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            • 1.

              图示方案为人们获得生物新品种的过程,请回答下列问题:

              方案Ⅰ:抗冻蛋白基因烟草细胞―→抗冻烟草

              方案Ⅱ:A基因免疫过的B细胞―→体外培养―→单克隆抗体

              方案Ⅲ:人的生长激素基因牛的受精卵―→早期胚胎受体母牛―→转基因牛

              (1)基因工程的核心步骤是________________。农杆菌转化法中,根据农杆菌的特点,如果将抗冻蛋白基因插入________上,通过农杆菌的转化作用,就可以使目的基因进入植物细胞,并将其插入植物细胞中________上。

              (2)推测方案Ⅱ中A基因所起的作用是________,请写出该方案获得的细胞中遗传信息传递时所遵循的法则____________________________。

              (3)方案Ⅲ中的转基因牛可以通过分泌乳汁来生产人的生长激素。这需要将人的生长激素基因与________的启动子等调控组件重组在一起。该方案中的早期胚胎在移植入受体母牛子宫之前,必须进行性别鉴定,一般是取处于________时期的________细胞进行检测。

            • 2.

              了获得较多、较纯、较完整的甜菜总DNA,科研人员比较了A方法(通过CTAB裂解细胞,并与蛋白质形成复合物)、B方法(通过SDS裂解细胞释放核DNA,使蛋白质变性)、C方法(通过高盐沉淀蛋白质)从嫩叶、块根中提取总DNA的效果,主要实验步骤和相关检测结果如下,其中氯仿-异戊醇不溶于水且密度均大于水,DNA不溶于氯仿-异戊醇,蛋白质等溶于氯仿-异戊醇。分析回答:

              ①将液氮冷冻的组织研磨成粉末

                          ↓

              ②分别用A、B、C三种不同方法处理

                          ↓

              ③DNA粗提液在65℃水浴保温60min,搅拌均匀

                          ↓

              ④加氯仿-异戊醇,离心取____________?,加冷酒精,收集沉淀

                          ↓

              ⑤加入RNA酶,37℃水浴保温20min,重复步骤④

                          ↓

              ⑥将沉淀室温干燥后,溶于超纯水中,-20℃保存备用


              结果检测

              组织

              方法

              组别

              OD260/OD230

              OD260/OD280

              得率/μg·mg-1

              嫩叶

              A方法

              A1

              1.970

              1.821

              0.105

              B方法

              B1

              1.973

              1.719

              0.096

              C方法

              Cl

              1.647

              1.568

              0.082

              块根

              A方法

              A2

              1.888

              1.888

              0.029

              B方法

              B2

              1.811

              1.682

              0.030

              C方法

              C2

              1.376

              1.320

              0.020


              注:①纯净的DNA样品OD260/OD230值约为2.0,过低表明小分子物质残留较多;
              ②纯净的DNA样品OD260/OD280值约为1.8,若比值大于1.8表示存在RNA残留,若小于1.8表示存在蛋白质残留。

              ③得率是指每毫克组织所提取的DNA量。

              (1)本实验不选择哺乳动物血液为实验材料的原因是_________________________.

              (2)步骤③将DNA粗提液在65℃水浴保温60min的目的是_________________。步骤④“? ”表示__________________________。步骤⑤中加RNA酶的作用是_______________。

              (3)影响DNA纯度的物质主要有______________。提取的DNA中RNA残留较多的方法是______________。以嫩叶为材料提取DNA的得率较高,原因是______________。

            • 3.

              下图为利用鸡血细胞进行DNA粗提取和鉴定实验的部分操作示意图,请分析回答:


              (1)上述图示中,该实验的正确操作顺序是_____________________(用序号与箭头表示)

              (2)在提取过程中使用不同浓度的NaCl溶液的目的是____________________________。

              (3)步骤①的目的是析出并获得DNA,其依据原理是________________________。

              (4)DNA可用_________试剂鉴定,沸水浴后的颜色反应为___________。

              (5)实验室还可以利用香蕉等植物样品提取DNA,利用植物组织提取DNA时,须先破碎细胞,破碎细朐时需添加食盐和_________ 进行研磨,添加该物质的目的是_________,而加入食盐的目的是______________________。

            • 4.

