[生物——选修1：生物技术实践]

下图是苹果醋制作的流程简图，请分析回答下列问题：

（1）图中显示苹果醋的制作是经过微生物两次发酵所获得的，两次发酵所利用的微生物分别是________和________。

（2）过程①和过程②所需要环境条件的最大不同点是________。

（3）过程②所需要的微生物可以从食醋中分离获得。下图是分离获得苹果醋制作所需微生物的流程图：配置培养基→培养基灭菌→接种→培养→选择所需菌落

①培养基的灭菌常用________。

②接种常用的方法有________和________，其中可以用于微生物计数的方法是________。此方法在进行时，一般每种稀释倍数的溶液至少涂布________个平板，选择菌落数在________的平板进行计数。除了这种活菌计数法外，________也是测定微生物数量的常用方法。

[生物——选修1生物技术实践]

   研究人员成功地从土壤中筛选到能产生纤维素酶的微生物。

（1）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括三种组分，即C₁酶、Cx酶和________酶。

（2）如果要对土壤中的纤维素分解菌进行计数，常采用________法进行接种培养，接种工具采用________灭菌的方法。

（3）常用的刚果红染色法有两种：第一种是先培养微生物，再加入刚果红进行颜色反应；第二种是在________时就加入刚果红。________（选答“第一种”或“第二种”）方法会使菌落之间发生混杂。

（4）如果观察到产生________的菌落，说明可能获得了纤维素分解菌。为了确定是纤维素分解菌，还需要进行________的实验。纤维素酶的测定方法一般是采用对纤维素酶分解滤纸等纤维素后所产生的________进行定量的测定。

生物技术实践与人们生产和生活密切相关。请回答下列有关问题：

(1)无菌技术主要通过消毒和灭菌来避免杂菌污染。常用的灭菌方法有灼烧灭菌、________灭菌和________灭菌。某实验小组欲从豆油污染的土壤中筛选出能高效降解脂肪的菌株，应将土壤样品稀释液接种于以________为唯一碳源的同体培养基上，从功能上讲，该培养基属于________培养基。进行微生物的计数时，运用活菌计数法统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

(2)提取天然胡萝卜素的方法主要有三种，一是从植物中提取，二是从养殖的岩藻中获得，三是________。工业生产上，用养殖的岩藻作为原料提取胡萝卜素时，________(填“需要”或“不需要”)将新鲜的岩藻干燥。

(3)胡萝卜素是________(填“挥发性”或“非挥发性”)物质。乙醚、四氯化碳和石油醚三种有机溶剂中，应选择石油醚来提取胡萝卜素，不选择乙醚的理由是________；不选择四氯化碳的理由是________。

（1）研究中，首先要配制培养基，培养基中一般应含有                 等四类营养物质，配制好之后，应该用        灭菌法进行灭菌。

（2）操作A的目的是        ，操作B的接种法培养出的结果应该如图         所示。

（3）为了检测水样中的细菌，在接种前，随机取若干灭菌后的空平板先行培养了一段时间，这样做的目的是                   ；然后，将1mL水样稀释100倍，在3个平板上用涂布法分别接入0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为39、38和37。据此可得出每升水样中的活菌数为         个。

 （4）该小组将得到的菌株接种到液体培养基中并混匀，一部分进行静置培养，另一部分进行振荡培养。结果发现：振荡培养的细菌比静置培养的细菌生长速度快。其原因是振荡培养能                   。

科学家发现家蝇体内存在一种抗菌活性蛋白。分别在加入和未加入该抗菌蛋白的培养基中接种等量金黄色葡萄球菌，培养一定时间后，比较两种培养基中菌落的数量，可确定该蛋白质的抗菌效果。
（1）抗菌实验所用培养基中的牛肉膏和蛋白胨主要为细菌生长提供         。灭菌与调节pH的先后顺序是　    。抗菌蛋白需在灭菌        （填“前”或“后”）加入。
（2）对新配制的培养基灭菌时所用的设备是             。实验前需对超净工作台进行             处理。
（3）该实验接种金黄色葡萄球菌的方法是             。
（4）实验中的自变量和因变量分别是             。
（5）有人认为抗菌蛋白本身具有极强的抗菌能力，因此，该实验操作不需要在无菌条件下进行，请你谈谈自己的观点，并简要说明理由                     。

[生物——选修1：生物技术实践]

请回答下列与微生物有关的问题：

(1)土壤中具有分解尿素的细菌，此类细菌能产生脲酶，该酶能将尿素分解成________。

(2)为从富含尿素的土壤中分离获得尿素分解菌的单菌落某同学设计了甲、乙两种培养基(成分见下表)：

注：“＋”表示有，“－”表示无。

培养基甲________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是________；培养基乙________(填“能”或“不能”)用于分离和鉴别尿素分解菌，原因是___________________________。

(3)如分别取0.1mL已稀释10²倍的水样分别涂布到四个琼脂同体培养基的表面进行培养，培养基记录到产生脲酶的细菌的菌落数分别为161、155、158、370，则每升原水样中该细菌数为________。

