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            • 1.

              为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”,某同学进行了如下实验:

              请分析回答下列问题:

              (1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是________。

              (2)接种微生物的方法有很多,图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是________。用该方法统计样本菌落数后,

              所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml),这里的n=________。

              (3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:

              步骤1:分别取________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间,观察比较培养基中菌落生长情况。

            • 2. 大肠杆菌有许多菌株,野生型菌株在普通培养基中就能成活,菌株A: met-bio-thr+leu+thi+需要在基本培养基中补充甲硫氨酸、生物素,菌株B:met+bio+thr-leu-thi-需要在基本培养基中补充苏氨酸、亮氨酸和硫铵。科学家Lederberg和Tatum曾做了如下实验。回答下列问题:

              (1) 如上图所示,菌株A和B混合培养几小时后,把大肠杆菌洗涤后涂布在基本培养基的固体平板上,发现长出了若干野生型菌落,对此实验现象可作出如下假设:

              ① 不同大肠杆菌间遗传物质发生重组。

              ② ____________。 


              (2) 为了探究上述假设①,有人设计了一种U型管(如图),中间用过滤器隔开,大肠杆菌不能通过,但培养液和营养物质可通过,实验如下。请补充相关实验内容:


              实验步骤:

              ① 在U型管中加入________; 

              ② U型管两端各加入菌株A、菌株B,培养几小时;

              ③ 将U型管两端的大肠杆菌各自取出洗涤后涂布在____上,观察有无菌落。 

              实验结果:________。 

              实验结论:菌株A与菌株B之间遗传物质发生重组。

              (3) 现有1 L水样,用无菌吸管吸取1 mL转至盛有9 mL无菌水的试管中,依次稀释至103倍。各取0.1 mL已稀释103倍的水样分别接种到三个培养基上培养,记录的菌落数分别为31、34、37,则每升原水样中大肠杆菌数为____。该数据理论上比细菌实际数目____。 

              (4) 该实验中需要灭菌的是_____________。(至少写3个) 

            • 3. (一)发酵工程是通过大量培养微生物以生产某种产品.请回答下列问题: (1)欲从多种微生物中分离某种细菌并抑制其他微生物的生长.应使用________培养基.纯化菌种时可采用比较简单的________法进行接种,接种操作应在________进行.

              (2)纯化的菌种常采用固体斜面培养基临时保藏,该方法保存的时间较________,而且菌种易________.常用的凝固剂是________.

              (3)从培养基所含的成分来看,从土壤中分离出固氮菌的培养基特点是________,从土壤中分离出纤维素分解菌的培养基特点是________.

              (二)人组织纤溶酶原擞活物(htPA)是一种重要的药用蛋白,可在转htPA基因母羊的羊乳中获得.流程如下:

              (1)卵母细胞可以从活体________中采集,还可从已处死的雌羊卵巢中获取.对供体母羊用________处理,可以获取更多的卵(母)细胞.采集的精子需要经过________处理,才具备受精能力.

              (2)欲用有限的早期胚胎获得多个转基用个体,可以利用________技术.由于代孕母羊对移入其子宫的外来胚胎________,才使早期胚胎能在代孕母羊体内存活.

              (3)质粒上应有________,才能使htPA基因插入其中.在转htPA基因母羊的肌肉细胞中________(能、不能)检测到目的基因.若在其羊乳中检测到________,说明目的基因成功表达.

            • 4. [生物——选修1:生物技术实践](15分)

              酸菜,古称菹,《周礼》中就有其大名。制作酸菜的初衷是为了延长蔬菜保存期限。请回答: 

              (1)酸菜制作起主要作用的微生物是_____________。但是在发酵初期,很多杂菌会大量繁殖,其中导致泡菜水的表面长白膜的微生物                      。 

              (2)实验室可采用                           法进行菌种纯化,所用培养基需经_________________法进行灭菌。 

              (3)为了保持所获得菌种纯净,需要进行菌种的保藏。对获取的菌种通常是在_________条件下短时间保藏,也可以利用____________的方法长期保存。

              (4)市场上购买的真空包装酸菜,在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象,A同学怀疑是杂菌污染导致的,B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的,说出你支持谁的观点并说出理由。支持            ,(1分)理由是                     。 

            • 5. 每年有大量农作物秸秆有待无公害处理.秸秆富含纤维素,可利用下图流程变废为宝.请回答下列问题:

              (1)人们常从土壤中分离纤维素分解菌,对应的实验流程是:土壤取样→选择培养→梯度稀释→将样品接种到________培养基上→挑选产生________的菌落.

              (2)微生物培养时,将微生物接种到固体培养基上的方法有________和________,这两种方法所用的接种工具在使用前应分别进行________处理.

              (3)葡萄糖 酒精,该阶段常用的发酵菌是________.发酵期间,培养液温度应控制在________,发酵装置必须密封的原因是________.

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