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            • 1. 某研究小组利用抗病毒基因(A+)和抗冻基因 (B+)作为目的基因,通过转基因技术分别获得了目的基因整合于1条染色体上的抗病毒番茄(甲)和抗冻番茄(乙)各1株,请回答以下问题:(注:番茄为二倍体,正常番茄基因型记为A-A-B-B-
              (1)转基因番茄的培育中需要用到的工具酶是 ______
              (2)为探究两株番茄中含抗病毒基因的染色体和抗冻蛋白基因的染色体是否互为同源染色体(不考虑交叉互换、染色体变异),研究人员将甲与乙进行杂交,则F1的表现型有 ______ 种,从中选取表现型为 ______ 的番茄进行自交,获得F2
              若F2的表现型分离比为 ______ ,含抗病毒基因的染色体和抗冻蛋白基因的染色体互为同源染色体;
              若F2的表现型分离比为 ______ ,含抗病毒基因的染色体和抗冻蛋白基因的染色体互为非同源染色体;
              (3)若已证明含抗病毒基因的染色体和抗冻蛋白基因的染色体互为非同源染色体源,为快速获得稳定遗传的抗病毒抗冻番茄,可从上述F2中选出合适个体(丙、丁)分析A+和 B+基因的表达产物,并与甲、乙的A+和B+基因的表达产物进行对比,从而找出能稳定遗传的番茄自交留种,分析结果如图所示.不考虑其他基因对A+和 B+基因表达产物量的影响,推测番茄丙的基因型是 ______ ,理论上番茄丁在F2中占的比例是 ______
            • 2. 请回答下列与生物工程相关的问题:
              (1)将基因表达载体导入农杆菌中的Ti质粒上的T-DNA上的原因是 ______ .通过农杆菌的转化作用,使抗盐基因插入到马铃薯细胞中的染色体DNA上,从而使抗盐基因的遗传特性得以 ______
              (2)用DNA连接酶把被限制酶I(识别序列和切点是-↓GATC-)切割得到的运载体和被限制酶II(识别序列和切点是-G↓GATCC-)切割得到的目的基因连接起来后,该重组DNA分子的新连接处能够再被限制酶II切割开的概率是 ______
              (3)胚胎分割操作过程需要特别注意的问题是:将囊胚的内细胞团进行均等分割,否则会影响分割后 ______
              (4)体外培养动物细胞需要满足以下条件: ______ 、添加了血浆(或“血清”)的培养基、适宜温度与pH、 ______ 的气体环境等.
              (5)对于转基因生物,公众在 ______ ______ ______ 方面产生了争议.
              (6)湿地具有蓄洪防旱、调节区域气候等功能,这体现了生物多样性的 ______ 价值.依据生态工程的 ______ 原理,鄱阳湖自然保护区的建立需考虑周边的经济发展等相关问题.
            • 3.

              回答下列关于微生物的问题。

              1982年澳大利亚学者从胃活检组织中分离出幽门螺杆菌。幽门螺杆菌是栖息在胃粘膜的螺旋状短杆菌,具有强的脲酶活性,是慢性活动性胃炎、消化性溃疡和胃癌的主要致病原因。

              (1) 下列关于幽门螺杆菌的说法中,正确的是( )(多选)

                A.为古细菌,因为其能生活在酸性环境下

                B.储存其遗传物质的主要场所是拟核,该菌含有质粒,可以为基因工程提供载体

                C.该菌合成和加工脲酶所涉及的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体等

                D.该菌对青霉素、利福平敏感  

               下表是某培养基的配方:

              成分

              葡萄糖

              KH2PO4

              MgSO4

              NaCl

              CaSO4

              CaCO3

              琼脂

              蒸馏水

              含量

              10g

              0.2g

              0.2g

              0.2g

              0.2g

              5g

              3.5g

              1L


              (2) 用            法将幽门螺杆菌接种到pH适宜的该培养基中,置于37℃下培养一段时间后,在该培养基中幽门螺杆菌的数目比刚接种时       ,主要原因是:                      。 (3) 幽门螺杆菌的传染力很强,可通过手、不洁食物、不洁餐具、粪便等途径传染,涉及传染病传播途径中的( )(多选)

               A.空气传播     B.接触传播     C.媒介物传播     D.病媒传播

            • 4.

              [生物——选修1:生物技术实践]

              将没有吃完的西瓜盖上保鲜膜后放入冰箱,是很多人日常储藏西瓜的办法。但事实上,有时候盖上保鲜膜储藏的西瓜中的细菌种类和数目反而比没用保鲜膜的多。某生物研究小组用保鲜膜保存三天的西瓜表面的瓜瓤制备浸出液,研究细菌的种类和数量。请回答下列问题:

              (1)该研究小组需配制用于培养微生物的培养基,配制的培养基一般都含有水、碳源、________和________。一般采用________法对培养基进行灭菌。

              (2)为了避免培养基污染,在培养过程中,需将平板________(填“正置”或“倒置”)。为了观察浸出液中微生物的种类和数量,采用________法接种。接种时,为了避免环境中微生物的污染,实验操作应在________附近进行。

