[选修3：现代生物科技专题]

回答利用农杆菌转化法培育转基因植物的相关问题：

（1）培育转基因植物过程的核心步骤是构建基因表达载体，其目的是使目的基因在受体细胞中         ，并且可以通过复制遗传给下一代，同时，使目的基因表达和发挥作用。

（2）构建基因表达载体时，可利用DNA连接酶连接被限制酶切开的           键。

（3）组成基因表达载体的单体是           。基因表达载体中的启动子是       识别和结合的部位，这种结合完成后才能驱动目的基因通过        （填过程）合成mRNA。

（4）用两种限制酶XbaI和SacI（两种酶切出的黏性末端不同）切割某DNA，获得含目的基因的片段．若利用该片段构建基因表达载体，应选用下图中的何种Ti质粒？                 。

（5）将受体细胞培养成植株需要应用             技术，该技术的理论依据是            。

近几年，全国柑橘销售市场陷入低迷，为改变这种状况，并满足不同人的需求，可以将其加工制成果汁、果酒、果醋等。结合下图回答相关问题：

(1)通过过程③制作果酒时常常接种的菌种是________，最适合其繁殖的温度为20℃左右。在过程③中不用灭菌一般也不会受到杂菌的污染，原因是(写出两点)______________。

(2)过程③和过程④所用微生物在代谢方式上的主要区别是_______________________。

(3)选用新鲜而不是干枯的柑橘果皮作为提取香精油的材料，理由是新鲜柑橘果________。过程⑤最好采用的方法是________________法。

(4)橘皮精油的提取之所以不采用水蒸气蒸馏法，是因为水中蒸馏会导致原料________和有效成分________等问题。

(5)现获得一株无籽突变柑橘，研究人员要在较短时间内获得大量该突变植株，最好采用________的方法，该过程中需要对外植体使用酒精进行消毒处理，对培养基彻底灭菌；应采用的灭菌方法是________。

请回答下列现代生物技术中实验操作及目的等有关的问题：

（1）果酒制作过程中，需要先通气后密封，通气的目的是               ；密封的目的是                    。

（2）微生物接种方法很多，常用于统计菌落数目的接种方法是                   ；在

接种操作中，需要在酒精灯的火焰旁进行，其原因是                     。

（3）在植物组织培养过程中，需要对外植体进行         （填“消毒”、“灭菌”），常用体积分数为          的酒精和质量分数为0.1%的氯化汞。

（4）根据胡萝卜素具有易溶于有机溶剂的特点，可用      的方法获得胡萝卜素；提取的胡萝卜素粗产品可通过       方法进行鉴定和分离。

(1)过程④需用同种________酶对含Bt基因的DNA和Ti质粒进行酶切。为将过程②获得的含重组质粒的农杆菌筛选出来，应使用________培养基。

(2)过程③中将棉花细胞与农杆菌混合后共同培养，旨在让________进入棉花细胞；除尽农杆菌后，还须转接到含卡那霉素的培养基上继续培养，目的是________。

(3)若过程④仅获得大量的根，则应在培养基中增加________以获得芽；部分接种在无激素培养基上的芽也能长根，原因是________。

(4)检验转基因棉的抗虫性状，常用方法是________。种植转基因抗虫棉能减少________的使用，以减轻环境污染。

（1）玉米秸秆预处理后，秸秆中的纤维素经C₁酶、C_X酶和          酶的协同作用下最终被 水解成葡萄糖；再经酵母菌发酵产生酒精。发酵过程中检测酵母菌的数量除可采用稀释涂布平板法

计数外，           法也是测定微生物数量的常用方法。

（2）在酸性条件下，发酵产生的酒精，与重铬酸钾反应呈现         色。在盐酸酸化条件下，泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐，与对氨基苯磺酸发生重氮反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成          色染料。在含           的培养基上培养大肠杆菌，菌落会呈现黑色。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入               ，因培养尿素分解菌后而变为红色。纤维素等多糖物质可以与          染料形成红色复合物。

2 （16分）当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其它外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。影响菊花组织培养和月季花药培养的成功率的因素有材料的选择与培养基的组成。

