某同学用新鲜的泡菜滤液为实验材料分离纯化乳酸菌。分离纯化所用固体培养基中因含有碳酸钙而不透明，乳酸菌产生的乳酸能溶解培养基中的碳酸钙。

(1)为了缩短泡菜制作时间，可在冷却的盐水中加入少量陈泡菜液，目的是___________________。

(2)泡菜液中的乳酸的产生场所是乳酸菌的___________。在制作泡菜初期，泡菜坛水槽总是有气泡冒出的主要原因是_______________。随着泡制时间的延长，泡菜坛中亚硝酸盐的含量变化趋势为__________

(3)为分离纯化出优质的乳酸菌，应挑选_________________的菌落作为候选菌。

(4)乳酸菌发酵产酸奶，发酵到后期时，发酵速度逐渐变缓甚至停止，主要原因是：___________________。

手机高温、潮湿的环境非常适合细菌的生长，由大肠杆菌引起的食源性疾病日渐成为社会比较关注的公共卫生问题。为了了解手机上大肠杆菌的种类及分布情况，某兴趣小组进行了如下实验步骤。请进一步完善实验内容并回答相关问题：

（1）实验步骤：

①配制含有________、水、无机盐的固体培养基，并在培养基中加入少量________（使大肠杆菌菌落呈现黑色）；

②从10名学生的手机正、反面采集样品，分别接种至灭菌的培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24～48h，选取________的菌落；

③将接种针用________法灭菌后，将②中选取的菌落接种到________（填“固体”或“液体”）培养基，在恒温摇床上培养24h，使细菌大量繁殖；

④用________法将③过程所获得的细菌接种到培养基上，分别统计菌落的种类和数目；

⑤根据菌落的特征进一步鉴定大肠杆菌的类型。

（2）上述实验步骤中，从用途看，①所用培养基属于________培养基。

（3）上述实验步骤④统计的菌落数往往比活菌的实际数目低，原因是________。

土壤酶是由土壤微生物产生的，具有催化作用的一类蛋白质，如脲酶、蔗糖酶等。土壤酶易受到环境中外源物质（如除草剂、重金属、肥料等）的影响。科学家研究了氟磺胺草醚和甲咪唑烟酸两种除草剂对土壤中脲酶和蔗糖酶活性的影响。

（1）研究者从近年________（填“喷洒”或“未喷洒”）过除草剂的环境中选取表层土壤作为实验样品。

（2）各实验组称取200g的土壤置于棕色广口瓶中，分别添加等量的不同质量浓度的除草剂溶液，同时设置空白对照组。广口瓶用________（填“脱脂棉”或“保鲜膜”）封口，置于________中培养。分别在培养不同天数后取样，测定土壤中脲酶和蔗糖酶的活性。结果如下表所示。

（3）本实验的自变量是处理时间和________。实验结果显示，两组除草剂中的________的各实验组对土壤脲酶活性的影响随时间变化，均呈现“抑制-激活-抑制”的趋势。对土壤蔗糖酶活性激活率最高的处理条件是________。

（4）欲从上述土壤中筛选出蔗糖分解菌或尿素分解菌，则应将土壤浸出液采用________法接种到经________灭菌法处理的相应的固体平板培养基上。

工业生产中会产生一些含碳有机废水，某细菌X在生物处理废水中能发挥很大作用，现要对其进行筛选。

(1)应选用上表中的 (填图中字母)培养液，解释不选用其他培养液的原因：a   ，b 。

(2)接种前培养基必须进行 灭菌，为确定培养基灭菌是否彻底，可设置的 空白培养基为对照组；若要制作平板，常在培养液中加入   作为凝固剂，培养时，需将平板 放置。

(3)为获得单个菌落，某同学将细菌X接种到正确的培养基中，经培养后，其中一个平板的菌落分布如图所示，该同学的接种方法是    ，所用的接种工具是         ，该同学可能的操作失误是          。

(4)对细菌X计数时，可吸取菌液1ml稀释1000倍，然后吸取稀释后的菌液0.2ml，接种于平板上培养，一段时间后观察到三个平板上的菌落数为61、62、63，则该菌液中的细菌X数量约为        个/ml。

血栓主要由不溶性的纤维蛋白等物质组成。纳豆激酶(NK)是一种在纳豆发酵过程中由纳豆菌产生的蛋白酶，它不但能直接作用于纤维蛋白(A过程)，还能间接激活体内纤溶酶原(B过程)。如图是有关纳豆激酶溶栓机理简图，请据图回答下列问题。

(1)研究NK直接水解作用：给定纤维蛋白平板，将______________滴加其上，若出现相应的溶解圈，则可说明________________________________。

(2)NK的间接作用是通过________________________________________激活体内纤溶酶原，增加纤溶酶的量和作用，溶解血栓。

(3)请根据下列给出的实验材料，比较NK与内源性纤溶酶的溶栓效果，并补全表格空白位置上的相应内容。供选实验材料：NK溶液、内源性纤溶酶溶液、纤维蛋白块、蛋清溶液、缓冲液、双缩脲试剂、量筒、试管和秒表。实验步骤：(“＋”表示添加，“－”表示未添加)

①表格中A处添加的物质是______________，B处添加的物质是________________。

②实验结果的鉴定所用的观察方法是________________________________________。

[选修1：生物技术实践]

（1）在家庭制作少量葡萄酒时，利用附着在葡萄皮上的野生酵母菌作菌种，但果酒产量不高。为获得高产果酒的酵母菌菌株，研究人员通过辐射处理野生型酵母菌，然后用             法将酵母菌菌种接种到添加了检测试剂       的选择培养基上，置于适宜条件下培养一段时间，选用菌落周围               的即为高产菌株。

（2）根据胡萝卜素               的特点，可以用萃取的方法提取胡萝卜素。我们可以用        (乙醇、乙酸乙酯）做为萃取试剂。

一种广泛使用的除草剂（含氮有机物）在土壤中不易被降解，长期使用可污染土壤．为修复被该除草剂污染的土壤，可按下面程序选育能降解该除草剂的细菌（已知该除草剂在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明）．

   （1）制备土壤浸出液时，为避免菌体浓度过高，需将浸出液进行稀释处理．现有一升土壤浸出液，用无菌吸管吸取1mL液样至盛有9mL无菌水的试管中，依次稀释10³稀释度．各取0.1mL已稀释10³倍的水样分别接种到三个培养基上培养，记录的菌落数分别为55、56、57，则每升原土壤浸出液样中菌体数为______．

   （2）要从长期使用该除草剂的土壤中分离目的菌，从用途方面来看，上述培养皿中培养基的特点是______．

   （3）接种技术的核心是______．在划线接种时，连续划线的目的是将聚集的菌种逐步______，培养时，只有很少菌落出现，大部分细菌在此培养基上不能生长的主要原因是______或有氧条件抑制了这些细菌的生长．

   （4）在培养基上形成的菌落中，无透明圈菌落利用的氮源主要是______，有透明圈菌落利用的氮源主要是______，据此可筛选出目的菌．实验结果如图显示的A～E五种菌株中，______是最理想菌株．