(1)与大肠杆菌相比，嗜热菌DNA碱基组成的特点是                          。

(2)Ⅰ号、Ⅱ号培养基的配制主要包括如下步骤:a.溶化，b.调pH，c.灭菌，d.称量。正确的操作步骤顺序是                 。溶化过程中当琼脂完全熔化后，还需用蒸馏水                 。

(3)将配制好的培养基放入高压蒸汽灭菌锅内，加盖并将排气管插入内层灭菌桶内的排气槽内。拧紧固定盖子的螺栓时，应注意                ，以免漏气。

(4)1号培养基中以淀粉为唯一碳源，从功能上讲该培养基属于                 。待菌落长出后，应选择                 的菌落接种到Ⅱ号培养基，第二次及以后的划线，总是从                 开始，实验中过程③的目的是                 。

(5)若要保证高温淀粉酶的活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则最好选择图2中的                 固定化工艺(填图中字母）。

高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。研究者从热泉中筛选了高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如下图所示，请据图回答有关问题：

（1）过程①②合称为______________________。从功能上看，Ⅰ号培养基属于____________；该培养基中必须以_______作为唯一碳源。 Ⅱ号培养基的接种方法为___________________。

（2）对配制的培养基采用的灭菌方法是__________________________________。

（3）在1号培养基上挑出能产生淀粉酶的嗜热菌菌落的鉴别方法是培养基上会出现以该菌的菌落为中心的______________；也可将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，看到如下图所示情况，可判断图中周围___

_________的菌落含有所需菌种。

（4）如果高温淀粉酶的产业化需要其活性在固定化处理时不受损失，且在多次重复使用后仍能维持稳定的酶活性，则应选择下图中的______（填写字母）固定化工艺。

酵母菌是日常生产和生活中应用极其广泛的一种微生物。下图是有关酵母菌的实验操作。请据图回答：

（1）实验中试管用滤膜封口，其目的是         ，A、C过程所采用的接种方法分别是         ，           。

（2）E过程利用血球计数板制片时，操作步骤是           ，多余的培养液用滤纸吸去。

（3）G过程利用酵母菌进行果酒制作，为适当提高果酒的生产速率，进气口应      ，酵母菌产生果酒的原理是                 （写化学反应式）。

（4）H过程进行酵母细胞固定化的方法是           ，在用注射器将海藻酸钠和酵母细胞的混合液滴加到X溶液中时，应注意控制好             

樱桃番茄富含多种天然有机酸、人体必需氨基酸、维生素和多种矿物质，但因其含糖量不高，影响酒精发酵效果，经实践摸索，调整发酵工艺，樱桃番茄成为酿造保健酒的好原料。下图1是利用固定化酵母或游离酵母发酵樱桃番茄果酒的工艺流程，请分析回答：

(1)主发酵结束后，需将上层酒液转移到另一灭菌容器中进行后发酵，为了防止醋酸菌污染，加入容器中液体的量应______(填“注满”、“2/3”或填“1/3”)，以保证果酒品质。

(2)图2是固定化酵母发酵与游离酵母发酵的对比结果，从图中可以看出，两者发酵速率相近，但发酵前期游离发酵比固定发酵产生的酒精量多，主要原因是________________；后期游离酵母发酵速度减慢，除了底物浓度降低外，还可能是因为_______________。

(3)为探究固定化酵母重复使用的效果，对固定化酵母进行了2次连续的重复发酵实验，图3是实验的结果，试分析在第2次发酵前期，酵母降糖速度明显加快的原因___________。实验结果说明固定化细胞具有_________________的优点。

(4)用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞,溶解海藻酸钠时最好采用________的方法,以防发生焦糊。溶化好的海藻酸钠溶液应__________后,再与已活化的酵母细胞充分混合。若海藻酸钠浓度过低,会导致__________________,固定效果大大降低。

(5)为分离纯化优良酵母菌品种，采用平板划线法进行如下操作，排序最合理的是________。

A. ②①④③  　　B. ②①④①③②  　　C. ②①④②③②  　　D. ①④①③②

回答下列(一)、(二)小题：

    (一)酶是生物体中生化反应的催化剂，在工业生产和食品加工中的应用日益广泛。为提高酶的利用率以及提高产品的纯度，一般需要对酶进行固定化处理：即将酶用物理或化学方法固定在______介质上，具体方法有______法、共价偶联法、包埋法和交联法等。

    如图为装有固定化酶a的实验装置，其中b是反应柱，c是催化底物。

​

    ①若装置中的固定化酶为α—淀粉酶，利用该装置进行淀粉水解实验时，在漏斗中加入反应液后的操作是______________________，以保证反应充分。对流出的液体用______检测，若呈现______色，说明淀粉被水解成糊精。

    ②若a是固定化酵母，要想得到较多的酒精，加入反应液后的操作是______________________；装置中的长导管起的作用是____________________________。

    (二)兔肝细胞中的基因E编码代谢甲醛的酶，现拟利用基因工程技术将基因E转入矮牵牛中，以提高矮牵牛对甲醛的代谢能力，请回答：

    (1)从兔肝细胞中提取mRNA，在______酶的作用下形成互补DNA，然后以此DNA为模板扩增得到基因E。在相关酶的作用下，将基因E与Ti质粒连接在一起，形成______，再导入用氯化钙处理的______，用此农杆菌侵染矮牵牛叶片。将被侵染的叶片除菌后进行培养，最终得到转基因矮牵牛。其中培养过程正确的是______(A．叶片在含适宜浓度生长素的培养基上分化形成愈伤组织  B．愈伤组织在含细胞分裂素和生长素配比较高的培养基上形成芽  C．再生的芽在细胞分裂素含量较高的培养基上生根  D．愈伤组织在含适宜浓度植物生长调节剂的培养基上脱分化形成再生植株)。

