[生物一选修1：生物技术实践]多氯联苯是一种有机致癌物质，容易累积在脂肪组织，造成脑部、皮肤及内脏的疾病并影响神经、生殖及免疫系统。多氯联苯为油状液体，污染土壤后，土壤呈现油状板结，很难清除。研究发现部分酵母菌具有分解多氯联苯的作用，为消除这种污染，科研人员计划从受污染的土壤中筛选出高效分解多氯联苯的菌株。

（1）筛选分解多氯联苯的菌株时，应将土壤样品稀释，接种到以             为唯一碳源的培养基上，从功能上讲，该培养基属于              。

（2）对初步提取到的菌株要进行     ，一般操作方法有两种，下图是利用       法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。培养一段时间后，如果出现菌落且菌落周围       消失或减少，说明该菌落中的菌株具有降解多氯联苯的能力。

（3）若要测定培养液酵母菌的菌体数，可在显微镜下用         直接计数。若用稀释涂布平板法统计菌落数，在涂布接种前，随机取若干灭菌后的空白平板进行培养一段时间，这样做的目的是        。

（4）将1ml酵母菌溶液稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0．1mL稀释液经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为42、43、44，据此可得出每升溶液中酵母菌活菌数为             个/L。

茶饮料中含较多的天然成分。回答下列问题：

（1）红茶菌液是一种传统的活菌饮料，由酵母菌、醋酸菌等微生物利用蔗糖等营养物质共同发酵产生。在接种活菌前，将红茶糖液煮沸的目的是_______________。在发酵的过程中，发现先出现酒味后出现醋味，从物质代谢的角度分析，原因是________

_____________________________________________。

（2）茶饮料所用的胡萝卜素，通常采用______________法提取，理由是_________________________________________________

_____________________________________________。

（3）茶饮料所用的茉莉芳香油的提取流程如下：茉莉花+水→过程A→油水混合物→油层分离与粗提取→过程B+过滤→茉莉油。过程A的方法是_______________，过程B的目的是__________________。

[生物——选修1：生物技术实践]

为了分离和纯化高效分解石油的细菌，科研人员利用被石油污染过的土壤进行如图A所示的实验。

（1）配制好的培养基灭菌通常可以使用_________法。步骤③与步骤②中培养基成分的最大区别是________________________________。

（2）同学甲进行过程④的操作，其中一个平板经培养后的菌落分布如图B所示。该同学的接种方法是___________；推测同学甲用此方法接种时出现图B结果可能的操作失误是________________；在接种前，随机取若干灭菌后的空白平板先行培养了一段时间，这样做的目的是__________________________________________________。

（3）同学乙也按照同学甲的接种方法进行了过程④的操作：将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为56、58和57。据此可得出每升样品中的活菌数为________________。

（4）步骤⑤需要震荡培养其目的是提高培养液溶氧量，同时使____________________________________，提高营养物质利用率。

（5）步骤⑤后取样测定石油含量的目的是______________________________________________________。

某兴趣小组采用稀释涂布平板法对牛奶样品中的微生物进行计数，步骤如下。回答下列问题：

（1）梯度稀释：每次取样前需用手指轻压移液管上的橡皮头，吹洗三次，目的是_________

___________________。

（2）涂布平板：取0.1mL稀释液，均匀地涂布在牛肉膏蛋白胨固体培养基表面，每个浓度下涂布三个平板。

（3）培养与计数：将上述平板放入恒温培养箱中培养，每隔12小时统计一次菌落数，取菌落数稳定时的记录作为结果，防止________________________________________。在10⁴、10⁵、10⁶倍稀释时的统计结果记录如下表：

计算得每毫升牛奶样品中细菌数大约是___________个。这种方法统计的活菌数往往比实际数目低，原因是__________________________________________________________。除此以外，_________________________也是测定微生物数量的常用方法，此方法需要使用血细胞计数板。

微生物连续培养时，一部分旧的培养基以一定的速度流出，同时不断有等量的新鲜培养基流入以保证微生物对营养物质的需要。研究人员将大肠杆菌JA122菌株接种到葡萄糖含量受到限制的培养基中，连续培养多代，然后取样分析其中存在的新菌株。请回答下列问题：

（1）用于连续培养JA122大肠杆菌的培养基从物理性质看属于                  。培养基中除了含葡萄糖作为             外，还应该含有                            。

（2）样品中共发现CV101、CV103、CV116三种新菌株，产生新菌株的原因是由于JA122大肠杆菌发生了

                      导致的，产生三种不同类型的新菌株说明         。

（3）下图表示将CV101、CV103、CV116三种新菌株混合在一起培养的生长情况，三者之间互为竞争关系，并保持稳定生长水平，没有出现一种菌株生存而另外两种菌株灭绝的现象，说明它们已经具有了不同的适应能力，这是              的结果。

（4）对三种菌株的代谢差异进行分析发现，CV103对葡萄糖吸收率最高，代谢终产物是醋酸盐。进一步研究表明，CV101可以在过滤的培养过CV103的培养基中生长，据此作出的推测是：                   。请设计并完成下列实验步骤，来验证你的观点。

①配制                    的固体培养基（A组);和不含碳源的固体培养基（B组）；

②将等量的适量稀释的CV101菌液分别接种到A、B培养基中培养一段时间，并观察记录菌株的生长情况。实验过程应在          条件下进行。

③预期实验结果：                                               。