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            • 1.
              紫色洋葱是生物学中常用的实验材料。如下图 1所示,它的叶分两种:管状叶伸展于空中,进行光合作用;鳞片叶层层包裹形成鳞茎,富含营养物质。以洋葱为主要材料进行如下实验,请分析回答:

              1

               2

               

               3

                4

               

               

               

              (1) 观察根的切片:实验中用同一个显微镜观察了同一装片四次,每次仅调整目镜或物镜、细准焦螺旋,结果如图2所示,其中视野最暗的是________(填图中序号)。

              (2) 观察洋葱根尖分生区细胞:该部分细胞一般呈________形。图3AB时期的最主要的区别是________。

              (3) 利用洋葱管状叶分离叶绿体中的色素:实验中从叶片中提取色素,层析法分离后得到4条色素带(如图4)。如果在色素提取过程中,没有加碳酸钙,则无显著变化的色素带为________(填图中序号)。

              (4) 若利用洋葱观察质壁分离及复原的现象,理想的实验材料为________,本试验中经常使用的实验试剂有________。

            • 2.  科学家利用番茄(2N)和马铃薯(4N)利用如图技术得到“番茄﹣马铃薯”植株.请回答下列问题:  

              (1)d的名称是___________.

              (2)图示技术名称是__________;由d培育成植株的过程运用的技术手段是植物组织培养,其依据的原理是_____________.

              (3)过程②称为____________,所用的化学诱导剂一般是___________,③过程成功的标志是________.

              (4)过程④是________,⑤过程增殖的方式为___________。

            • 3.

              回答下列有关遗传信息传递与表达的问题。

              利用大肠杆菌作为工程菌生产人胰岛素,图甲中的三个DNA片段上以此表示出了EcoRI、BamH I和Sau3A I三种限制性内切酶的识别序列与切割位点,图乙为某种表达载体示意图(载体上的EcoRI、Sau3A I的切点是唯一的)。

              (1)质粒载体作为基因工程的工具,应具备的基本条件有                      

              (2)可以从下列哪些人体细胞中获取生产人胰岛素的目的基因         (多选题)。

              A.消化道黏膜上皮细胞              B.胰岛A细胞

              C.胰岛B细胞                      D.造血干细胞

              (3)经BamH I酶切割得到的目的基因可以与图乙所示质粒被            酶切后的产物连接,理由是              。连接后的重组质粒________(能、不能、不一定)被BamH I切割。

              (4)将重组质粒导入到大肠杆菌受体细胞,可用含有          的培养基进行初步筛选。目的基因成功表达的标志是               

              (5)已知图乙所示质粒经EcoRI和Sau3AI联合酶切后形成2.0 kb和4.2 kb(1 kb = 1000对碱基)两种DNA片段,若将0.8 kb的单个基因插在质粒的Sau3AI位点处,所形成的重组质粒用EcoRI和Sau3AI联合酶切后,能形成的DNA片段分别为________

              A. 2.8  2.0  2.2               B. 1.8  2.0  2.2 

              C. 4.0 1.8  1.0                D. 2.0  0.8  4.2

            • 4. 要筛选含有重组质粒的Z细胞,应选择          

              A.卡那霉素和亮氨酸均含的培养基

              B.卡那霉素和亮氨酸均不含的培养基

              C.含卡那霉素但不含亮氨酸的培养基

              D.含亮氨酸但不含卡那霉素的培养基

            • 5. 花椰菜易受黑腐病菌的危害而患黑腐病。野生黑芥具有黑腐病的抗性基因。用一定剂量的紫外线处理黑芥原生质体可使其染色体片段化,并丧失再生能力。再利用此原生质体作为部分遗传物质的供体与完整的花椰菜原生质体融合,以获得抗黑腐病杂种植株。流程如下图。据图回答下列问题:

                



              (1)过程①所需的酶是 __________________________。
              (2)过程②后,在显微镜下观察融合的活细胞中有供体的 ________存在,这一特征可作为初步筛选杂种细胞的标志。
              (3)原生质体培养液中需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压,其作用是 ________________。原生质体经过________再生,进而分裂和脱分化形成愈伤组织。
              (4)若分析再生植株的染色体变异类型,应剪取再生植株和 ________________植株的根尖,通过解离、漂洗、染色和制片等过程制成装片,然后在显微镜下观察比较染色体的形态和数目。
              (5)采用特异性引物对花椰菜和黑芥基因组 DNA进行PCR扩增,得到两亲本的差异性条带,可用于杂种植株的鉴定。下图是用该引物对双亲及再生植株1~4进行PCR扩增的结果。据图判断,再生植株1~4中一定是杂种植株的有________。


