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            • 1.

              酿酒厂常用酸性脲酶去除酒精类饮品中的尿素,以改善酒精类饮品的品质。请回答下列问题:

              (1) 从土壤中筛选酸性脲酶生产菌,其培养基的主要成分有葡萄糖、尿素、琼脂等,从功能上分析,该培养基属于________培养基。该培养基的氮源来自_________。

              (2) 筛选和纯化酸性脲酶生产菌常用的两种接种方法是___________和_____________。配制浓度梯度为10-1的系列稀释液时,需用移液管将lmL菌液移入盛有____mL蒸馏水的试管中。

              (3) 对同一浓度的酸性脲酶生产菌稀释液,分别用血球计数板计数和稀释涂布平板法计数,若不存在实验误操作,则前者的数量___(多于/等于/小于)后者,其原因是________。

              (4) 若用海藻酸钠固定含酸性脲酶的细菌时,应将海藻酸钠溶液和细胞混合滴入溶液中。下表是不同浓度海藻酸钠形成的凝胶珠状况,从表中看出,海藻酸钠的浓度应选用__g/dL。若利用固定化酶技术,它的优点是___________________。

              海藻酸钠质量浓度(g/dL)

              凝胶强度

              凝胶气泡量

              成球难度

              凝珠形状

              1.0

              没有

              较易

              扁圆形

              2.0

              少量

              圆球形

              3.0

              较多

              稍难

              有托尾

              4.0

              大量

              难成球形

            • 2.

              请回答下列有关微生物培养与应用及物质提取的问题:

                 (1)培养微生物的培养基中,除了提供碳源、氮源、水和无机盐四种主要营养物质外,还需要满足微生物生长对___、特殊营养物质以及_____的要求。

                 (2)对接种环进行灭菌常用的方法是____________。

                 (3)从土壤中分离尿素分解菌,应向以尿素为唯一氮源的培养基中加入__________指示剂,尿素分解菌合成的_____将尿素分解成了____,它会使培养基的PH________从而使指示剂变______。

            • 3.

              培养微生物和利用微生物的发酵作用制作食品,在人类健康、社会经济生产等方面具有重要的意义。根据所学相关知识, 请回答下列有关微生物的一些问题:

              (1)微生物的分布:微生物主要分布在富含________的土壤表层。

              (2)微生物的消毒和灭菌:获得纯净培养物的关键是_______,静止空气中的细菌可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能损伤____________。

              (3)微生物的应用:由于封口不严,某瓶果酒放置一段时间后,发现带有明显的酸味,使果酒变酸的主要微生物是_______。

              (4)微生物接种与计数:若要检测所得果酒中活体酵母菌的密度时,一般采用_____________法,但此种方法中根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低最终计算得出菌体数目往往比实际的数目低,原因是___________________________________________。

              (5)微生物的鉴定:为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,常用的染色剂是________。将筛选获得的菌液稀释后接种到鉴别培养基上,然后挑选产生_________的菌落作为菌种进行扩大培养。为检测尿素分解菌的存在与否,在以尿素维唯一氮源的________(选择、鉴别)培养基中加入__________指示剂,如果存在尿素分解菌,则指示剂将变红色。

            • 4.

              尿素是一种重要的农业氮肥,不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的微生物将尿素分解后才能被植物吸收利用。因此,对土壤中分解尿素的微生物进行分离和鉴定具有重要意义。回答下列问题:

              成分

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO4·7H2O

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              含量

              1.4g

              2.1g

              0.2g

              10.0g

              1.0g

              15.0g

              (1)该培养基的葡萄糖为微生物的生长繁殖主要提供_________________。

              (2)该培养基可以选择出分解尿素的细菌,原因是_________________________________。

              (3)某同学用0.1ml的稀释涂布平板法测定一个土壤样品中的细菌数(取10克该土壤加90ml无菌水制成稀释液)。在对应稀释倍数为106的培养基中统计3个平板上的菌落数分别为:231、212、256,则每克该土壤样品中的菌落数为_______________。

              (4)若要对上述初步筛选出的分解尿素的微生物作进一步的鉴定,可以向培养基中加入__________________。若分离得到的是尿素分解菌,则培养基中pH升高,pH升高的原因是__________________________。

              (5)细菌的数目可以通过滤膜法来测定,例如测定饮用水中大肠杆菌的数目。将已知体积的水过滤后,将滤膜放在伊红美蓝培养基上培养,在该培养基上,大肠杆菌的菌落呈现__________,根据培养基菌落的数目,计算出水样中大肠杆菌的数量。

            • 5.

              研究人员为获得用于烟气脱硫的脱硫细菌,进行了如下操作。请回答下列问题:

              (1)取样与选择培养:在某热电厂烟囱周围区域采集土样,取样用的小铁铲和盛装土样的信封在使用前都需要________。选择培养的目的是增加________的浓度。 

              (2)驯化脱硫细菌:将目的菌转移到含少量无菌水的锥形瓶中,边搅拌边持续通入SO2气体,驯化几分钟后接种到固体培养基上,待长出菌落后再重复上述步骤,并逐步延长通SO2的时间,与此同时逐步降低培养基的pH。由此分离得到的脱硫细菌具有____________________和____________________的能力。 

              (3)培养、观察与应用:为获得大量的目的菌以用于生产,在培养过程中技术人员需连续取样进行计数,计数方法一般有稀释涂布平板法和____________法。当用前者进行计数时,培养基表面生长的一个菌落来源于样品稀释液中的____________,统计平板上的菌落数即可推测出样品中含有的活菌数目。通常情况下,用此计数方法统计的菌落数往往比活菌的实际数目__________。

              (4)土壤中分解尿素的微生物的分离与计数中,接种时每个稀释度下至少接种______组用于统计菌落数,一般选择菌落数为________的平板用于计数。

              (5)对分离分解尿素菌进一步鉴定需要在培养基中加入_________。

            • 6.

