凝乳酶是奶酪生产中的关键性酶，研究人员利用基因工程技术，将编码该酶的基因转移到了微生物细胞中并使之表达。下图表示EcoRI、BamHI、PstI三种限制酶在质粒和含凝乳酶基因的外源DNA片段上的切割位点。回答下列问题：

(1)根据图中EcoRI、BamHI、PstI三种限制酶的切割位点分析，该工程中最不适宜用来切割外源DNA获取目的基因的限制酶是      ，原因是      。将切割后的质粒和目的基因连接起来需要      酶。构建好的重组质粒在目的基因前要加上特殊的启动子，它是     识别和结合的部位。

(2)研究发现，如果将该凝乳酶第20位和第24位氨基酸改变为半胱氨酸，其催化能力将提高2倍。科学家可以生产上述高效凝乳酶的现代生物工程技术是      。该生物工程技术对蛋白质结构的设计和改造，必须通过基因来完成，原因是              

【生物—选修3：现代生物科技专题】

  科学家从病死的家禽和候鸟体内分离到了H5N1禽流感病毒，用以生产可以预防和治疗禽流感的抗体，下图为单克隆抗体制备过程示意图，图中A～G分别表示生物技术或细胞名称，请回答有关问题：

（1）若A细胞是小鼠骨髓瘤细胞，则B细胞是取自＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的细胞，C过程不同于诱导植物原生质体融合的常用诱导因素是＿＿＿＿＿＿。

（2）假设仅考虑某两个细胞的融合，则可能形成3种类型的D细胞，因此需用＿＿＿＿培养基筛选出＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿＿的E细胞用于培养。

（3）在动物细胞培养过程中培养液中必须通入O₂和CO₂，通入CO₂的目的是＿＿＿＿。随着细胞分裂次数的增多，就会停止分裂增殖，这种现象称为细胞的＿＿＿＿，需要用胰蛋白酶等处理使细胞从瓶壁上分离下来。

（4）如果将单克隆抗体基因导入奶牛受精卵，再通过早期胚胎培养和＿＿＿＿＿＿＿＿，可获得多头奶牛，从而从乳汁中提取更多的抗体；欲获得活性更强的抗体，可通过＿＿＿技术对基因进行修饰，以实现目的。

（1）图中a、b所示获得目的基因的方法是          。

（2）据图分析，在构建c的过程中，需用               (填“限制酶Ⅰ”或“限制酶Ⅱ”)切割目的基因，为检验重组质粒是否导入受体细胞，需要利用的标记基因是             。（3）过程e运用了细胞工程中的                     技术，该技术的理论依据是        。

(4)若希望该转基因水稻生产的“金色大米”含维生素A含量更高、效果更好，则需要通过              工程手段对合成维生素A的相关目的基因进行设计

（1）构建含抗病基因的表达载体A时，应选用限制酶___________，对含病毒基因的DNA和质粒，进行切割。A中能使抗病毒基因在香蕉细胞中特异性表达的调控序列是___________，其中培养基中的卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长，欲利用该培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，应使基因表达载体A中含有___________，作为标记基因。

（2） 目的基因能在香蕉细胞中稳定遗传的关键是___________；香蕉组织块经过①②获得转基因抗病植株，其依据的原理是___________。

（3） 香蕉具有不耐储存的特点，科学家把控制香蕉成熟的基因导入香蕉，获得转基因延熟香蕉，储存时间可以延长两周。在延熟过程中，R蛋白起着很关键的作用。如果用蛋白质工程来生产R蛋白，应从预期的蛋白质的功能出发来设计___________，再推测应有的氨基酸序列。

（4）科学家把得到的抗病香蕉和耐储存的香蕉做成了人工种子，人工种子就是以植物组织培养得到的___________等为材料，经过人工薄膜包装得到的种子，在适宜条件下同样能够萌发长成幼苗。

（1）传统制备抗体的方法是向动物体内反复注射某种抗原，使 ____           __ 增殖、分化为浆细胞，浆细胞产生抗体，然后从动物 ____   __ 中分离所需抗体．
（2）与诱导植物原生质体融合不同的是，②过程还可以使用 ___          ___ 进行诱导融合．②过程诱导后，用选择性培养基筛选出杂交瘤细胞，杂交瘤细胞的特点是 ______                               ．
（3）给某患者连续隔周注射某种鼠源性单抗治疗一种病毒感染性疾病，开始时病毒量明显减少，一段时间后，病毒量又开始上升，上升的原因可能是病毒发生了 _____         _ ，也可能是人体产生了能与鼠源性单抗特异性结合的 _____          ，使鼠源性单抗不能发挥抗病毒作用．
（4）研究人员可应用 _____          _ 技术，改造鼠源性单抗分子的结构，降低人体对鼠源性单抗的免疫反应．

（1） 从上述资料可知，若要改变蛋白质的功能，可以考虑对蛋白质的                进行改造。

（2） 以甲基因序列为基础，获得乙基因的途径有          甲基因或         乙基因。

（3） 蛋白质工程也被称为第二代基因工程，其基本途径是从预期蛋白质功能出发，通过              和                ，进而确定相对应的            ，据此获得基因，在经表达、纯化获得蛋白质后，还需要对蛋白质的        进行鉴定。

（1）与基因工程相比较，蛋白质工程产物具备的特点是:                  。

（2）图中的步骤①和②分别为            、分子设计。

（3）如果已知mRNA的碱基序列是-A-U-C-C-A-G-G-U-C-,要合成对应的DNA,需要的原料是四种     ,所用的酶是        ；合成DNA的对应碱基对序列是           。

（4）由图可知,要改造蛋白质结构,最终是通过改造基因来实现的。请说明原因:                                               。