              (6)对杂种植株进行 ________接种实验,可筛选出具有高抗性的杂种植株。

            • 6. [生物——选修3:现代生物科技专题]

              疾病的诊断与治疗过程中,经常使用单克隆抗体。回答问题:

              (1)单克隆抗体是由杂交瘤细胞产生的,杂交瘤细胞具有的特点是________。体外培养杂交瘤细胞,首先应保证其处于________的环境,其次需要提供充足的营养和适宜的温度,培养箱中充入二氧化碳的作用是________。

              (2)单克隆抗体在诊断疾病的方面上具有________的优点;在治疗癌症方面可制成________治疗癌症。

              (3)科研工作者欲对单克隆抗体进行改造,生产出效果更好的嵌合抗体,用于治疗疾病。用蛋白质工程技术对单克隆抗体进行改造时,首先必须根据预期________,设计嵌合抗体的结构。最终通过基因拼接,将抗体基因改造成嵌合抗体基因,然后导入到淋巴细胞中表达。检测该基因在淋巴细胞中是否翻译成蛋白质.可使用________技术。

            • 7.

              我国科学家屠呦呦因青蒿素的研究荣获2015年诺贝尔生理学和医学奖。青蒿素是目前世界上最有效的治疗疟疾药物,为青蒿植株的代谢产物,其化学本质是一种萜类化合物,但是青蒿中青蒿素的含量很低,且受地域性种植影响较大。其生物合成途径如图1实线框内所示,研究人员还发现酵母细胞也能够产生青蒿素合成的中间产物FPP(如图1虚线框内所示)。科学家为了提高青蒿素产量,将棉花中的FPP合成酶基因导入了青蒿植株并让其成功表达,获得了高产青蒿植株,过程如图2所示。


              (1)研究人员从棉花基因文库中获取FPP合成酶基因后,可以采用________技术对该目的基因进行大量扩增。该技术除了需要提供模板和游离的脱氧核苷酸外,还需要提供________、________等条件。在基因工程中通常选择细菌质粒作为运载体,原因之一是________;如果某质粒由1000个核苷酸组成,核苷酸平均分子量为a,则该质粒的分子量为________。

              (2)图2中的①为________,形成过程中需要________等酶。

              (3)若②不能在含有抗生素Kan的培养基上生存,则原因是________。

              (4)由题意可知,除了通过提高FPP的含量来提高青蒿素的产量外,还可以通过哪些途径来提高青蒿细胞中青蒿素的产量?(试举一例)︰_______________________________________。

              (5)科研人员欲利用酵母细胞生产青蒿素,则在设计培育能生产青蒿素的酵母细胞过程中,需要向酵母细胞中导入________等基因。

              (6)利用酵母细胞生产青蒿素与从植物体内直接提取相比较,明显的优势有________(写出2条)等。

              (7)科研人员培育转基因青蒿植株时,构建基因表达载体的过程如图3。请分析若将图3①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反应管中有________种DNA片段。假设图中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列,现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒,则该图中①的DNA右侧还能选择BamHⅠ进行切割,并能获得所需重组质粒吗?________,请说明理由__________________________________________。


            • 8.

              苏云金杆菌(Bt)能产生具有杀虫能力的毒素蛋白。下图是转Bt毒素蛋白基因植物的培育过程示意图,据图回答下列问题。

              (1)将图(一)①的DNA用HindⅢ、BamHⅠ完全酶切后,反应管中有________种DNA片段。过程②需要用到________酶。

              (2)假设图(一)中质粒原来BamHⅠ识别位点的碱基序列变为了另一种限制酶BclⅠ的碱基序列,现用BclⅠ和HindⅢ切割质粒,则该图(一)中①的DNA右侧还能选择BamⅠ进行切割,并能获得所需重组质粒吗?________,请说明理由_____________________________________________________________________________。

              (3)若上述假设成立,并成功形成重组质粒,则重组质粒_____________________________。

              A.既能被BamHⅠ也能被HindⅢ切开

              B.能被BamHⅠ但不能被HindⅢ切开

              C.既不能被BamHⅠ也不能被HindⅢ切开

              D.能被HindⅢ但不能被BamHⅠ切开

              (4)图中③的Ti质粒能调控合成一种蛋白,可以协助带有目的基因的T—DNA导入植物细胞,并防止植物细胞中________对T—DNA的降解。

              (5)已知转基因植物中毒素蛋白只结合某些昆虫肠上皮细胞表面的特异受体,使细胞膜穿孔,肠细胞裂解,昆虫死亡。而该毒素蛋白对人类的风险相对较小,原因是人类肠上皮细胞______________________________________________________________。

              (6)生产上常将上述转基因作物与非转基因作物混合播种,其目的是降低害虫种群中的________________________________基因频率的增长速率。

            • 9.

