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            • 1. 下列有关PCR过程的叙述正确的是(  )
              A.变性过程中破坏的是DNA分子内磷酸二酯键
              B.延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
              C.复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
              D.PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度相同
            • 2.    多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。PCR过程一般经历下述三十多次循环:95℃下使模板DNA变性、解链→55℃下复性(引物与DNA模板链结合)→72℃下引物链延伸(形成新的脱氧核苷酸链)。下列有关PCR过程的叙述中不正确的是:(  )
              A. 变性过程中破坏的是DNA分子内碱基对之间的氢键,也可利用解旋酶实现
              B. 复性过程中引物与DNA模板链的结合是依靠碱基互补配对原则完成
              C. 延伸过程中需要DNA聚合酶、ATP、四种核糖核苷酸
              D. PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高
            • 3. 下列对“克隆”概念认识的叙述,不正确的是(  )
              A.由单个细菌长成菌落,属于个体水平克隆
              B.PCR技术属于分子水平克隆
              C.植物组织培养技术也属于克隆技术
              D.淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞属于细胞水平克隆
            • 4.

              豆科植物细胞壁中含有大量不能被猪消化的甘露聚糖。研究人员通过基因工程等技术培育出转甘露聚糖酶基因(manA)猪,主要流程如下图,图中PSP为猪唾液腺分泌蛋白基因启动子,neo为新霉素抗性基因。请回答下列问题:

              (1)该培养过程涉及多种现代生物工程技术,属于分子水平的是___________,其原理是______________________。

              (2)PCR过程中,除了要加DNA模板以外,还需加________ 和________,以及所需的酶是_________。温度降低到55℃的目的是__________。

              (3)PSP是______________识别和结合的部位,步骤②中选择将manA基因插入PSP后面的目的是___________________。

              (4)若要获得大量的卵母细胞需要对成年母猪采用___________法以获得大量的卵细胞。

              (5)进行早期胚胎培养时,通常将其置于通入混合气体的培养箱中培养,其中CO2的主要作用是____________________;另外,需定期更换培养液,目的是___________________。

              (6)步骤⑥中,通常选择发育到______________阶段的胚胎成功率较高。

              (7)与饲养普通猪相比,饲养转基因猪的优势是____________________________。

            • 5. 下列关于基因工程技术的叙述,正确的是( )
              A.切割质粒的限制性核酸内切酶均特异性地识别6个核苷酸序列
              B.PCR反应中温度的周期性改变是为了DNA聚合酶催化不同的反应
              C.载体质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因
              D.抗虫基因即使成功地插入到植物细胞染色体上也未必能正常表达
            • 6.

              下列有关PCR技术的叙述正确的是( )

              A.作为模板的DNA序列不能在每一次扩增中重复使用

              B.作为引物的脱氧核苷酸序列不能在每次扩增中重复使用

              C.反应需要的DNA聚合酶不能在每次扩增中重复使用

              D.反应需要的DNA连接酶不能在每次扩增中重复使用
            • 7.

              根据下列实验操作及结果得出的结论中,正确的是( )

              编号

              实验操作及结果

              结论

              用光学显微镜直接观察人口腔上皮细胞时,未观察到线粒体

              人口腔上皮细胞不含线粒体

              一定浓度的过氧化氢溶液在90 ℃水浴加热下,产生气泡的速率大于常温下

              加热可加快过氧化氢的分解

              某生物组织样液中加入斐林试剂后直接观察,未产生砖红色沉淀

              该生物组织不含还原性糖

              利用PCR技术扩增某目的基因,扩增产物中加入二苯胺试剂后加热变蓝

              扩增产物含有该目的基因

               


              A.①       
              B.②       
              C.③       
              D.④
            • 8. 为生产具有特定性能的α-淀粉酶,研究人员从某种海洋细菌中克隆了α-淀粉酶基因(1656个碱基对),利用基因工程大量制备α-淀粉酶,实验流程见下图。请回答下列问题:

              (1)利用PCR技术扩增α-淀粉酶基因前,需先获得细菌的______。
              (2)为了便于扩增的DNA片段与表达载体连接,需在引物的______端加上限制性酶切位点,且常在两条引物上设计加入不同的限制性酶切位点,主要目的是______。
              (3)进行扩增时,反应的温度和时间需根据具体情况进行设定,下列选项中______的设定引物有关,______的设定与扩增片段的长度有关。(填序号)
              ①变性温度②退火温度   ③延伸温度④变性时间⑤退火时间   ⑥延伸时间
               (4)下图表示筛选获得的工程菌中编码α-淀粉酶的mRNA的部分碱基序列:

              图中虚线框内mRNA片段包含______个密码子,如虚线框后的序列未知,预测虚线框后的第一个密码子最多有______种。
              (5)获得工程菌表达的α-淀粉酶后,为探究影响酶活性的因素,以浓度为1%的可溶性淀粉为底物测定酶活性,结果如下:

              缓冲液

              50mmol/L Na2HPO4-KH2PO4

              50mmol/L Tris-HCl

              50mmol/L Gly-NaOH

              pH

              6.0

              6.5

              7.0

              7.5

              7.5

              8.0

              8.5

              9.0

              9.0

              9.5

              10.0

              10.5

              酶相对活性%

              25.4

              40.2

              49.8

              63.2

              70.1

              95.5

              99.5

              85.3

              68.1

              63.7

              41.5

              20.8

              根据上述实验结果,初步判断该α-淀粉酶活性最高的条件为_________________。

            • 9.

              嗜热菌可以生活在98 ℃的高温环境中,研究发现其耐热性与基因H的表达产物有关。下图表示某研究小组利用大肠杆菌对H基因实行的克隆和表达过程,其中NdeⅠ、EcoRⅠ、HindⅢ、SalⅠ四种限制酶的识别序列和酶切位点分别为CATATG、GAATTC、AAGCTT、GTCGAC。请分析回答:



              (1) 图中的结构A是__________,其主要作用是提供_______________特异性识别结合位点,驱动基因转录。一个完整的基因表达载体的组成,除了质粒1中所示结构以外,还应该含有______________。

              (2) 用图中质粒1和H基因构建重组质粒,应选用__________两种限制酶进行切割

              (3) 将重组质粒导入大肠杆菌细胞之前,一般需先用______溶液处理大肠杆菌,以便将基因表达载体导入细胞。重组质粒导入大肠杆菌后H基因的表达效率很低,但在含有质粒2(辅助性质粒)的细胞中,H基因可以高效表达。为了筛选出转入了两种质粒的受体菌,应在筛选平板培养基中添加__________,整个实验过程应保持____________操作。

              (4) PCR反应中引物的设计非常关键,据图分析,扩增H基因时应选择的一对引物是________。

              A. 引物Ⅰ:…GGGAATTC…;引物Ⅱ:…CTCATATG…

              B. 引物Ⅰ:…GAATTCCC…;引物Ⅱ:…CATATGAG…

              C. 引物Ⅰ:…GGAAGCTT…;引物Ⅱ:…AAGCTTCC…

              D. 引物Ⅰ:…CTCATATG…;引物Ⅱ:…AAGCTTAAGCTT…

            • 10. 下图表示利用基因工程培育抗虫棉的过程,请据图回答下列问题。

              (1) 若限制酶Ⅰ的识别序列和切点是—GATC—,限制酶Ⅱ的识别序列和切点是—GGATCC—,那么在①过程中,应用限制酶             切割质粒,用限制酶            切割抗虫基因。①过程在         (填“体内”或“体外”)进行。

              (2) 通过②过程得到的大肠杆菌涂布在含有              的培养基上,若大肠杆菌能够生长说明已导入了普通质粒或重组质粒,反之则说明没有导入。

              (3) 为在短时间内大量获得目的基因,可用                技术进行扩增,其原理是                 

              (4) ⑤过程所用技术称为                  ,从遗传学角度来看,根本原因是根细胞具有                     

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