老坛醋可用于日常菜肴烹饪，风味独特，其生产工艺流程如图。

（1）在酒精发酵阶段，需添加酵母菌。在操作过程中，对发酵缸密封与通气的先后顺序是________。原因是________。

（2）若最开始的发酵液中混有醋酸菌，在酒精发酵旺盛时，醋酸菌能否将葡萄糖发酵为醋酸？________并说明原因：________。

（3）在醋酸发酵阶段，老坛醋采用独特的分层固体发酵法，发酵30天。工艺如下。

①发酵过程中，定期取样测定醋酸杆菌密度变化，趋势如图。由此推测，影响醋酸杆菌密度变化的主要环境因素是________。

②乳酸含量高是老坛醋风味独特的重要成因。发酵过程中，发酵缸中________层醋醅有利于乳酸菌繁殖，积累乳酸。

在盛产柿子的某地，生物小组开展柿子酒、柿子醋生产的相关活动。

（1）土壤中的酵母菌计数：

在秋季的柿子园中，落地的柿子流出果汁的周围土壤中有酵母菌大量生长繁殖。

①用灭过菌的小铁铲、信封取该处土样，并在________旁称取10g土样，加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中，充分摇匀。而后进行系列稀释操作：吸取锥形瓶中土壤液的上清液________mL，转移至盛有9mL无菌水的大试管中充分摇匀，依次等比稀释，获得稀释至10¹、10²、10³、10⁴倍的土壤液的稀释液。

②为测定土壤中酵母菌的数量，选用第①步中所获得的10²、10³、10⁴倍的土壤液的稀释液，并依次分别吸取0.1mL进行平板涂布操作。在适宜条件下培养，当菌落数目稳定时，对各稀释度涂布的三个平板进行菌落计数（如下表）。

则每克土壤样品中的酵母菌数量约为________个。要使该实验所得数据可靠，还应该实施的操作是________。

（2）柿子醋生产菌的制备：

   为去掉酵母菌，挑取变酸的柿子酒内的菌膜于________℃进行纯化培养，获得如图所示菌落分布。应从________（填“甲”“乙”或“丙”）区域中挑取部分菌落制玻片观察，选择所需菌种。

（3）柿子酒、柿子醋的制作（发酵装置如下图所示）：

①排气口弯管设置的目的是________。

②可通过装置中的________对发酵情况进行及时监测。此时，若采用血细胞计数板对发酵液的酵母菌观察计数，与（1）中计数方法相比，该计数方法测得的酵母菌数自较________。

③柿子醋可在柿子酒生产的基础上改变________进行生产。

[生物选修模块1：生物技术实践]

请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

（1）从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

（2）下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

根据用途划分该培养基属于       (选择、鉴别）培养基。该培养基中的碳源是     。

（3）在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染，需对培养基和培养皿进行     (消毒、灭菌）操作者的双手需要进行清洗和       。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能       。培养大肠杆菌时，常用的接种方法是平板划线法和                  。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的        。培养大肠杆菌时，在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是               。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过            处理后才能丢弃，以防止培养物的扩散。

（4）以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

（5）利用培养基不仅可以分离培养微生物，也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌，并且要求无菌操作,原因是         

【生物—选修1：生物技术实践】

回答下列与微生物发酵、培养以及应用相关的问题：

(1)苹果酒清香、明快，风味清爽，它是由果汁发酵产生的。果汁发酵后是否有酒精产生，可用 

              来检验。

(2)严格控制发酵条件是保证发酵正常进行的关键，这直接关系到是否能得到质量高、产量多的理想产物，通常所指的发酵条件不包括   。

 A.温度控制          B.溶氧控制        C．pH控制       D.酶的控制

(3)苹果酒在      的作用下，经过深层发酵可形成苹果醋；在此过程中要适时向发酵液中充气，原因是                  

(4)腐乳是用豆腐发酵制成，有多种微生物参与发酵，其中起主要作用的是           。在腐乳的制作过程中，从微生物培养的角度来看，豆腐应该属于           。

(5)在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下，乳酸菌仍然不能正常生长，还需要在培养基中添加               。应用平板划线法分离乳酸菌时，从第二次划线操作起，每次总是要从上一次划线的末端开始划线，并划线数次，其原因是                                             。

37．[生物－选修1：生物技术实践]
生物技术与我们的生活息息相关。请根据所学知识，回答下列有关问题：
（1）在泡菜腌制过程中，亚硝酸盐含量会发生变化，测定亚硝酸盐含量的方法是________。亚硝酸盐在特定的条件下会转变为________，进而可能引发人体细胞癌变。
（2）制作葡萄酒的菌种主要来源是________。检验是否产生酒精可在________条件下，用________试剂检测。
（3）若要提高果酒的产量，发酵过程中要控制好哪些条件？________（至少写出两项）。
（4）为获得一种能高效降解有机磷农药的细菌，应使用含有________的选择培养基；使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，目的是________。

[生物选修1：生物技术实践]

