回答下列问题：

（1）博耶( H. Boyer)和科恩(S. Coben)将非洲爪蟾核糖体蛋白基因与质粒重组后导入大肠杆菌细胞中进行了表达，该研究除证明了质粒可以作为载体外，还证明了_____(答出两点即可)。

（2）体外重组的质粒可通过Ca²⁺参与的_______方法导入大肠杆菌细胞：而体外重组的噬菌体DNA通常需与_______组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞，在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中,可作为重组噬菌体宿主细胞的是__________。

（3）真核生物基因(目的基因)在大肠杆菌细胞内表达时,表达出的蛋白质可能会被降解。为防止蛋白质被降解，在实验中应选用________的大肠杆菌作为受体细胞,在蛋白质纯化的过程中应添加______的抑制剂。

下图表示某科学家利用胚胎干细胞对干扰素基因缺失小鼠进行基因治疗的相关过程，据图回答下列问题：

（1）步骤①②利用的技术名称分别是                 、                     。图中造血干细胞中的遗传物质至少有         个来源。

（2）若利用PCR技术扩增目的基因并完成图示小鼠的基因治疗，涉及的酶有限制性核酸内切酶、DNA连接酶、耐高温的DNA聚合酶（Taq酶）和                  等。

（3）下图所示的一个质粒分子经EcoRⅠ切割前后，分别含有      、          个游离的磷酸基团。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，故利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取       作为引物。一个目的基因通过PCR技术扩增第n次时，需要        个引物。

（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发       色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否转录，可以采用                        的技术。

Ⅰ.下图为三种质粒和一个含目的基因的片段的示意图。复制原点是质粒能正常复制的必需组成。图中Ap为氨苄青霉素抗性基因，Tc为四环素抗性基因，lacZ为蓝色显色基因。EcoRⅠ、PvuⅠ为相应的限制酶切割位点，括号内的数据是该切点与复制原点  的距离，单位为kb（1kb = 1000个碱基对长度）。请回答下列问题：

（2）该基因来自__________________（填“基因组文库”或“cDNA文库”）。

（3）翻译时与密码子发生碱基互补配对的是__________上的反密码子。

根据基因工程的有关知识，回答下列问题：

(1)cDNA文库属于_____基因文库，其构建方法是：用某种生物发育的某个时期的_____反转录产生的cDNA片段，与________连接后储存在一个受体菌群中。

(2)切割DNA分子的工具是_______________，它能使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的________________断开，形成黏性末端或平末端。

(3)基因工程中所使用的DNA连接酶有两类。既可以“缝合”黏性末端，又可以“缝合”平末端的是________DNA连接酶。

(4)如果受体细胞是大肠杆菌，需要用________处理细胞，使之成为感受态细胞，才能吸收DNA分子。

党的十九大报告指出要“大力度推进生态文明建设……全面节约资源有效推进，能源资源消耗强度大幅下降。重大生态保护和修复工程进展顺利，森林覆盖率持续提高。生态环境治理明显加强，环境状况得到改善”。请回答下列相关问题：

（1）生态工程是对________进行修复重建，对________进行改善，促进人和自然的和谐发展。

（2）全面节约资源有效推进，能源资源消耗强度大幅下降很大程度上得益于实行“________”的原则，从而实现废弃物的资源化。

（3）实行生态工程，很多时候还需要考虑人文关怀、贫困地区的收入等问题，才能很好的解决“前面造林，后面砍林”的现象，这遵循的是生态工程的________原理。

（4）在保护濒危植物方面，运用了很多技术，比如微型繁殖运用的是________技术，其原理是________。

（5）在处理城市生态系统垃圾时，采用了生物治理法，分解者处理垃圾的相关目的基因从分解者体内用酶切割下来，再与________相连导入受体菌。

(1) 制作固定化酵母细胞时，使用了图甲中方法〔  〕________（填出标号及名称），在该实验中，完全溶化的海藻酸钠溶液必须________ 后再与酵母细胞混合。充分混合均匀的酵母菌—海藻酸钠胶液可在饱和________溶液中形成凝胶珠。

 (2) 图乙表示________的实验过程, 通过B所示步骤得到滤液后，再向滤液中加入2moL/L的NaCl溶液的目的是________,C所示步骤加入蒸馏水的目的是________。

A.某生物兴趣小组积极参加当地盛产苹果的乡镇生产苹果酒、苹果醋的调研项目。下面是他们调查之后发现的一系列问题，请帮助回答：

（1）制备高产果酒的酵母菌菌株：

①在秋季的葡萄园中，在________的周围土壤中酵母菌大量生长繁殖。

②为测定土壤中酵母菌的数量，一般选用________倍稀释，用________法接种上述所得酵母菌稀释液。

③在________的发酵液中，酵母菌能大量生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。

（2）苹果酒、苹果醋的生产：

①小组同学在制作果酒的发酵阶段，发酵瓶的瓶盖应________。

A．一直打开

B．打开并盖上一层纱布

C．定时拧松

D．始终拧紧

②苹果醋生产可在苹果酒生产基础上改变________进行，其发酵温度应________（填“低于”或“高于”）苹果酒的生产。

③在果醋的制作中，提供碳源的物质主要是________。

B．胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，也可以作为食用色素。请回答下列问题：

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，在干燥过程中要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液在浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，所用的培养基一般含________等成分，有氧及温度为________左右条件最适合该酵母菌生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的________。

（4）所获得的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照材料为________。

（1）果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌的代谢类型是_________________；多种微生物参与了豆腐的发酵，其中其主要作用的是________________，泡菜的制作离不开_____________；（2）醋酸菌发酵过程当缺少糖源时，醋酸菌将_______变成_______，再将其变成_______。

（3）在实验室培养微生物时，获得纯净培养物的关键是_________________；

（4）在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的_____________将尿素分解成了___________，

从而使培养基碱性增强。

(5)分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是至少由3种组分组成的符合酶，葡萄糖苷酶则将___________分解成_____________。在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素等多糖形成_______色复合物，用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基中会出现以该菌落为中心的__________________，这种培养基属于_____________(填“选择”或“鉴别”)培养基

胡萝卜素可以用来治疗因缺乏维生素A而引起的各种疾病，也可以作为食用色素。请回答下列问题：

（1）从胡萝卜中提取胡萝卜素时，在干燥过程中要控制好温度和时间，原因是温度过高、干燥时间过长会导致________；萃取液在浓缩前需进行过滤，其目的是________。

（2）培养产胡萝卜素的酵母菌时，所用的培养基一般含________等成分，有氧及温度为________左右条件最适合该酵母菌生长、繁殖。

（3）筛选产胡萝卜素的酵母菌时，接种过程需要在酒精灯火焰附近进行，其目的________。

（4）所获得的胡萝卜素粗品可通过纸层析法进行鉴定，该过程中的对照材料为________。