下面是获取某种二倍体抗虫植株的技术流程图：

请完成下列问题：

（1）上图中二倍体植物愈伤组织是外植体在适宜的_________________及温度、PH等条件下培养形成的，这一过程被称为___________。

（2）在获取抗虫植物的技术流程中，______________ 、__________________和工具酶等物质均来自微生物。

（3）下图中A、B、C、D四段DNA单链是根据毒蛋白基因对应片段合成的。假定在该DNA复制中，其中以a链为模板的复制，其子链是由左向右延伸的。

则在流程图的过程①中应选择___________（填字母）作为引物。如果选取的引物，使过程①的效率很低，则所选的引物中可能存在___________和_______________。

（4）如果要获取检测毒蛋白的单克隆抗体，通常要在动物细胞工程中_________和__________ 等技术的支持。

【选修3-现代生物科技专题】

为治疗糖尿病，研究人员提出了如下图的方法。

（1）一般选用的图中①都是_____________的供体细胞。

（2）核移植的受体细胞一般选用MⅡ期卵母细胞。进行相关显微操作时，一般用微型吸管一并吸出_____________。  

（3）细胞在体外培养时，除培养液提供必需的营养条件、适宜的温度、pH和气体环境外，还需要有_____。上图所获的胚胎干细胞可由________中分离出来，在功能上具有________。

（4）利用PCR技术扩增正常胰岛素基因的前提条件是___________。将正常胰岛素基因导入胚胎干细胞并维持稳定和表达的过程，称为_____。

（5）“定向诱导”的目的是使重组细胞B发生_________，从而形成功能专一的胰岛类似细胞。

（6）该治疗糖尿病的方法与相比异体移植，突出的优点是________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降．可利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗，根据所学的知识，回答以下问题：

（1）ES细胞是由早期胚胎或________中分离出来的一类细胞，具有________性，可以将其培养成人体各种组织器官．

（2）为了快速获得更多的干扰素基因，常常采用________技术进行扩增．构建含有干扰素基因的表达载体时，该结构除了复制原点外，至少包含________和干扰素基因等；为检测干扰基因是否表达，可以采用________的方法．

（3）将含有干扰素基因的表达载体导人胚胎干细胞时，最常用也最有效的方法是________．

（4）使用培养基培养含有目的基因的胚胎干细胞肘，为防止培养过程中杂菌污染，通常要在细胞培养液中添加一定量的________培养过程中通常采用培养皿和松盖培养瓶，将其置于含________的混合气体的培养箱中进行培养．

【生物——选修3：现代生物科技专题】

科学家利用生物工程技术，探究猪骨形态发生蛋白15(bmP15)基因具有表达特异性和示踪干细胞诱导分化为类卵母细胞的潜能。通过扩增猪bmP15基因的启动子片段与增强型绿色荧光蛋白（EGFP)基因构建表达载体，该工程技术基本流程如下图。请回答下列问题：

（1）利用___________技术扩增bmP15基因的启动子片段的前提是要有一段已知核苷酸序列，以便合成__________。

（2）过程①中，应先用限制酶________________处理表达载体1,以便插入bmP15基因的启动子构建表达载体2。

（3）过程②中，常采用___________技术将表达载体2成功导入受体细胞。

（4）培养受体细胞时，通常需在培养液中添加一定量的___________，以防污染；还需通入一定浓度的C0₂,目的是_________________。

（5）在实验结果的基础上，利用标记的_______基因作探针，与猪羊水干细胞的mRNA进行分子杂交，可进一步探究猪bmp基因特异性表达的原因。

（6）实验说明，bmP15基因启动子调控下EGFP基因在____________细胞表达。

近年来,我国死于狂犬病的人数有上升之势。狂犬病病毒的核酸是RNA ,机体感染病毒后产生的特异性lgG 抗体,能消除狂犬病病毒,这是接触狂犬病病毒后及时注射疫苗和特异性抗体的重要依据。我国利用地鼠的肾细胞培养狂犬病疫苗,已取得良好效果。

请根据上述材料,回答下列问题:

(1)特异性抗体获取的方法可用单克隆抗体制备法。在制备单克隆抗体的过程中,应用的动物细胞工程技术是                           。

(2)如图是单克隆抗体制备过程示意图,请据图回答:

①图中A 过程,从小鼠的脾脏中取得的“小鼠细胞”是        细胞,该细胞能够产生        。从小鼠体内提取分离该细胞之前,应给小鼠注射的特定的物质是        。

②图中B 过程是细胞融合,该过程需要用        、聚乙二醇或电激等诱导。

③特异性抗体的获取方法也可以采用向动物体内反复注射某种抗原,使动物产生抗体,然后从动物血清中分离所需抗体。与这种方法制备的抗体相比,单克隆抗体具有                                     等特点。

(3)动物细胞体外培养需要满足的环境条件有                          。

(4)单克隆抗体技术还有哪些用途?                                                                。

下图是单克隆抗体制备流程阶段示意图，请据图回答以下问题：

(1) 技术是单克隆抗体技术的基础。

(2)图中HAT培养基属于 培养基，用于筛选出杂交瘤细胞。

(3)单克隆抗体与常规的血清抗体相比，最大的优越性是 。

(4)动物细胞融合除了采用植物细胞原生质体融合常用的诱导剂外，还可以采用的生物诱导剂是 。

（1）与酵母菌相比较，蓝细菌在结构上最主要的特点是没有成型的__________，在代谢上最主要的特点是能进行__________作用。

（2）①②过程中均使用的工具酶有__________和__________。

（3）构建重组质粒B在整个操作过程中的目的是__________和__________。

Ⅱ．人绒毛膜促性腺激素（HCG）是女性怀孕后胎盘滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，制备的抗HCG单克隆抗体可用于早孕的诊断。如图为抗HCG单克隆抗体制备流程示意图，请回答下列问题。

（4）制备单克隆抗体过程中要用到__________技术和__________技术。

（5）在细胞内DNA合成一般有两条途径。主要途径是在细胞内由糖和氨基酸合成核苷酸，进而合成DNA，而氨基嘌呤可以阻断此途径。另一辅助途径是在次黄嘌呤和胸腺嘧啶核苷存在的情况下，经酶催化合成DNA，而骨髓瘤细胞的DNA合成没有此辅助途径。

①利用两条DNA合成途径的不同特点配制的HAT培养基含有多种成分，其中添加的__________成分具有筛选杂交瘤细胞的作用。

②最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点是__________。

（6）此过程生产的单克隆抗体可以与__________特异性结合，从而诊断早孕。