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            • 1.

              I.如表所示配方的培养基可筛选某种细菌,该细菌可以在该培养基上生长,进而形成菌落.回答下列问题:


              KH2PO4

              1.4g

              Na2HPO4

              2.lg

              MgS04•7H2O

              0.2g

              葡萄糖

              10.0g

              尿素

              1.0g

              琼脂

              15g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容至1000mL



              (1)该培养基可筛选的细菌是______,判断的依据是______。
              (2)如果从土壤中获取的样本含该细菌的数量较少,需要对样本中的细菌进行扩大培养,请判断能否用表格中的培养基来扩大培养______(填“能”或“不能”),理由是__________________。

              (3)如果需要对该细菌进行计数,则应用______法接种.为了确定该细菌确实属于所要分离的细菌,需要在培养基中加入______指示剂。另一种接种细菌的常用方法是____________。该方法在操作时,每一次划线前都要进行灼烧,目的是________________________。


              II.叶绿体转基因技术是将外源基因整合到叶绿体基因组中,该技术能有效改良植物的品质。回答下列问题:

              (1)转基因技术的核心步骤是______。为获得较多的目的基因可采用______技术进行扩增,该技术的原理是_______________。

              (2)将植物体细胞用纤维素酶和果胶酶处理得到______,再将目的基因导入其中,最后通过______ 技术培养可得到相应的转基因幼苗。

              (3)对大多数高等植物而言,与传统的细胞核转基因相比,叶绿体转基因更稳定,其遗传方式______  (填“遵循”或“不遵循”)孟德尔遗传定律,不会随______(填“花粉”或“卵细胞”)传给后代,从而保持了母本的遗传特性。

              (4)来自原核生物中有重要价值的外源基因,无需改造和修饰就可在叶绿体中高效表达,原因是 _________________。

            • 2.

              为研究“某品牌酸奶中乳酸菌数量及其对抗生素耐药性情况”,某同学进行了如下实验:

              请分析回答下列问题:

              (1)配制的细菌培养基除了含有水、碳源、氮源和无机盐等主要营养成分外,还应加如适量的________和琼脂。在培养基各成分溶化与灭菌之间,要进行的操作是________。

              (2)接种微生物的方法有很多,图1中过程③所示的方法为________。用该方法统计样本菌落数时,同时需要做A、B、C三个培养皿,原因是________。用该方法统计样本菌落数后,

              所得数据需要乘以10n后,才可表示乳酸菌的数量(单位:个/ml),这里的n=________。

              (3)请完善“检测乳酸菌对青霉素、四环素耐药性”的实验操作步骤:

              步骤1:分别取________加入三组无菌培养皿中,再加入灭菌并冷却到________℃左右的培养基,立即混匀,静置凝固成平板。

              步骤2:向三组培养基中分别接种待检测的乳酸菌菌种。

              步骤3:将接种后的三组培养基和一个________都置于适宜温度等条件下培养一定时间,观察比较培养基中菌落生长情况。

            • 3.

              下列有关平板划线接种法的操作错误的是

              A.划线时要将最后一区的划线与第一区的划线相连
              B.将已冷却的接种环伸入菌液中蘸取一环菌液
              C.蘸取菌液和划线要在火焰旁进行
              D.将接种环放在火焰上灼烧
            • 4.

              .请回答下列与大肠杆菌有关的问题。

              (1)从生态系统的成分上看,大肠杆菌属于____它的同化作用类型是____。

              (2)下表是某公司研发的一种培养大肠杆菌菌群的培养基配方。

              成分

              含量

              蛋白胨

              10.0g

              乳糖

              5.0g

              蔗糖

              5.0g

              K2HPO4

              2.0g

              显色剂

              0.2g

              琼脂

              12.0g

              将上述物质溶解后,用蒸馏水定容到1000ml

              根据用途划分该培养基属于______ (选择、鉴别)培养基。该培养基中的碳源是_____。

              (3)在微生物培养操作过程中,为防止杂菌污染,需对培养基和培养皿进行____ (消毒、灭菌)操作者的双手需要进行清洗和_______。静止空气中的细茵可用紫外线杀灭,其原因是紫外线能使蛋白质变性,还能_______。培养大肠杆菌时,常用的接种方法是平板划线法和__________________。通常,对获得的纯菌种还可以依据菌落的形状、大小等菌落特征对细菌进行初步的________。培养大肠杆菌时,在接种前需要检测培养基是否被污染。对于固体培弃基应采用的检测方法是______________ 。若用大肠杆菌进行实验,使用过的培养基及其培养物必须经过____________处理后才能丢弃,以防止培养物的扩散。

              (4)以下微生物发酵生产特定产物时,所利用主要微生物的细胞结构与大肠杆菌相同的是________

              A、制作果酒     B、由果酒制作果醋    C、制作泡菜    D、制作腐乳

              (5)利用培养基不仅可以分离培养微生物,也可以进行植物组织培养。在植物组织培养的过程中,也要对外植体等进行一系列的消毒、灭菌,并且要求无菌操作,原因是_________

            • 5.