              (3)在培养20小时后,观察到平板上有形态和颜色不同的菌落,说明西瓜的浸出液中有________(填“一种”或“多种”)细菌。细菌总数越多,说明西瓜被细菌污染的程度越________(填“高”或“低”)。


              [生物——选修3:现代生物科技专题]

              多不饱和脂肪酸需要从膳食中摄取,人体不能直接合成。科学家通过转基因手段将ω-6脂肪酸脱氢酶基因(FAT1)整合到肉牛基因组,以期提高肉牛体内的多不饱和脂肪酸含量,促进人体健康。请回答下列问题:

              (1)将ω-6脂肪酸脱氧酶基因导入肉牛细胞中常用的方法是________,在用PCR技术扩增目的基因时,需要的条件主要有扩增缓冲液、模板DNA、4种原料、________和________。

              (2)体外受精获得受精卵时,将优良公牛的精子收集后放在一定浓度的肝素溶液中进行培养,其目的是________。

              (3)胚胎移植前可选择发育良好、形态正常的________(填胚胎发育时期)进行________,以实现同卵多胎。

              (4)该转基因牛还可以用核移植的方法繁殖,用核移植的方法得到的动物称为________,用于核移植的供体细胞一般选择10代以内的细胞,目的是保持细胞正常的________。

            • 5. 微生物与基因工程:
              以下是以大肠杆菌为材料的实验.下表是大肠杆菌培养基的配方.
              成分 蛋白胨 牛肉膏 NaCl 蒸馏水 pH
              含量 10g 5g 10g 1000ml 7.0
              (1)表中各项成分中,能承担生长因子作用的是 ______ 能提供氮源的是 ______
              利用转基因技术可以生产出更多廉价的胰岛素.如图为转基因实验过程示意图,其中中数字表示相应过程.
              天然大肠杆菌质粒一般含有lacZ基因而不含氨苄青霉素抗性基因;人工合成的大肠杆菌puc118质粒中含有lacZ基因外,还含有含氨苄青霉素抗性基因.

              若lacZ基因完整,便可表达出β-半乳糖苷酶,β-半乳糖苷酶能将培养基中含有的IPTG和X-gal水解成蓝色,形成蓝色菌落圈;若lacZ基因中插入了外源基因,带有puc118质粒的大肠杆菌便不能表达β-半乳糖苷酶,将形成白色菌落.此实验方法可以用于鉴别转基因实验是否获得成功.
              (2)目的基因是 ______
              (3)过程①②一般需要能产生 ______ 的限制性内切酶;过程③④需要 ______
              (4)用于目的基因受体的大肠杆菌质粒应选择不含氨苄青霉素抗性基因,原因是 ______
              (5)图中的培养基中除含有大肠杆菌必需营养成分外,还应加入 ______ 等物质,用以筛选导入了重组质粒的受体大肠杆菌.
              (6)将上述处理后的大肠杆菌置于图中培养皿内培养,为保证获得单个菌落,常用的接种方法是 ______
              (7)以检测受体大肠杆菌是否导入重组质粒.培养一段时间后出现三种类型:菌落处有蓝色、菌落处有白色、菌落不能生长.
              成功导入重组质粒的菌落圈的表现是 ______
              那些在培养基中不能生长的原因是 ______
            • 6.

              A.[生物——选修1:生物技术实践]

              请回答下列有关传统发酵技术在食品工业上应用的问题:

              (1)果酒的制作过程中,常用的菌种是________。果醋制作过程中持续通入氧气的原因是________。

              (2)检测酒精常用的试剂是重铬酸钾,其原理是在酸性条件下酒精能够使重铬酸钾呈________色。

              (3)腐乳的制作过程中发挥作用的酶主要是________。豆腐块要加盐腌制,因为加盐可以抑制微生物的生长,原因是________。

              腐乳制作完成后再封装时要将瓶口通过酒精灯的火焰,目的是________。

              B.[生物——选修3:现代生物科技专题]

              1998年我国培育出首只转基因羊,该转基因羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白,人凝血因子IX蛋白是治疗血友病的药物。请回答下列问题:

              (1)生产转基因羊的过程中,最核心的步骤是________,为了在羊的乳汁中表达出人凝血因子IX蛋白,应将人凝血因子IX蛋白基因和________连接在一起。和目的基因紧邻的另一端还应含有________。

              (2)重组DNA分子上标记基因的作用是________。要检测目的基因是否插入动物细胞的DNA上,常用的方法是________,原理是________。

              (3)可利用胚胎分割技术获得多只转基因羊,当对囊胚期的胚胎分割时应注意________,目的是________。

            • 7.