    (2)取转基因矮牵牛叶片，放入含MS液体培养基和适宜浓度甲醛且密封的试管中。将试管置于______上，进行液体悬浮培养液。一段时间后测定培养基中甲醛的含量，以判断基因E是否在转基因矮牵牛中正常表达。培养过程中液体培养基的作用：一是提供营养；二是______________________________________________，从而使叶片保持正常的形态。

科研人员利用固定化酵母直接发酵甜菜汁生产燃料乙醇，下图1表示相关的工艺流程，图2为不同固定化酵母接种量对发酵的影响。请分析回答：

（1）图1的步骤①中，溶化海藻酸钠时要注意               ，步骤②中加入果胶酶的作用是              。步骤③中进行增殖培养的目的是                 。

（2）图1的步骤④体现了固定化酵母              的优点。研究表明使用固定化酵母的酒精产量平均值高于游离酵母的对照组，可能的原因是           。

（3）由图2可知，固定化酵母接种量为                  时酒精产量最高。接种量过高，酒精产量反而有所降低的原因是                。

（4）研究表明，固定化酵母更适于甜菜糖液的发酵环境，由此可以通过                的方法来提高固定化酵母对发酵糖液的耐受性，从而达到提高发酵效率的目的。

回答下列(一)、(二)小题：

    (一)回答固定化酶有关问题

    (1)制备固定化α－淀粉酶的过程中，将α－淀粉酶固定在石英砂上的方法是______，一定浓度的淀粉溶液经过______后，可使淀粉水解为______，遇碘显______色，此实验最适温度为______。

    (2)关于固定化酶中的酶说法正确的是______。

    A．酶的种类多样性，可催化一系列的酶促反应

    B．酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用

    C．酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用下去

    D．固定化酶由于被固定在载体上，所以丧失了酶的高效性和专一性特点

    (二)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

    据图回答：

    (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用___________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行。

    (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______(填字母)。

      A．amp^R    B．启动子    C．终止子    D．复制原点

    (3)过程①可采用的操作方法是______(填字母)。

    A．农杆菌转化    B．显微注射    C．大肠杆菌转化    D．细胞融合

    (4)过程②采用的生物技术是_____________。

    (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的______性。

    (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用______(填字母)技术。

    A．核酸分子杂交    B．基因序列分析    C．PCR D．抗原一抗体杂交

（1）与利用游离酵母生产啤酒相比，利用固定化酵母的优点有  ▲   。

（2）本实验结果表明，随氯化钙浓度中增大，凝胶珠机械强度增大，完整率   ▲   。

（3）结合发酵性能分析，制备凝胶珠适宜的氯化钙浓度为   ▲   。当氯化钙浓度过高时，发酵液中的糖度升高，酒精度下降，发酵受到影响，原因是   ▲   。

（4）用海藻酸钠作载体包埋酵母细胞，溶解海藻酸钠时最好采用   ▲   的方法，以防发生焦糊。溶化好的海藻酸钠溶液应   ▲   后，再与已活化的酵母细胞充分混合 。若海藻酸钠浓度过低，会导致   ▲   ，固定效果大大降低。

表：海藻睃钠浓度对乳酸发酵的影响

（1）本研究中固定化细胞的技术属于____________法，其优点是____________。

（2）用海藻酸钠作载体包埋乳酸菌，溶解海藻酸钠时最好采用____________的方法，以防发生焦糊。溶化好的海藻酸钠溶液应冷却至____________后，才能加入乳酸菌。为保证配制的海藻酸钠浓度准确，在海藻酸钠完全溶化后需要加____________定容。

（3）根据实验结果，研究人员认为海藻酸钠浓度以____________为宜。而与浓度为1.0%比较，1.5%时形成的凝胶珠___________，有利于凝胶珠的重复利用。

（4）利用固定化乳酸菌发酵时，凝胶珠添加量过高会抑制菌株生长，进而使乳酸产量下降。试写出探究凝胶珠适宜添加量的实验思路。

(1)图1中X溶液为________，其作用是使_______________________________________。

(2)图1中制备的凝胶珠用________洗涤后再转移到图2装置中。图2发酵过程中搅拌的目的是使____________。

(3)在用海藻酸钠包埋酵母菌形成凝胶珠的过程中，加热溶解海藻酸钠时需注意用________________加热，然后将溶化好的海藻酸钠溶液________________后，加入酵母菌充分搅拌混合均匀。

(4)研究发现，固定化强度强的酵母颗粒发酵效果好，且稳定性高、使用寿命长。某机构利用上述装置，将2%、2.5%、3%的海藻酸钠分别利用2%、3%、4%的X溶液进行凝胶化处理，所得到的固定化酵母颗粒的强度及在28 ℃下发酵48 h后的酒精产量见下表：

依照表格分析，随着X溶液浓度的增加，__________增加；用于酒精发酵效果最好的海藻酸钠与X溶液浓度分别是____________、____________。