              分析回答下列有关微生物的问题。

              Ⅰ.下图是细菌纯化培养过程中划线接种的培养结果。图中在________(填图中编号)区域出现了单个菌落,产生每个菌落的最初细菌数目是________个细菌。据图分析,在培养基上划线接种时,划线的顺序依次是_________________(用编号表示)。

              Ⅱ.下表是某微生物培养基成分,据表回答下列问题。

              编号

              成分

              含量

              编号

              成分

              含量

              粉状硫

              10 g

              (NH4)2SO4

              0.4 g

              K2HPO4

              4 g

              MgSO4

              9.25 g

              FeSO4

              0.5 g

              CaCl2

              0.5 g

              H2O

              100 mL




              (1)上述培养基所培养微生物的同化作用类型是________,判断依据是____________。

              (2)若培养从土壤中分离出来的自生固氮菌,该培养基成分如何调整?___________________。依据是___________________________________________。

              (3)若表中培养基用于观察菌落形态,应增加的成分是________。

              Ⅲ.在充足的碳源、氮源、无机盐和水的条件下,某些微生物仍然不能正常生长,还需要在培养基中添加________。

            • 6.
              下列关于配制培养基的叙述,正确的是(  )
              A.制作固体培养基必须加入琼脂
              B.加入青霉素可得到放线菌
              C.培养自生固氮菌时不需要氮源
              D.发酵工程一般用半固体培养基
            • 7.

              有关倒平板的操作错误的是( )

              A.将灭菌的培养皿放置在火焰旁的桌面上
              B.使打开的锥形瓶瓶口迅速通过火焰
              C.将培养皿打开,培养皿盖倒放在桌子上
              D.等待培养基冷却凝固后需要将平板倒过来放置
            • 8. 在农业生产研究上,常常需要进行微生物的培养和计数.
              (1)如图是利用 ______ 法进行微生物接种,把聚集的菌种逐步 ______ 分散到培养基的表面.
              (2)分析下面培养基的配方:NaNO3、KH2PO4、NaH2PO4、MgSO4•7H2O、KCl、H2O.若此培养基用于培养分解尿素的细菌,则应除去上述 ______ 成分,并加入 ______ ,以补充 ______ 源.
              (3)三位同学用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中细菌数量.在对应稀释倍数为106培养基中,得到以下统计结果:甲同学涂布了两个平板,统计的菌落数是236和260,平均值248;乙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是210、240和250,取平均值233丙同学涂布了三个平板,统计的菌落数是21、212和256,取平均值163;在三位同学统计中,只有一位同学的统计是正确的,指出另两位同学的统计为什么不正确 ______ .
              (4)若在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为233,那么每毫升样中的菌落数是(涂布平板时所用稀释液的体积为0.2mL) ______ .
            • 9. 铜绿假单胞菌原称绿脓杆菌,为土壤中存在的最常见的细菌之一,也是当前医院炎症感染的主要病原菌之一.研究表明,铜绿假单胞菌的致病机制与其分泌的绿浓菌素等毒性因子密切相关,这些毒性因子的表达与其密度感知系统又有着紧密关联.有观点认为,铜绿假单胞菌发生耐药的机制之一便是通过QS系统形成一层生物膜来阻断抗菌药物的渗透、杀灭.
              (1)从细胞结构分析,铜绿假单胞菌与霉菌最本质的区别是:______.
              (2)为了从土壤中获取野生的铜绿假单胞菌,可以用适量的______配制一定量的土壤溶液,然后采用______法接种到______培养基(按功能分)上,再根据______特征进一步分离纯化,获得所需的目的菌种.
              (3)为了探讨喹诺酮药物环丙沙星(CIP)联合乳贴蛋白多肽嵌合体(LFchimera)对铜绿假单胞菌生物被膜表达(A590)和QS系统信号分子表达(A420)的影响,有人设计了不同的处理方案,比较各组实验菌株的定量生物膜表达(A590)及QS系统信号分子表达(A420)情况,结果如表2:
              表2:各组铜绿假单胞菌定量生物膜表达(A590)、QS系统信号分子表达(A120)的比较(x±s)
              注:[1]与对照组比较,P<0.05;[2]与高浓度LFchimera组比较,P<0.05;:[3]与联合组比较,P<0.05;P<0.05为差异有统计学意义
              ①采用统计软件对数据进行分析,所有实验均有3份且在不同时间进行3次重复实验,取其平均值,目的是______.
              ②分析以上实验结果可知:______的单独使用对铜绿假单胞菌生物被膜和QS系统信号分子表达(A420)均具有抑制作用,而______组对铜绿假单胞菌生物被膜表达和QS系统信号分子表达的抑制作用最强.
            • 10. 请回答下列与生物技术实践相关的问题:
              (1)利用纤维素解决能源问题的关键是高性能纤维素酶的获取.科学家利用培养基从土壤中筛选出能分解纤维素的细菌,这类细菌经过大量培养后可以从中提取纤维素酶.①土壤中富含各种微生物,将土壤浸出液接种到特定培养基上,可得到能分解纤维素的细菌,实验室中获取纯净菌种常用的接种方法有______和______. ②虽然各种培养基的具体配方不同,但一般都含有水、______.
              (2)酵母菌是一种真菌,可用于制作果酒.
              ①果汁发酵后是否产生酒精,可以用______来检验,在酸性条件下,该物质与酒精反应呈现______.
              ②葡萄汁装入发酵瓶时,要留有大约______空间,温度严格控制在______,时间控制在______左右.
              (3)提取DNA时,加入洗涤剂的作用是______.DNA在酒精中的溶解度相比蛋白质要______大或小)
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