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            • 1.

              马铃薯块茎含有大量的淀粉,富含多种维生素和无机盐,我国已将马铃薯作为主粮产品进行产业化开发。下图是转基因抗盐马铃薯的培育过程,请分析回答问题:

              (1)为获取抗盐基因,可以从碱蓬细胞研磨液中提取抗盐基因的___来合成cDNA。

              (2)上图构建基因表达载体时,最好选用________________酶切割含目的基因的外源DNA和质粒,不能使用Sma l切割的原因是___________。构建好的重组质粒在抗盐基因前要加上特殊的启动子,启动子是一段有特殊结构的_____________片段。

              (3)将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是____________。通过农杆菌的转化作用,使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上,从而使抗盐基因的遗传特性得以_______________。

              (4)从个体水平上检验转基因抗盐马铃薯是否培育成功的方法是_____________。

            • 2.

              I.[生物一选修1:生物技术实践]

              酵母菌是生物科学研穷中一种重要的生物材料,请回答:

              (1)酵母菌的新陈代谢类型是__________,其细胞内将葡萄糖分解为酒精的酶存在于__________。

              (2)某同学尝试用新鲜葡萄制作葡萄酒、为验证发酵液中含有酒精,取2mL发酵液加入试管中,滴加O.5mL浓硫酸酸化的重铬酸钾溶液并轻轻震荡,观察到溶液变__________色,则证明发酵液中含酒精。

              (3)研究者利用基因工程技术改造酵母菌,得到如下四种变异菌株:①菌株Ⅰ——不能合成纤维素酶,菌株Ⅱ——合成的纤维素酶不能分泌到细胞外,菌株Ⅲ——合成的纤维素酶能分泌到细胞外,菌株Ⅳ——合成的纤维素酶分泌并固定于细胞壁。

              在以纤维素为唯一碳源的培莽基上能生长繁殖形成菌落的是菌株_______,若在培养基中加入_______,则菌落周围会出现透明圈。在利用纤维素生产酒精时,与菌株Ⅲ相比,菌株Ⅳ的纤维素酶的利用率高,因为______________________________________________________________。

              (4)为研究发酵罐中酿酒酵母菌的生长情况,常要取样统计分析,并测定pH值。若某研究人员将样品的次序搞乱了,那么判断取样顺序的主要依据基__________(填“酵母菌的数量”或“发酵液的pH”)。

              II.[生物一选修3:现代生物科技专题]

              内皮抑素是一种效果良好的新型抗癌药物,由胶原XⅤⅢ(广泛存在于肝脏等组织中)降解产生。我国科学家研制成含转入内皮抑素基因双歧杆菌的口服液,口服后,双歧杆菌在肠道定植、繁殖,双歧杆菌死亡裂解后,其产生的内皮抑素活性片段被吞噬、转运到肿瘤组织发挥作用。回答下列问题:

              (1)要利用逆转录的方法合成人内皮抑素基因,应从__________组织细胞中提取mRNA,与细胞中内皮抑素基因相比,这种方法合成的cDNA没有__________、启动子、终止子等。

              (2)根据内皮抑素基因的脱氧核苷酸序列设计并合成引物,利用__________技术得到大量内皮抑素基因。

              (3)临床上也有通过静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒,使肿瘤生长受到抑制。在进入临床使用前需要进行目的基因的检测与鉴定:用胰蛋白酶将血管内皮组织___________,制成细胞悬液→转入

              含_____________________等天然成分的培养液中培养得到大量血管内皮细胞→用重组腺病毒感染血管内皮细胞,若抗原—抗体杂交检测呈阳性并观察到细胞凋亡,则说明_________________。

              (4)口服含转入内皮抑素基因双歧杆菌口服液、静脉注射内皮抑素基因重组腺病毒,两种方法都能使肿瘤生长受到抑制,其中属于体内基因治疗的是__________(填“第一种”或“第二种”)。

            • 3.

              下列关于生物工程相关知识的叙述,正确的是( )

              ①在基因工程操作中为了获得重组质粒,可以用不同的限制性内切酶切割质粒和目的基因,但露出的黏性末端必须相同

              ②只要B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成杂交瘤细胞,就能产生单克隆抗体

              ③蛋白质工程的目标是通过基因重组,合成生物体本来没有的蛋白质

              ④太空育种获得的植株也存在与转基因植物一样的安全性问题

              ⑤生态农业使废物资源化,提高能量的传递效率,减少了环境污染

              ⑥诱导细胞融合之前,需将抗原反复注射给实验小鼠,目的是获得产生单一抗体的浆细胞

              A.③⑥      
              B.①⑥         
              C.③④         
              D.②③⑥
            • 4.    下列关于基因工程相关知识的叙述中,正确的是 (    )    
              A. 在基因工程操作中为了获得重组质粒,必须用相同的限制性内切酶剪切目的基因和质粒,最后在细胞内形成重组质粒
              B. 运用基因工程技术让牛合成并分泌人类抗体,该技术将导致定向的变异
              C. 若要生产转基因抗病水稻,可将目的基因先导入到大肠杆菌中,再转入水稻细胞中
              D. 基因治疗主要是对具有缺陷的身体细胞进行基因修复
            • 5.