β－胡萝卜素可用来治疗夜盲症等疾病，也是常用的食用色素。下图为从产胡萝卜素的酵母菌中提取胡萝卜素的基本过程：

（1）培养酵母菌的培养基中一般含有______________等营养成分。要获得大量的酵母菌用于胡萝卜素的提取，应选择__________（填“液体”或“固体”）培养基培养酵母菌。

（2）胡萝卜素萃取过程中，萃取的效率主要取决于_________________________；萃取过程宜采用___________方式加热以防止温度过高；萃取液浓缩前需进行过滤，其目的是____________________________________；提取的胡萝卜素粗品可通过_________________________进行鉴定。

（3）果酒的制作也离不开酵母菌，酒精发酵时一般要将温度控制在___________℃，可用__________________________________检测酒精的产生与否。

下面是果酒和果醋醋作的实验流程和某同学设计的果酒和果醋的发酵装置。根据图示回答下列问题：

（1）图1中的方框内应该填写的内容是______________________________。

（2） 葡萄汁装入发酵瓶时，要留有大约1/3的空间，这是________________________________。

（3）图2装置中的充气口在                   时关闭，在              时连接充气泵，并不断向 内                                  。

（4）若在果汁中含有醋酸菌，在果酒发酵旺盛时，醋酸菌能否将果汁中的糖发酵为醋酸？_____________________________，说明由                                      。

（5）醋酸菌将乙醇变为醋酸的反应式                                              。

I、根据下面的实验装置图（图甲、乙）和果酒的生产工艺流程简图（图丙）回答问题：

(1)图甲所示装置可用于提取____________（填“橘皮精油”、“玫瑰精油”或“胡萝卜素”），此方法称为_______________。

(2)制作果酒时可选用图乙的装置。为适当提高果酒的生产速率，进气口应____________；

II、在培养菌种时，为了检测菌种，以无菌操作技术进行以下实验操作：

①将1g样品溶于无菌水，定容为10ml。

②对上述菌液进行4次梯度稀释：取1ml前一种稀释菌液＋9ml无菌水，摇匀。

③吸取0.1ml最后一次稀释所得菌液涂布于细菌培养基平板上。

④将平板放在37ºC恒温环境中培养24h后，计数平板上菌落数目。假如计数得平板菌落数为5。

(1)由实验可知样品含活菌数约为________个/g。样品的实际含菌数比这个数据多，原因是当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。

(2)要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种______作为对照进行实验

下图是果酒果醋的制作流程 （如图所示）。请据图回答以下问题：

（1）在葡萄酒制作过程中出现葡萄酒变酸现象，其原因可能是发酵液中混有______菌发酵产生乳酸；也可能是             ，导致           菌生长繁殖，产生醋酸。

（2）某同学尝试用罐头瓶制作果酒，在培养过程中，每隔12 h左右将瓶盖拧松一次，此后再拧紧，这样做的主要目的，一是           ，二是避免氧气进入和杂菌污染。

（3）在酸性条件下，可用­­              来检测果酒发酵是否成功。若要进一步检测所得果酒中活体酵母菌的密度时，一般采用                 法，但此种方法最终计算得出的菌体数往往比实际数目低。

（4）在果酒制作中，加入的新鲜葡萄汁没有经过灭菌处理，但是在制出的果酒中基本检测不出酵母菌以外的杂菌，从生态学角度分析：一是酵母菌与杂菌之间存在      关系；二是由于果酒中的         不利于杂菌的生长。

【生物——选修1生物技术实践】

回答下列关于生物技术实践的问题：

Ⅰ、①乳酸菌 ②根瘤菌 ③蓝藻 ④醋酸菌 ⑤毛霉 ⑥酵母菌 ⑦大肠杆菌 ⑧曲霉

制作果酒、果醋、腐乳、泡菜对应的起主要作用的微生物依次是                （填相应序号）；泡菜制作的原理是（用反应式表示）：                                      。

Ⅱ、回答下列有关泡菜制作的问题

（1）制作泡菜时，煮沸盐水，其目的是             。为了缩短制作时间，有人还会在冷却后的盐水中加入少量陈泡菜液，加入陈泡菜液的目的是                                。

（2）已知泡菜中亚硝酸盐含量与泡制时间有关。为了测定不同泡制天数泡菜中亚硝酸盐的含量，某同学设计了一个实验，实验材料、试剂及用具包括：刻度移液管、比色管、不同浓度的亚硝酸钠标准溶液、亚硝酸盐的显色剂、不同泡制天数的泡菜滤液等。回答相关问题：

请完善下列实验步骤。

①标准管的制备：用             和显色剂制成颜色深浅不同的系列标准管。

②样品管的制备：用刻度移液管分别吸取一定量的       ，加到不同的比色管中，然后在各个比色管中加入等量的显色剂进行显色，得到样品管。

③将每个         分别与系列标准管进行比较，找出与样品管颜色深浅       的标准管，该管中亚硝酸钠含量即代表样品管中的亚硝酸盐含量，记录各样品管亚硝酸盐的含量。