环为工具，则用________法进行接种。若用稀释涂布平板法进行接种，在涂布平板时，滴加到培养基表面的菌悬液量不宜过多的原因是________________________________________________________________________。

(4)用三种菌株对秸秆进行处理，并在第5天和第10天对秸秆和秸秆中含有的纤维素、半纤维素以及木质素等组分的降解情况进行了测定(结果如图)。

据图分析可知，三种菌株对________的降解作用最强。与第5天结果相比，第10天秸秆各组分中________的降解率变化最大。

(1)要从土壤中筛选出能高效分解PVA的细菌，应采用以______________作为唯一碳源的选择培养基，实验中还应设置对照组。将菌液稀释相同的倍数，对照组培养基上生长的菌落数目应明显______________ (填“多于”或“少于”)选择培养基上的数目，从而说明选择培养基具有筛选作用。

(2)要测定土壤稀释液中微生物的数目．可在显微镜下用______________计数板直接计数。若将100 mL含有PVA分解菌的土壤样品溶液稀释10⁴倍后，取0.1mL稀释液均匀涂布在选择培养基表面，测得菌落数的平均值为160个，空白对照组平板上未出现菌落，则100 mL原菌液中有PVA分解菌_________个，该方法的测量值与实际值相比一般会___________(填“偏大”“偏小”或“相等”)。

(3)要鉴定分离出的细菌是否为PVA分解菌，培养PVA分解菌的培养基中除了加入必需的营养物质外还需要加入______________，用于鉴别PVA分解菌。要比较不同菌株降解PVA能力的大小，用含相同PVA浓度的上述培养基来培养不同菌株．一定时间后，通过测定______________来确定不同菌株降解PVA能力的大小。

苯酚及其衍生物广泛存在于工业废水中，对环境有严重危害。小明同学准备依据下图操作步骤，从处理废水的活性污泥中分离筛选酚降解高效菌株。请回答下列问题：

（1）酚降解菌富集培养基含有蛋白胨、K₂HPO₄、MgSO₄、苯酚和水，其中可作为碳源的有________________。

（2）将采集到的样品接种培养，苯酚用量应随转接次数增加而逐渐____________，

以达到富集酚降解菌的目的。若上图平板中菌落过于密集，应进一步_____________，以便于菌落计数与分离。制备平板培养基时除了需要水、营养物质外，还必须添加_____________。

（3）下图为连续划线法示意图，在图中__________（填图中序号）区域更易获得单菌落。

（4）采用比色测定法（使用苯酚显色剂）检测降解后的废水中苯酚残留量。先制作系列浓度梯度并进行显色反应，下表中1～5号比色管的苯酚浓度应分别为________________。

如果废水为50mg／L苯酚溶液，降解后约有21％的苯酚残留，则需将残留液稀释_____________（填序号：①5②10③20）倍后，再进行比色。

【生物—选修1 生物技术实践专题】蛋白酶在生物医药和日用化工等生产领域具有重要的经济价值。某同学为筛选产蛋白酶的高产菌株，做了如下实验步骤（配制了下列培养基，在适宜条件下培养）：

（1）为实现筛选目的，步骤Ⅰ所使用的培养基配方中，应去除________并加入高浓度的________。

（2）步骤Ⅲ应挑取图A中________处的菌落，本步骤的目的是________。

（3）图B是该蛋白酶和其它酶的热稳定性数据，即酶在不同温度下保温足够长的时间，再在酶活性最高的温度下测其酶活性。在该蛋白酶的工业化生产过程中，通常需对发酵液在60－70℃保温一定时间的，其作用是________。

（每空1分，共4分）为探究“影响酶活性的因素”，某同学设计了一个实验方案，见下表：

（1）2、3号试管为一组对照实验，本实验中要探究的自变量是__________。

（2）请完成实验设计：①应为_________________。

（3）本实验的因变量可以通过观察____________________________________来确定。

（4）在1、2号试管所研究的问题中，温度属于______变量。