              牛雄性胚胎中存在特异性的H-Y抗原,可在牛早期胚胎培养液中添加H-Y单克隆抗体,筛选胚胎进行移植,以利用乳腺生物反应器进行生物制药。回答有关问题,

              (1)用H-Y抗原免疫母牛可获得相应抗体,但这种抗体的缺点是________________。

              (2)利用细胞融合技术而发展起来的___________技术,为制造单克隆抗体开辟途径。常用于细胞融合的诱导因素有聚乙二醇(PEG)___________、电激等。

              (3)将药用蛋白基因与___________等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的受精卵中,然后使其生长发育成转基因动物。转基因动物通过分泌的乳汁来生产所需要的药品,称为乳腺生物反应器。

              (4)通常选用囊胚期的早期胚胎做雌雄鉴别,鉴别后的__________胚胎可做胚胎移植。

            • 6.

              近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas9基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列,可人为选择DNA上的目标位点进行切割(见下图)。下列有关叙述正确的是( )


              A.向导RNA可在RNA聚合酶催化下合成
              B.Cas9蛋白的作用是破坏DNA特定位点核苷酸之间的氢键
              C.通过修饰Cas9蛋白让它只切开单链,可减少非同源染色体末端间连接的机会
              D.该技术可被用于关闭、启动基因的表达或替换基因
            • 7.

              下列技术依据DNA分子杂交原理的是

              A.用基因芯片诊断遗传病                
              B.用基因工程方法治疗血友病
              C.检测目的基因是否已成功表达     
              D.目的基因与载体结合形成重组分子
            • 8.

              关于下图中DNA分子片段的说法不正确的是

              A.若该DNA在15N的培养液中复制2代,则子代DNA中含15N的脱氧核苷酸链占总链数的7/8
              B.②处的碱基对缺失将导致基因突变
              C.限制性核酸内切酶可作用于部位,解旋酶作用于ƒ部位
              D.该DNA分子的特异性由碱基的种类、数目及空间结构决定
            • 9. (10个空每空1分,共10分)某质粒上有SalI、HindⅢ、BamHI三种限制酶切割位点,同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。利用此质粒获得转基因抗盐烟草的过程如下图所示,请回答下列问题。 ​​

              (1)将抗盐基因导入烟草细胞内,使烟草植株产生抗盐性状,这种新性状(变异性状)的来源属于______。

              (2)在构建重组质粒时,应选用______ 和_____ 两种酶对______和______进行切割,以保证重组DNA序列的唯一性。

              (3)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌,下图表示运用影印培养法(使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法)检测基因表达载体是否导入了农杆菌。

              培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外,培养基A和培养基B分别还含有______ 、______。从检测筛选的结果分析,含有目的基因的是______菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功,既要用放射性同位素标记的抗盐基因作探针进行______,又要用一定浓度的盐水浇灌烟草植株从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。

              (4)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______技术,愈伤组织经细胞的增殖和分化,进而形成完整植株。

            • 10. 人外周血单核细胞能合成白介素2(IL~2).该蛋白可增强机体免疫功能,但在体内易被降解.研究人员将IL-2基因与人血清白蛋白(HSA)基因拼接成一个融合基因,并在酵母菌中表达,获得具有IL-2生理功能、且不易降解的IL-2-HSA融合蛋白.其技术流程如图.请回答下列问题.
              (1)图中②表示 _____      _ 过程,图中③表示 ____              _过程.

              (2)表达载体2导入酵母菌后,融合基因转录出的mRNA中,与IL-2蛋白对应的碱基序列不能含有 _____    _ (起始、终止)密码子,才能成功表达出IL-2-HSA融合蛋白.

              (3)培养人外周血单核细胞需要无菌、无毒的环境,为防止培养过程中的污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的__          ;为保证营养充足,通常要在细胞培养液中添加           __            _ ;除提供适宜培养温度和pH外,还需适宜气体环境,通常将培养皿置于含 _____              _ 的混合气体培养箱中进行培养.
              (4)应用 ____               __ 杂交技术可检测酵母菌是否表达出IL-2-HSA融合蛋白.IL-2-HSA融合蛋白从酵母菌细胞中排出,需要酵母菌细胞中 ___           ___ (细胞器)的加工.

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