（1）材料的选择：菊花的组织培养一般选择        植株的茎上新萌发的侧枝。在月季的花粉发育过程中，只有某一个时期（       期）对离体刺激敏感，为了挑选到该时期的花药，通常选择         的花蕾。要确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，可用的方法有         和焙花青—铬钒法，后者能将细胞核染成            色。

（2） 培养基的组成：常用的MS培养基主要成分包括：大量元素、微量元素、有机物（如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素以及            ）等。在配制好的MS培养基中，常常需要添加植物激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等都会影响实验结果。如同时使用生长素和细胞分裂素，出现的实验结果是               ；生长素用量比细胞分裂素用量比值低时，出现的实验结果是                 。     

（1）图中A表示　　　　　，a和b过程分别是　　　　　。

（2）植物组织培养过程常用　　　　　培养基，在培育过程中，要注意培养基中添加植物激素的浓度、　　　　　以及　　　　。

（3）提取薄荷清油时，图示所用方法为　　　　，获取油水混合物后，在其中加入　　　试剂，分层后可获得直接精油，再加入　　　　　　试剂，可进一步除水获得薄荷精油。

(1)青蒿素．又名黄花蒿素．是从植物黄花蒿茎叶中提取的有过氧基团的倍半萜内酯药物，青蒿素易溶于有机溶剂，从青蒿中提取青蒿素的方法是以萃取原理为基础，萃取的效率主要取决于________，同时还受到原料颗粒的大小、紧密程度、含水量等条件的影响。萃取加热时需安装冷凝回流装置，其目的是________。萃取过程中应采用________加热，原因是________。

(2)若用植物组织培养的方法快速繁殖黄花蒿，需注意无菌操作。无菌技术是影响植物组织培养能否成功的重要因素。用体积分数为70％的酒精和质量分数为0.1％的氯化汞对外植体进行________，接种时每次使用器械后都需要________灭菌，培养基灭菌的常用方法为________。

(3)在再分化过程中．若愈伤组织在诱导生芽的培养基中未形成芽，但分化出了根，其可能的原因是________。

（1）外植体先经过①         形成愈伤组织，经过再分化能形成胡萝卜植株，其原理是                。

（2）图中培养基需加入                    （植物激素），该培养基按物理性质分类属于              ，该培养基常用             的方法灭菌。

（3）常用萃取法提取胡萝卜中的胡萝卜素，萃取前需要粉碎胡萝卜，目的是       萃取时一般选用        （填乙醇、石油醚）作为萃取剂，理由是                       。

生物技术在生活中应用越来越广泛，但在实践中有许多需要注意的环节，思考并回答下列问题：

（1）一妇女为了使制得的葡萄酒透明清澈，挑选了未成熟的葡萄作为原料，结果却没得到深红色的葡萄酒，原因很可能是                                 。

（2）测定亚硝酸盐含量的方法是                ，制作泡菜宜选用新鲜的蔬菜，原因是                           。

（3）制作腐乳、果醋和泡菜时，需要通入氧气的是          ，腐乳制作中加盐腌制的目的除析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬外，还能够                              。

（4）微生物的培养和组织培养都需要培养基，一般培养基都含有的成分是                       。菊花的组织培养所需的培养基是        （填“固体”或“液体”）状态，且菊花比较容易培养，在配制MS培养基时，        （填“必须添加”或“不必添加”）植物激素。

生物技术在人们的生产、生活中应用非常广泛。请回容下列与生物技术有关的问题：

(1)市场上购买的真空包装酸菜，在没有发生漏气状态下发生了“胀袋”现象，A同学怀疑是杂菌污染导致的，B同学怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，说出你支持谁的观点并说出理由。支持_________同学的观点，理由是_________。

(2)苹果醋是最受欢迎的饮料之一，其生产过程中利用了_________的发酵作用，该过程需将温度控制在_________。

(3)在微生物的培养过程中，实验室对培养基灭菌常用的方法是_________。为防止冷凝水影响细菌的生长，需将培养皿_________培养。在培养基上产生的单个菌落在生态学中可以被称为_________。

(4)植物组织培养常用MS培养基，该培养基中的蔗糖能为离体组织细胞提供碳源和能源，同时能够维持细胞的_________。与微生物培养基成分相比，诱导愈伤组织的培养除了添加的糖类不同外，还应该_________。