              下表为某培养基的配方,将已知体积的水涂在该培养基上,经过一段时间后,大肠杆菌的菌落呈现黑色,并具有金属光泽。据此回答下列问题:

              成分

              蛋白胨

              葡萄糖

              K2HPO4

              伊红

              美蓝

              蒸馏水

              含量

              10 g

              10 g

              2 g

              0.4 g

              0.065 g

              1 000 mL

              (1)从物理性质看,该培养基属于______。从功能看,该培养基属于_____________。培养基成分一般包括水、________、碳源、氮源和生长因子。

              (2)培养基用________方法灭菌,除上述方法外,培养皿还可以使用________方法灭菌。

              (3) 某同学在①、②、③三种条件下培养大肠杆菌,这三种条件是:

              ①以葡萄糖为碳源的培养基,不断补充培养基,及时去除代谢产物

              ②以葡萄糖为碳源的培养基,不断补充培养基,不去除代谢产物

              ③以葡萄糖和乳糖为碳源的培养基,不补充培养基,不去除代谢产物

              根据培养结果绘制的一段时间内菌体数的对数随时间变化的趋势图如下:

              假设三种培养基中初始总糖量相等,则①、②、③三种条件依次对应的趋势图是(  )

              A.甲、乙、丙      B.乙、丙、甲      C.丙、甲、乙         D.丙、乙、甲

              (4) 某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌,并统计每克土壤样品中活菌数目,培养基配方如下。将各种物质溶解后,用蒸馏水定容到1 000 mL,再经高温灭菌,制成固体培养基备用。

              KH2PO4

              Na2HPO4

              MgSO47H2O

              蛋白胨

              葡萄糖

              尿素

              琼脂

              1.4 g

              2.1 g

              0.2 g

              1.0 g

              10.0 g

              1.0 g

              15.0 g

              根据培养基的成分判断,该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌?________(填“能”或“不能”),原因是__________________________________。

            • 7.

              传统发酵技术和微生物分离、纯化过程中,无菌操作是微生物接种技术的关键。某实验小组欲从污水污染的污泥中筛选出脲酶细菌(脲酶可将尿素分解为氨)。回答下列问题:

              (1)配制培养基时各种成分在溶化后分装前一般需要先_______;平板冷却凝固后一般要_______放置,这样操作的目的是____________________。

              (2)在菌株筛选过程中,应将污泥样品稀释液接种于______________固体培养基上;并加入_________指示剂加以鉴别。平板划线法时在第二次及其后的划线操作时,总是从____________开始划线,原因是_______________________________ 

              (3)如何设计实验判断培养基是否被污染?_________________________________________________________

              (4)对于频繁使用的菌种,可以采用______的方法进行保藏,但该方法具有________________________缺点。

            • 8.

              请回答下列问题:

              (1)制作果醋和葡萄酒使用微生物在结构上有所不同,主要表现在前者____________________ 。果酒发酵后是否有酒精产生,可以用重铬酸钾溶液进行检验,酒精与重铬酸钾在酸性条件下反应呈______________色。制作果醋时,醋酸菌在___________和糖源都充足时,将糖分解成醋酸,在糖源不充足时,也可以利用__________生成醋酸。

              (2)腐乳制作过程中,豆腐发酵主要利用微生物产生的_____________________等,将豆腐中的营养物质分解成易于消化和吸收的小分子物质。

              (3)测定泡菜中亚硝酸盐含量的原理是在盐酸酸化条件下,亚硝酸盐对氨基苯磺酸发生_________________反应后,与N-l-萘基乙二胺盐酸盐结合形成________________染料。

              (4)从土壤中分离及筛选高效分解尿素的细菌时,首先要将选取的一定量的土壤溶解在无菌水中进行_____________后,才能够接种到培养基表面。   

              (5)生姜精油是传统的保健良方,调和在洗发露中,可去头风、止头痛。提取生姜精油的流程如下:植物体→生姜→油水混合物→初级精油→除水、过滤→生姜精油。提取生姜精油时,采用_______________法获得油水混合物,然后在其中加入___________试剂,分层后可获得初级精油。

            • 9.

              回答下列与微生物有关的问题:

              (1)在进行微生培养时,为了观察微生物的菌落特征,一般选用______(固体或液体)培养基;为了判断培养基是否成功灭菌,需要将________的培养基放在________培养。

              (2)为了从土壤中筛选出能降解尿素的菌株,需要用到__________的选择培养基。

              (3)为了鉴别纤维素分解菌和进一步纯化菌种,可以在培养基上加入__________染液,将筛选获得的菌液稀释后接种到________(从用途上分析)培养基,然后挑选出产生__________的菌落作为菌种进行扩大培养。

              (4)实验结束后,使用过的培养基应该________处理后才能倒掉。

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