              科学家通过利用PCR定点突变技术改造Rubisco酶基因,提高了光合作用过程中Rubisco酶基因对CO2的亲和力,从而显著提高了植物的光合作用速率。请回答下列问题:

              (1)PCR过程所依据的原理是                           ,该过程需要加入的酶是          。利用PCR技术扩增目的基因的前提是要有一段已知目的基因的核苷酸序列,以便根据这一序列合成          

              (2)该技术不直接改造Rubisco酶,而通过Rubisco酶基因进行改造,从而实现对Rubisco酶的改造,其原因是                           。和传统基因工程技术相比较,定点突变最突出的优点是获得的产物一般是自然界中             (填“存在的”或“不存在的”),PCR定点突变技术属于         工程的范畴。

              (3)可利用定点突变的DNA构建基因表达载体,常用                法将基因表达载体导入植物细胞,将该细胞经植物组织培养技术培育成幼苗,从细胞水平分析所依据的原理是                        

            • 8. 变异链球菌在牙面的粘附、集聚是龋齿发生的先决条件,转基因可食防龋疫苗是通过基因工程技术,将变异链球菌中与龋齿发生密切相关的抗原基因(PAcA基因)转入植物的表达载体中,利用植物生物反应器生产的可食用基因工程疫苗.
              (1)转基因植物的制备:
              单一使用PAcA基因,机体免疫应答不理想,霍乱毒素中有增强机体免疫应答的氨基酸序列(CTB),将CTB基因与PAcA基因连接成嵌合(PAcA-CTB)基因,作为 ______ 与Ti质粒的T-DNA拼接,并用 ______ 法导入离体的黄瓜叶肉细胞中,经植物组织培养获得转基因植株.
              (2)转基因植株目的基因的PCR鉴定:已知PAcA-CTB基因部分序列如下
              5′---CCGTGT…ATGCCT---3′
              3′---GGCACA…TACGGA---5′
              根据上述序列选择引物 ______ (填字母)进行PCR.
              A.引物:5′-GGCACA-3′
              B.引物:5′-AGGCAT-3′
              C.引物:5′-CCGUGU-3′
              D.引物:5′-CCGTGT-3′
              反应结束后,电泳检测PCR产物,结果如图(1来自未转化植株,2是含PAcA-CTB基因的质粒,3-10来自转基因植物),从结果可以看出, ______ 号植物含有PAcA-CTB基因.

              (3)对上述含PAcA-CTB基因的植株进一步研究,发现其中一些植株体细胞中含两个PAcA-CTB基因(用字母A表示,基因间无累加效应).为了确定这两个基因与染色体的位置关系,研究人员单独种植每株黄瓜,将同一植株上雄花花粉授到雌花柱头上,通过子一代表现型及其分离比进行分析:
              ①若F1中疫苗植株:非疫苗植株= ______ ,则PAcA-CTB基因位于非同源染色体上,基因与染色体的位置关系如图甲所示.

              ②若F1中疫苗植株:非疫苗植株=3:1,则两个基因位于 ______ ,请在图乙中标出基因.
              ③若F1全为疫苗植株,则两个基因位于 ______ ,请在图丙中标出基因.
              (4)上述三种基因与染色体的位置关系适于进行推广种植的是两个基因位于 ______ 的植株.多年后,若出现了非疫苗植株,请写出一种可能的变异类型及产生的原因 ______
            • 9. 已知甲种农作物因受到乙种昆虫危害而减产,乙种昆虫食用某种原核生物分泌的丙种蛋白质后死亡.因此,可将丙种蛋白质基因转入到甲种农作物体内,使甲种农作物获得抗乙种昆虫危害的能力.回答下列问题:
              (1)为了获得丙种蛋白质的基因,在己知丙种蛋白质氨基酸序列的基础上,推测出丙种蛋白质的 ______ 序列,据此可利用化学方法合成目的基因.获得丙种蛋白质的基因还可用 ______ ______ 方法.
              (2)在利用上述丙种蛋白质基因和质粒栽体构建重组质粒的过程中,常需使用 ______ 酶和 ______ 酶.
              (3)若用含有重组质粒的农杆菌直接感染甲种农作物植株叶片伤口,则该植株的种子 ______ (含有/不含)丙种蛋白质基因.
            • 10. 干扰素是动物或人体细胞受病毒感染后产生的一类糖蛋白,具有抗病毒、抑制肿瘤及免疫调节等多种生物活性.回答下列问题:
              (1)干扰素的作用机理是:干扰素作用于宿主细胞膜上的相应受体,激活该细胞核中基因表达产生多种抗病毒蛋白,其中有些蛋白可通过激活 ______ 使病毒的RNA水解,有些则可与 ______ (细胞器)结合,通过抑制病毒多肽链的合成发挥抗病毒作用.干扰素还可以通过提高吞噬细胞将抗原呈递给 ______ 细胞的能力,抑制肿瘤细胞.
              (2)干扰素的获取方法是:从白细胞中获取RNA,通过 ______ 的过程获得干扰素基因,利用 ______ 酶将干扰素基因与牛乳腺蛋白基因的启动子等调控组件连接在一起构建基因表达载体,采用 ______ 的方法导入牛的 ______ 细胞中,经胚胎早期培养一段时间后,移植入母体内发育成熟,即可获得能产生干扰素的转基因牛.
              (3)干扰素基因导入受体细胞后,欲检测其是否转录出mRNA,采用的方法是 ______
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