[生物——选修3：现代生物科技专题]

Rag₂基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员利用胚胎干细胞（ES细胞）对Rag₂基因缺失小鼠进行基因治疗。请回答有关问题：

（1）取Rag₂基因缺失小鼠上皮细胞的细胞核移入去核的卵母细胞，在采集卵母细胞前，需要用________处理供体。

（2）重组细胞培养到囊胚期，可从其________中分离出ES细胞，该细胞在形态上表现为________。

（3）将Rag₂基因导入ES细胞前，需先构建________，使其能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时使其能够________。

（4）筛选含有基因表达载体的受体细胞的依据是________。ES细胞在功能上具有发育的全能性，可通过________使其分化为造血干细胞，然后移植到Rag₂基因缺失的小鼠体内。

       。请据图分析回答：

 (1)进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和___酶等。

(2)过程③和⑤中，限制酶XhoⅠ切割DNA，使___键断开，形成的黏性末端是__ __。用两种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是__。

(3)构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是___的部位，进而可驱动基因的转录。

(4)过程⑥要用CaCl₂预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的___细胞。

(5)将SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测____。

(6)基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中，不仅能有效改良植物的品质，还由于叶绿体转基因不会随___(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代，从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物。

科学家将人的生长激素基因与大肠杆菌的DNA分子进行重组，并成功地在大肠杆菌中得以表达．但在进行基因工程的操作过程中，需使用特定的限制性核酸内切酶切割目的基因和质粒，便于重组和筛选．已知限制性核酸内切酶I的识别序列和切点是-G↓GATCC-，限制性核酸内切酶II的识别序列和切点是-↓GATC-，据图回答：

(1)过程①表示的是采取             的方法来获取目的基因。

(2)根据图示分析，在构建重组质粒过程中，应用限制性核酸内切酶        （Ⅰ或II）切割质粒，用限制性核酸内切酶          （Ⅰ或II）切割目的基因。

(3)人的基因之所以能与大肠杆菌的质粒进行重组，原因是                     。

(4)将重组质粒导入细菌B之前，要将细菌B放入一定浓度的         溶液中处理，目的是                                。

(5)要筛选出含目的基因的受体细胞应将大肠杆菌培养在含           的培养基上

(6)人体的生长激素基因能在细菌体内成功表达是因为                    ，写出目的基因导入细菌中表达的过程                        。

[选修3—现代生物科技专题]

下图是利用现代生物工程技术治疗遗传性糖尿病(基因缺陷导致胰岛B细胞不能正常合成胰岛素)的过程设计图解。请据图回答：

(1)图中①、②所示的结构分别是           、              。

(2)图中③、④所示的生物工程技术分别是        、         。

(3)过程③通常用去核卵细胞作受体细胞的原因除了它体积大、易操作，含有营养物质丰富外，还因为                                      。

(4)过程④通常采用的方法是                                    。

(5)过程④的完成需要用到的基因操作工具有                      。

(6)图示方法与一般的异体移植相比最大的优点是                  。

【生物——选修3：现代生物科技专题】

   内皮素（ET）是一种含21个氨基酸的多肽，具有强烈的促进血管收缩和促进平滑肌细胞增殖等作用，其功能异常与高血压、糖尿病、癌症等有着密切联系。内皮素（ET）主要通过与靶细胞膜上的ET受体（ET_A）结合而发挥生物学效应。科研人员通过构建表达载体，实现ET_A基因在大肠杆菌细胞中的高效表达，其过程如下图所示，图中SNAP基因是一种荧光蛋白基因，限制酶ApaⅠ的识别序列为，限制酶XhoⅠ的识别序列为。请据图分析回答：

（1）进行过程①时，需要加入缓冲液、引物、脱氧核苷酸和________酶等。

（2）过程③和⑤中。限制酶XhoⅠ切割DNA，使________键断开，形成的黏性末端是________。用两种限制酶切割，获得不同的黏性末端，其主要目的是________________。

（3）构建的重组表达载体，目的基因上游的启动子是________的部位，进而可驱动基因的转录。

（4）过程⑥要用CaCl₂预先处理大肠杆菌，使其成为容易吸收外界DNA的细胞。

（5）将SNAP基因与ET_A基因结合构成融合基因，其目的是有利于检测________。

（6）基因工程操作时可将外源基因整合到叶绿体基因组中，不仅能有效改良植物的品质，还由于叶绿体转基因不会随________（填“花粉”或“卵细胞”）传给后代，从而在一定程度上避免转基因作物中的外源基因能扩散到其他同类作物。

人们预防与诊疗传染性疾病经常使用疫苗和抗体，已知禽流感传染性疾病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，相应疫苗生产和抗体制备的流程之一如下图：

(1)过程②代表基因工程操作步骤中的            ；基因工程的核心步骤是   (填序号)，该过程所需的工具酶有           。

(2)过程⑦利用的生物学原理是            ，获得的X称为             

(3)对健康人进行该传染病免疫预防时，可选用图中基因工程生产的        制备疫苗。对该传染病疑似患者确诊时，可以从疑似患者体内分离出病毒，与已知病毒进行       比较，或用图中的               进行特异性结合检测。