下表关于基因工程中有关基因操作的名词及对应的内容，正确的组合是：（ ）

下列有关利用细菌大量生产人胰岛素的叙述中，不正确的是（ ）

近年诞生的具有划时代意义的CRISPR/Cas₉基因编辑技术可简单、准确地进行基因定点编辑。其原理是由一条单链向导RNA引导核酸内切酶Cas₉到一个特定的基因位点进行切割。通过设计向导RNA中20个碱基的识别序列，可人为选择DNA上的目标位点进行切割(见下图)。下列有关叙述正确的是

以下说法正确的是（ ）

I.现有五种不同的抗生素（甲、乙、丙、丁、戊），要测它们对金黄色葡萄球菌的作用效果。图1表示在均匀接种了金黄色葡萄球菌的固体培养基上，分别于不同位置加入2mg不同的抗生素的实验结果（图中●为添加点）。图2表示这五种抗生素对成人产生毒副作用的剂量。请回答：

              图1                                                  图2

（1）由图1可知，_______种抗生素的抗菌效果最好。

（2）如果给予剂量为2mg，那么________种抗生素最适宜成人使用，理由是_____________。

（3）已知丁种抗生素作用的原理是抑制金黄色葡萄球菌细胞壁的形成，由此推测该种抗生素对成人的毒副作用较小的可能原因之一是___________________________。

（4）为保证培养基上能均匀地生长出一层金黄色葡萄球菌，将菌液接种到固体培养基上时宜进行____________（填“涂布平板”或“平板划线”）操作。实验过程中，与用于计数的平板接种不同的是本实验要保证滴加到培养基上的菌液_______________，以缩短培养时间。

（5）本实验过程中所使用的无菌技术，除用来防止培养物（金黄色葡萄球菌）被其他外来微生物污染外，还能_______________。

                                            图1

（1）如图1所示，将牛胎儿成纤维细胞核移入去核卵母细胞中，该技术称为_________技术；供核的牛胎儿成纤维细胞通常选用传代10代以内的细胞，其原因是_________________________。

（2）胚胎移植时，为使代孕母牛能处于适合的生理状态，需要用激素对其进行_______处理。

（3）采用SRY-PCR法进行性别鉴定的基本程序是提取牛胎儿成纤维细胞的DNA，经PCR反应体系扩增SRY基因（Y染色体上特有的性别决定基因）片段，然后用SRY特异性探针对扩增产物进行检测。

①PCR反应体系中除含缓冲液、模板DNA、dNTP（包含dATP、dCTP、dGTP、dTTP）、引物以外，还应含有____________；其中，dNTP的作用是____________________________________，引物应选用图2中的________（填图中标号，图2中I、II、III、IV是引物，箭头是延伸方向）。

                              图2

②若扩增产物含大量SRY基因片段，则该种牛胎儿成纤维细胞______（填“能”或“不能”）用作图1所示技术流程中转化过程的受体细胞。

回答下列(一)、(二)小题：

    (一)回答固定化酶有关问题

    (1)制备固定化α－淀粉酶的过程中，将α－淀粉酶固定在石英砂上的方法是______，一定浓度的淀粉溶液经过______后，可使淀粉水解为______，遇碘显______色，此实验最适温度为______。

    (2)关于固定化酶中的酶说法正确的是______。

    A．酶的种类多样性，可催化一系列的酶促反应

    B．酶被固定在不溶于水的载体上，可反复利用

    C．酶作为催化剂，反应前后结构不改变，所以固定化酶可永远利用下去

    D．固定化酶由于被固定在载体上，所以丧失了酶的高效性和专一性特点

    (二)下图是培育表达人乳铁蛋白的乳腺生物反应器的技术路线。图中tet^R表示四环素抗性基因，amp^R表示氨苄青霉素抗性基因，BamHⅠ、HindⅢ、SmaⅠ直线所示为三种限制酶的酶切位点。

    据图回答：

    (1)图中将人乳铁蛋白基因插入载体，需用___________限制酶同时酶切载体和人乳铁蛋白基因。筛选含有重组载体的大肠杆菌首先需要在含______的培养基上进行。

    (2)能使人乳铁蛋白基因在乳腺细胞中特异性表达的调控序列是______(填字母)。

      A．amp^R    B．启动子    C．终止子    D．复制原点

    (3)过程①可采用的操作方法是______(填字母)。

    A．农杆菌转化    B．显微注射    C．大肠杆菌转化    D．细胞融合

    (4)过程②采用的生物技术是_____________。

    (5)对早期胚胎进行切割，经过程②可获得多个新个体。这利用了细胞的______性。

    (6)为检测人乳铁蛋白是否成功表达，可采用______(填字母)技术。

    A．核酸分子杂交    B．基因序列分析    C．PCR D．抗原一抗体杂交

科学家从链霉菌提取抗除草剂基因(bar基因)，用来培育抗除草剂作物。回答下列问题：

(2)将种子的胚划伤，简称划胚。请说出农杆菌将bar基因导入划胚细胞的过程：____________________________________________。

(3)某兴趣小组要探究各种划胚方式(包括横划、纵划和穿刺)对bar基因导入大豆种子胚细胞效率的影响。请将有关实验步骤补充完整。

步骤1：_______________________________________________中培养23天。

步骤2：用_____________________技术鉴定萌发植株的细胞是否导入bar基因。

(4)下表是不同植物对除草剂耐受性研究的实验结果。据表分析可知，玉米对除草剂耐受性最大，判断依据是_____________________________。

GDNF是一种神经营养因子。对损伤的神经细胞具有营养和保护作用。研究人员构建了含GDNF基因的表达载体（如图1所示），并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。请回答：

（1）在分离和培养大鼠神经干细胞的过程中，使用胰蛋白酶的目的是              。

（2）构建含GDNF基因的表达载体时，需选择图1中的               限制酶进行酶切。

（3）经酶切后的载体和GDNF基因进行连接，连接产物经筛选得到的载体主要有三种：单个载体自连、GDNF基因与载体正向连接、GDNF基因与载体反向连接（如图1所示）。为鉴定这3种连接方式，选择HpaI酶和BamHI酶对筛选的载体进行双酶切，并对酶切后的DNA片段进行电泳分析，结果如图2所示。图中第  泳道显示所鉴定的载体是正向连接的。

（4）将正向连接的表达载体导入神经干细胞后，为了检测GDNF基因是否成功表达，可用相应的          与提取的蛋白质杂交。当培养的神经干细胞达到一定的密度时，需进行         培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。

棉铃虫是一种严重危害棉花的害虫.我国科学工作者发现一种生活在棉铃虫消化道内的苏云金杆菌能分泌一种毒蛋白使棉铃虫致死，而这种毒蛋白对人畜无害．通过基因工程方法．我国已将该蛋白基因转入棉花植株并成功表达．由于棉铃虫吃了这种转基因棉花的植株后就会造成死亡，所以该棉花新品种在1998年推广后，已取得了很好的经济效益．请根据上述材料回答下列问题：

（1）毒蛋白对人畜无害，但能使棉铃虫致死，从蛋白质特性来看，蛋白质具有______________．

（2）利用苏云金杆菌防治棉铃虫属于生物防治，它突出的优点是___________________．

（3）转基因棉花的抗虫变异来源，属于可遗传变异类型中的___________________________．

（4）从苏云金芽孢杆菌中切割抗虫基因所用的工具是_________，此工具主要存在于______中，其特点是___________________________