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            • 1. α1-抗胰蛋白酶是肝脏产生的一种糖蛋白,缺乏会引起肺气肿。某公司成功研制出转基因羊,进入泌乳期后,其乳汁中含有人类的α1-抗胰蛋白酶,用于治疗肺气肿。回答下列问题:
              (1)为获取目的基因,需要在肝细胞中提取_____________,通过反转录产生cDNA,再通过__________技术进行快速扩增。
              (2)为了α1-抗胰蛋白酶基因能够在乳腺细胞成功表达,需要在基因表达载体中接入____,该序列是___________识别位点。
              (3)α1-抗胰蛋白酶是一种结构较复杂的糖蛋白,因此用上述方法生产,相对传统的转基因大肠杆菌生产,优势在于_________________________________________________________________。
              (4)参考乳腺生物反应器,你认为还可以从哪里获取产物?_________,其优点是______________________________________(答出两点即可)  。
            • 2.

              某一单基因遗传病家庭,女儿患病,其父母和弟弟的表现型均正常。

              (1)根据家族病史,该病的遗传方式是_________________________;母亲的基因型是________(用A、a表示);若弟弟与人群中表现型正常的女性结婚,其子女患该病的概率为______(假设人群中致病基因频率为1/10,结果用分数表示)。

              (2)检测发现,正常人体中的一种多肽链(由146个氨基酸组成)在患者体内为仅含45个氨基酸的异常多肽链。异常多肽链产生的根本原因是_________________,由此导致正常mRNA第________位密码子变为终止密码子。

              (3)分子杂交技术可用于基因诊断,其基本过程是用标记的DNA单链探针与____________进行杂交。若改致病基因转录的mRNA分子为“…ACUUAG…”,则基因探针序列为__________________;为制备大量探针,可利用___________技术。

            • 3.

              玉米自交系(遗传稳定的育种材料)B具有高产、抗病等优良性质,但难以直接培育成转基因植株,为使其获得抗除草剂性状,需依次进行步骤I、II试验。

              Ⅰ.获得抗除草剂转基因玉米自交系A,技术路线如下图。

              (1)为防止酶切产物自身环化,构建表达载体需用2种限制酶,选择的原则是______(单选)。

              ①Ti质粒内,每种限制酶只有一个切割位点

              ②G基因编码蛋白质的序列中,每种限制酶只有一个切割位点

              ③酶切后,G基因形成的两个黏性末端序列不相同

              ④酶切后,Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

              A.①③ B.①④ C.②③ D.②④

              (2)下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知,细胞脱分化时使用的激素是_______________,自交系_______________的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。

              (3)农杆菌转化愈伤组织时,T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织,需使用含_____________________的选择培养基。

              (4)转化过程中,愈伤组织表面常残留农杆菌,导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达,其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织,出现蓝色的是_______________(多选)。

              A.无农杆菌附着的未转化愈伤组织

              B.无农杆菌附着的转化愈伤组织

              C.农杆菌附着的未转化愈伤组织

              D.农杆菌附着的转化愈伤组织

              (5)组织培养获得的转基因植株(核DNA中仅插入一个G基因)进行自交,在子代含G基因的植株中,纯合子占_____________。继续筛选,最终选育出抗除草剂纯合自交系A。

              II.通过回交使自交系B获得抗除草剂性状

              (6)抗除草剂自交系A(GG)与自交系B杂交产生F1,然后进行多轮回交(下图)。自交系B作为亲本多次回交的目的是使后代______________。


              (7)假设子代生活力一致,请计算上图育种过程F1、H1、H2、H3各代中含G基因植株的比例,并在图1中画出对应的折线图。若回交后每代不进行鉴定筛选,直接回交,请在图2中画出相应的折线图。________


              (8)下表是鉴定含G基因植株的4种方法。请预测同一后代群体中,4种方法检出的含G基因植株的比例,从小到大依次是________。


              方法           检测对象         检测目标         检出的含G基因植株的比例

              PCR扩增       基因组DNA G基因                     x1

              分子杂交       总mRNA G基因转录产物              x2

              抗原-抗体杂交   总蛋白质        G基因编码的蛋白质          x3

              喷洒除草剂      幼苗            抗除草剂幼苗                x4


              对Hn继续筛选,最终选育出高产、抗病、抗除草剂等优良性状的玉米自交系。

            • 4.

              现代生物工程技术推动了医药学、免疫学和生态学的发展,依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题:

              (1)科学家将生长激素基因与_______________的启动子等调控组件重组在一起,通过显微注射等方法,导入哺乳动物的_______________中,获得转基因动物,再利用_________________技术获得大量的转基因克隆动物作为乳腺生物反应器,来生产生长激素,用于治疗矮小症。

              (2)单克隆抗体的制备中,将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,再用特定的____培养基进行筛选,获得杂交瘤细胞后,还需进行__________培养和抗体检测,经过多次筛选,就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是_____________________________________________________。

              (3)为建设美丽乡村,积极推进生态农业建设,依据生态工程_______________的原理,合理设计食物链,使生态系统中的物质和能量得到分层次多级利用,使废弃物资源化,提高了能量的_____________,减少了环境污染。

            • 5. 现代生物工程技术推动了医药学、免疫学等领域的发展,依据现代生物工程技术的相关知识和原理回答下列问题:
              (1)利用基因工程技术实现胰岛素的批量生产是目前糖尿病治疗的新思路,该过程中的关键操作环节是______,该环节目的是使胰岛素基因______,同时,使其能够表达和发挥作用。
              (2)单克隆抗体的制备中,将经抗原免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞进行融合,再用特定的选择性培养基进行筛选,获得杂交瘤细胞后,还需进行______培养和抗体阳性检测,经过多次筛选,就能获得能分泌单一抗体的杂交瘤细胞。最后获得的杂交瘤细胞只能产生一种单一抗体的原因是______。
              (3)在胚胎工程中,胚胎移植前,通过______技术可获得较多胚胎;移植后的胚胎能在受体子宫中存活的生理基础是______。
            • 6. 家蚕细胞具有高效表达外源基因能力。将人干扰素基因导入家蚕细胞并大规模培养,可以提取干扰素用于制药。
              (1)进行转基因操作前,需用______酶短时处理幼蚕组织,以便获得单个细胞。
              (2)为使干扰素基因在家蚕细胞中高效表达,需要把来自cDNA文库的干扰素基因片段正确插入表达载体的______和______之间。
              (3)采用PCR技术可验证干扰素基因是否已经导入家蚕细胞。该PCR反应体系的主要成分应该包含:扩增缓冲液(含Mg2+)、水,4种脱氧核糖苷酸、模板DNA、______和______。
              (4)利用生物反应器培养家蚕细胞时,的细胞会产生接触抑制。通常将多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反应器中,这样可以______增加培养的细胞数量,也有利于空气交换。
              (5)利用基因工程可以获得转基因牛,从而改良奶牛的某些性状。基因工程的四个基本操作步骤是______、基因表达载体的构建、______和______。
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