              草甘膦是一种广谱除草剂,其除草机制是抑制植物体内EPSPS酶的合成,影响植物正常生长,最终导致植物死亡。目前,发现可以从一种抗草甘膦的大肠杆菌突变株中分离出EPSPS基因,若将该基因转入植物细胞内,获得的转基因植物能耐受高浓度的草甘膦。取6株植物,其中,植物A和D对草甘膦敏感,B和E对草甘膦天然具有抗性,C和F则经过转基因处理,但是否成功未知。图l为4种限制酶的识别序列和酶切位点,图2为含有目的基因的DNA片段及其具有的限制酶切点。据图回答︰


              (1)若A、B、C浇清水,D、E、F浇含有草甘膦的水,则A~F植物中,一定能正常生长的是________。

              (2)一个完整的基因表达载体除复制原点、启动子和终止子外,还应包括________。若利用酶切法获得目的基因,最应选择的限制酶是________和________。

              (3)通常用_________法将EPSPS基因导入植物体内。假设EPSPS基因已被成功转移到植物F中,但植物F没有表现出抗性,分析可能的原因________。

              (4)图甲是某目的基因(4.0kb,1kb=1000对碱基)与大肠杆菌pUC18质粒(2.7kb)重组的示意图。图中Ap是抗氨苄青霉素基因,lacZ是显色基因,其上的EcoRI识别位点位于目的基因插入位点的右侧,其控制合成的物质能使菌落呈现蓝色(图乙中深色圆点即为蓝色菌落)。


              ①图乙培养基中含有氨苄青霉素,则培养基中出现的________(白色/蓝色)菌落中会含有重组质粒。

              ②现用EcoRI酶切重组成功的质粒(重组质粒上目的基因的插入位点与ECORI的识别位点之间的碱基对忽略不计),酶切后进行电泳观察,会出现K度为________kb的片段。

            • 10.

              油菜由白菜(2n=AA=20)和甘蓝(2n=cc=18)天然杂交进化而来,如何在短时间内提高油菜籽的产油率、改善菜籽油的品质是科学家研究的热门课题。请分析回答下列问题︰

              (1)在利用植物体细胞杂交技术将白菜和甘蓝体细胞融合前,需用________除去各自的细胞壁,常用化学促融剂________促进二者融合成杂种植物纽胞。在由杂种植物细胞生成再生植株的过程中,细胞内最多含有________个染色体组。

              (2)研究发现,油脂的生成量与蛋白质的,生成量呈反相关,主要控制基因(独立遗传)及代谢路径如图。

              ①叶肉细胞中的丙酮酸主要来自________。

              ②高油油菜的基因型为________。基因型为MmNn的油菜自交,后代中宜于留种的纯合高油油菜占________。

              (3)油酸为不饱和脂肪酸,能降低人体血液中胆固醇、减少患心血管病风险。F基因控制合成的油酸脂氢酶催化油酸形成饱和脂肪酸,转反义F基因油菜能提高菜籽油中油酸含量。

              ①利用油菜细胞的染色体DNA直接获取大量F基因的方法为________。

              ②构建反义F基因表达载体时,需要________酶;将反义F基因表达载体导入油菜根细胞的方法除基因枪法外,还可用________。从下图看出,构建反义F基因表达载体时没有设计标记基因,目的是________。

              ③Le启动子为种子特异性启动子,将F基因反向连接在Le启动子之后构建了反义F基因。检测转反义F基因油菜细胞内F基因转录的mRNA的含量,结果表明,因杂交形成双链RNA,细胞内F基因的mRNA水平下降。由此推测,反义F基因的转录抑制了F基因的________(填“复制”、“转录”,“翻译”)过程。若F基因转录时,两条单链(a1、a2)中a1为转录的模板链,推测反义F基因转录时的模板链为________。

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