在农业生产研究上，常常需要进行微生物的培养和计数。

(1) 下图是利用____________法进行微生物接种，把聚集的菌种逐步分散到培养基的表面。

 (2) 分析下面培养基的配方：NaNO₃、KH₂PO₄、NaH₂PO₄、MgSO₄•7H₂O、KCl、H₂O。若此培养基用于培养分解尿素的细菌，则应除去上述_______成分，并加入______物质，以补充______源。若用于培养纤维素分解菌，应加入________物质，为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入_______染料，含纤维素分解菌将形成__________圈。

如下图为微生物的实验培养和纯化醋酸菌的部分操作步骤。请回答下列问题：

（1）微生物生长繁殖所需的主要营养物质有无机盐、水、________四类。①是制备培养基时________中的主要操作，该操作需使锥形瓶的瓶口通过火焰，目的是通过灼烧灭菌防止瓶口的微生物污染培养基，实验操作中的灭菌方法还有_________。

（2）该纯化醋酸菌的接种方法是______________；完成步骤④的操作，接种共需要________次灼烧处理。如果需要统计醋酸菌液中活菌的数目可以采用______________法进行接种；培养过程中，常选择菌落数在__________的平板统计计数。

（3）食草动物能够消化食物的关键是体内存在能合成__________酶的微生物能够降解纤维素，该酶是一种复合酶，它至少包括__________________。为检测纤维素分解菌的存在与否，还应加入__________染料，形成________色复合物，若产生__________，则证明有纤维素分解菌存在。

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(1)本研究构建重组质粒时可选用四种限制酶，其识别序列如图所示。为防止酶切片段的自身连接，可选用的限制酶组合是________或________。

A．①②　　B．①③　　C．②④　　D．③④

(2)设置菌株Ⅰ为对照，是为了验证__________________不携带纤维素酶基因。

(3)纤维素酶基因的表达包括________和________过程。与菌株Ⅱ相比，在菌株Ⅲ、Ⅳ中参与纤维素酶合成和分泌的细胞器还有________________。

(4)在以纤维素为唯一碳源的培养基上分别培养菌株Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ，菌株________不能存活，原因是____________________________________________________。

(5)在利用纤维素生产酒精时，菌株Ⅳ更具优势，因为导入的重组质粒含有__________，使分泌的纤维素酶固定于细胞壁，减少因培养液更新而造成的酶的流失，提高酶的利用率。

棉花、木材以及作物秸秆中富含纤维素，有些微生物能合成纤维素酶，通过对这些微生物的研究，人们能够利用纤维素酶处理上述原料以获得高档服装面料。研究人员用化合物A、硝酸盐、磷酸盐以及微量元素配制的培养基，成功地筛选到能产生纤维素酶的微生物。分析回答问题。

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（1）具有纤维素酶是这些微生物能够分解纤维素的原因，一般认为纤维素酶至少包含_______________________________三种酶，其中_________酶能够将纤维二糖分解成葡萄糖。

（2）培养基中加入的化合物A是________，为微生物的生长提供_________，这种培养基从功能上看属于____培养基。

（3）在筛选纤维素分解菌的过程中，通常用__________染色法，这种方法能够通过颜色反应直接对纤维素分解菌进行筛选。某同学在实验时得到了如图所示的结果，则纤维素分解菌位于_______内。

植物秸秆中的纤维素可被某些微生物分解，回答下列问题：

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中葡萄糖苷酶可将______分解成_________。

（2）在含纤维素的培养基中加入刚果红（CR）时，CR可与纤维素形成______色复合物。用含有CR的该种培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心__________的。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养（成分见下表）：

据表判断，培养基甲__________（填“能”或“不能”）用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是__________；培养基乙________(填"能"或"不能")用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是____________。

农业生产上有一种广泛使用的除草剂在土壤中不易被降解，长期使用会污染土壤。为修复被污染的土壤，可按图示程序选育出能降解该除草剂的细菌。已知该除草剂（含氮有机物）在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。请分析回答：_______________

（1）获得纯净培养物的关键是___________________________。

（2）在选育过程中，应将土壤浸出液接种于_______________________选择培养基上。接种前需要对培养基应进行______________灭菌。通过比较单菌落周围___________的大小，可筛选出高效的目的菌株。实验结果如图显示的A～E五种菌株中，___________是最理想的菌株。_______________

（3）若想对初步筛选得到的目的菌进行纯化并计数，可采用的接种方法是________________。培养过程中，常选择菌落数在________________区间的平板统计计数。________________

（4）纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少包括___________________三种组分，_____________纤维素最终被水解成________________ 。 

（5）分离分解尿素的细菌时，需要在培养基中加入______________指示剂作进一步的鉴定。

纤维素是自然界中分布最广、蕴藏最多的一种天然可再生聚合体。自然界纤维素年产量超过10¹¹ t，按能量换算约等于7×10¹¹ t石油，而且纤维素无污染可再生。纤维素酶对纤维素的开发利用具有特别重要的意义，已成为国内外研究的热点。白蚁是自然界中纤维素的主要降解者，年均消耗纤维素约7×10⁸ t。白蚁消化道特别是中、后肠共生的微生物包括原生动物、细菌和真菌能分泌纤维素酶，是白蚁能降解纤维素的主要原因。下图是某生物兴趣小组从白蚁肠道分离能降解纤维素的细菌的流程图，请回答相关问题。

（1）培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、。本实验用以纤维素为唯一碳源的选择培养基进行选择培养的目的是；制备培养基过程中，各成分按一定比例配制好后将PH调至，然后灭菌15-30min，冷却倒置备用。平板倒置目的是。灭菌是指使用，包括芽孢和孢子。

（2）取适量后肠样液涂布到加入染料的含有纤维素的培养基上，等培养基上长出菌落后，选择周围有明显的菌落进一步研究。

（1）腐乳的制作过程中发挥作用的主要微生物合成脂肪酶的场所是         。各地腐乳风味迥异，在原料和菌种相同时，可通过                                           制作出不同风味的腐乳。

（2）制作泡菜过程中亚硝酸盐的含量变化趋势是                        。

（3）植物花药离体培养产生花药植株时，选材非常重要。对某些不易着色的花粉细胞核，采用的染色方法是                       。

（4）无菌技术中，获得纯净培养物的关键是                                     。

（5）能使纤维素分解成纤维二糖的酶是                             。

（1）分解秸秆中纤维素的微生物能分泌纤维素酶，该酶是由3种组分组成的复合酶，其中的葡萄糖苷酶可将           分解成           。

（2）在含纤维素的培养基中加入               ，该染料可与纤维素形成红色复合物。用含有该染料的培养基培养纤维素分解菌时，培养基上会出现以该菌的菌落为中心的                  。

（3）为从富含纤维素的土壤中分离获得纤维素分解菌的单菌落，某同学设计了甲、乙两种培养基（成分见下表)：

注：“+”表示有，“-”表示无。

据表判断，培养基甲         〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是                                          ；培养基乙      〔填“能”或“不能”〕用于分离和鉴别纤维素分解菌，原因是                                                         。