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          共50条信息

            • 1．

              研究人员从血管内皮瘤中发现了一种新的血管增生抑制剂——内皮抑素，它能有效地抑制血管增生。下面是获得重组内皮抑素的方法，请分析回答下列问题。


              （1）从肝细胞中分离出相应的RNA，经________法，获得内皮抑素基因，再经________过程进行扩增，以获得更多的目的基因。

              （2）扩增的目的基因与pUC18质粒(如图所示)都用EcoR Ⅰ和BamH Ⅰ进行双酶切，然后用DNA连接酶进行连接，构建重组质粒。双酶切不仅能避免了目的基因与载体的自身环化以及________连接，还减少了目的基因与目的基因、载体与载体的连接，提高了重组质粒的比例。

              （3）大肠杆菌pUC18质粒的LacZ基因中如果没有插入外源基因，LacZ基因便可表达出β-半乳糖苷酶，当培养基中含有IPTG和X—-gal时，X-—gal便会被β-半乳糖苷酶水解成蓝色，大肠杆菌将形成蓝色菌落。反之，则形成白色菌落。选择培养基中除含有大肠杆菌必需的葡萄糖、氮源、无机盐、水、生长因子等营养物质外，还应加入的物质有________和氨苄青霉素。成功导入重组质粒的大肠杆菌在培养基中形成________颜色的菌落，原因是_________________________。

              （4）从选择培养基中挑取所需的单个菌落接种于液体培养基中培养，获得粗提表达产物。将等量毛细血管内皮细胞接种于细胞培养板，37 ℃培养。将等量不同浓度的粗提表达产物加进培养孔中，72 h后在显微镜下观察细胞存活情况并统计(或记录)活的内皮细胞数目，实验结果如下表所示。实验结果说明_______________________________________________________________。

              粗提表达产物浓度/(μg·mL－1)

              0

              2

              4

              6

              8

              10

              活的内皮细胞数目(×102)

              12

              6

              2

              1

              0.5

              0.5

              难度：较难
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            • 2．

              利用动物乳腺生产产品的技术称为动物乳腺反应器技术。2005年我省青岛“崂山奶山羊乳腺生物反应器的研制”项目通过鉴定，该项目生产的药用蛋白具有表达效率高、成本低、安全性高、易于分离纯化的优点，可产生乙肝表面抗原及抗凝血酶Ⅲ等医药产品，造福人类健康。下图为利用生物技术获得生物这一新品种和抗虫棉的过程，据图回答：

               

              ⑴在基因工程中，A表示______________，如果直接从苏云金杆菌中获得抗虫基因，①过程使用的酶区别于其他酶的特点是____________________，B表示__________________。

              ⑵在研究过程中，研究人员首先从相关基因组中获取了目的基因，并采用____     技术对目的基因进行了扩增，然后将目的基因与质粒等载体组合形成了重组载体。在重组载体的构建过程中需要的工具酶有______________。

              ⑶基因表达载体的构建是基因工程的核心，一个完整的基因表达载体至少包括哪些部分?____________。

              ⑷将目的基因导入受体细胞的过程中，在③过程中一般是采用_______________方法，在②过程中一般采用_________方法，受体细胞一般是__________。

              ⑸由于转基因表达产物存在于山羊的乳汁中，检测其体内是否出现药用蛋白，在分子水平上的检测方法及结果是什么?

              难度：难
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