(4)纯化细菌时使用的培养基一般用________法灭菌，________(填“可”或“不可”)用加入抗牛素的方法防止杂菌感染。

(5)某小组采用平扳划线法分离某样本的该细菌。在第二次及以后的划线时，总是从上一次划线的末端开始划线。这样做的目的是______________________________________________________。

(6)尿素分解苗在20℃长期保存时，菌液中常需要加入一定量的________(填“石蜡”“蒸馏水”或“甘油”)。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

回答下列与生物工程有关的内容

(1)基因工程技术中，________是将目的基因导入植物细胞最常用的方法，其中的Ti质粒上的T－DNA是指________。获得该基因后，将该基因在反应体系中扩增时需要舔加的有机物质有________。

(2)试管婴儿技术是指采用人工方法将卵子与精子从人体内取出并在体外受精，发育成胚胎后，再移植回母体子宫内，以达到受孕目的的一种技术。顺利受精必须满足两个条件来自父方的精子要进行________；来自母方的卵母细胞要________。

________(填生物技术)是培育试管婴儿最后一道工序。一般来说，该技术操作比较合适的时期是________。

(3)与传统方法生成的抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是特异性强、灵敏度高、________。在癌症治疗时，把抗癌细胞的单克隆抗体跟________相结合，制成的“生物导弹”，借助单克隆抗体的________作用，将药物带到癌细胞位置，将其在原味杀死。

(4)桑基鱼塘生态系统能充分利用废弃物中的能量，形成无废弃物农业，这主要遵循了生态工程的________原理。同时，通过饲养家禽、家畜，栽培食用菌，提高农民经济收入使保护环境和发展经济相互协调，这又体现了生态工程的________原理。我国西北一些地区年降雨量少，适官种植灌小和草，却被硬性规定种植属于乔木的杨树，致使许多地方的杨树长成半死不活状，结果防护林成为残败的“灰色长城”。其失败的原困主要是违背了________原理。

为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”，

某同学进行了如下实验：

请分析回答下列问题：

(1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外，还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间，要进行的操作是________。

(2)接种微生物的方法有很多，图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时，同时需要做A、B、C三个培养皿，原因是________。用该方法统计样本菌落数后，

所得数据需要乘以10ⁿ后，才可表示乳酸菌的数量(单位：个／ml)，这里的n＝________。

(3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤：

步骤1：分别取________加入三组无菌培养皿中，再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基，立即混匀，静置凝固成平板。

步骤2：向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

步骤3：将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间，观察比较培养基中菌落生长情况。

(1)培养基中的蛋白胨和淀粉分别为细菌生长提供了____ ，____

(2)实验中，下列材料或用具需要灭菌的是____________(填写序号)，需要消毒的是___________(填写序号)。 

①培养细菌用的培养基与培养皿  ②玻璃棒、试管、锥形瓶  ③实验操作者的双手

(3)为了尽快观察到细菌培养的实验结果，应将接种了湖水水样的平板置于____________中培养， 培养的温度设定在37℃。要使该实验所得结果可靠，还应该同时在另一平板上接种__________作为对照。

(4)细菌培养产生的单个菌落在生态学中称为__________。根据上述结果计算，被检样的H细菌指数为_________。用这种方法测定密度，实际活菌数目要比测得的数目  ___________，原因是____________。

(5)实验结束后 ，使用过的培养基应该进行____________________处理后才能倒掉。

（1）玉米秸秆预处理后，秸秆中的纤维素经C₁酶、C_X酶和          酶的协同作用下最终被 水解成葡萄糖；再经酵母菌发酵产生酒精。发酵过程中检测酵母菌的数量除可采用稀释涂布平板法

计数外，           法也是测定微生物数量的常用方法。

（2）在酸性条件下，发酵产生的酒精，与重铬酸钾反应呈现         色。在盐酸酸化条件下，泡菜腌制过程中产生的亚硝酸盐，与对氨基苯磺酸发生重氮反应后，与N—1—萘基乙二胺盐酸盐结合形成          色染料。在含           的培养基上培养大肠杆菌，菌落会呈现黑色。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入               ，因培养尿素分解菌后而变为红色。纤维素等多糖物质可以与          染料形成红色复合物。

2 （16分）当植物细胞脱离了原来所在植物体的器官或组织而处于离体状态时，在一定的营养物质、激素和其它外界条件的作用下，就可能表现出全能性，发育成完整的植株。影响菊花组织培养和月季花药培养的成功率的因素有材料的选择与培养基的组成。

（1）材料的选择：菊花的组织培养一般选择        植株的茎上新萌发的侧枝。在月季的花粉发育过程中，只有某一个时期（       期）对离体刺激敏感，为了挑选到该时期的花药，通常选择         的花蕾。要确定其中的花粉是否处于适宜的发育期，可用的方法有         和焙花青—铬钒法，后者能将细胞核染成            色。

（2） 培养基的组成：常用的MS培养基主要成分包括：大量元素、微量元素、有机物（如甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素以及            ）等。在配制好的MS培养基中，常常需要添加植物激素。植物激素的浓度、使用的先后顺序以及用量的比例等都会影响实验结果。如同时使用生长素和细胞分裂素，出现的实验结果是               ；生长素用量比细胞分裂素用量比值低时，出现的实验结果是                 。