              下图中A、B、C、D是洋葱根尖局部放大图,E是其中某个细胞的分裂图像,请据图回答问题:

                            

              (1)与叶肉细胞相比,B处细胞内不具有的细胞器是______。

              (2)做“观察植物细胞的有丝分裂”实验时,主要观察上图_____的细胞。此处的细胞能产生____,其作用是促进细胞伸长生长;若用单侧光照射洋葱根尖,则根会向____弯曲生长。

              (3)E图示洋葱根尖细胞部分染色体及有关基因,假设该植物的基因型是AaBb,E图中若④号染色体上有A、B基因,则a、b基因位于____号染色体上。

              (4)某同学用完全培养液培养洋葱,他除进行充气外,还定期更换培养新鲜培养液,但几天后,洋葱却萎蔫了,这是因为:__________________。

              (5)图A、B、C、D所示细胞的形态结构功能各不相同,其根本原因是____________________。

              (6)若用洋葱叶子色素提取叶绿体中色素时,研钵中除了加无水乙醇外,还需加入的化学试剂有________________;某同学制作了一条符合要求的滤纸条,但该滤纸条层析一段时间后,滤纸条上没有一条色素带,则最可能的原因是______________________________________。

              (7)若利用洋葱提取DNA时,在切碎的洋葱中加入一定量的_____________,进行充分的搅拌和研磨过滤后,收集研磨液,然后利用DNA在_____________中溶解度的不同进行提纯。

              (8)若要探究白色洋葱鳞片叶中是否含有脂肪。你的实验思路是_________________________

            • 5.

              回答下列有关DNA、蛋白质技术的相关问题:

              (1)DNA粗提取的实验中使用冷却的95%酒精的目的是_____,该实验中向盛有鸡血细胞液的烧杯中加入蒸馏水的目的是_____,向溶有DNA的2mol/L的NaCl溶液中加入蒸馏水,溶液中会出现黏稠物,当黏稠物不再增加时,这时溶液中NaCl的物质的量的浓度相当于_____.

              (2)在提取洋葱的DNA时,在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐,进行充分的搅拌和研磨,过滤后收集研磨液.加入洗涤剂作用分别是_____.

              (3)在DNA粗提取与鉴定的实验中,选择适当浓度的NaCl溶液就能充分溶解DNA而使杂质沉淀或析出DNA过滤去除溶液中的可溶性杂质.请在图中做出DNA在NaCl溶液中的溶解度曲线.



              (4)PCR反应需要在一定的_____溶液中进行,每次循环可以分为_____、_____、和_____三步.DNA的合成方向总是从子链的_____延伸.

              (5)血红蛋白的提取方法可以采用_____,该方法主要是利用血红蛋白的哪一特性将它与其他物质分开的?_____.

            • 6.

              某实验小组以洋葱组织为实验材料,进行DNA粗提取和鉴定的实验,实验主要过程如下图,回答下列问题:


              (1)步骤一中需加入一定量的洗涤剂和    对洋葱组织进行处理,加入前者是的目的是               ,加入后者的目的是            。将搅拌和研磨后的物质进行过滤,即可得到含有DNA的滤液。

              (2)步骤二是DNA纯化过程中的关键步骤,可以采用以下几种不同的方法:

              ①滤液中NaCl浓度在      mol/L时可分离出DNA,若要再次提纯,需要将其溶解在2mol/L的NaCl溶液中;

              ②通常会向DNA粗提取物中加入嫩肉粉,其目的是         

              (3)步骤三中向滤液中加入DNA体积分数为95%的酒精的目的是___     _,得到纯净的DNA后,可利用DNA与            在沸水浴条件下会被染成    色,来对其进行鉴定。

              (4)提取出的DNA继续进行PCR,一般经过    次循环,每次循环经过                        三步。

            • 7.

              下图为“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关操作:

              (1)图中实验过程中,研磨前加入的B应该是______________。

              (2)通过上述所示步骤得到滤液C后,再向滤液中加入2 mol/L的NaCl溶液的目的是______________,再过滤得到滤液D,向滤液D中加入蒸馏水的目的是______________。

              (3)在“DNA的粗提取与鉴定”实验中,将含有一定杂质的DNA丝状物分别放入体积为2 mL的4种溶液中,经搅拌后过滤,获得下表所示的4种滤液,含DNA最少的是滤液________。

              (4)析出DNA过程中,加入酒精和用玻璃棒搅拌时,动作要轻缓的目的是______________。

            • 8.

              下列是关于生物技术实践方面的实际问题:

              (一)鸭梨醋饮属绿色健康饮品,既保存了鸭梨中的多种氨基酸、维生素、矿物质、有机酸等营养成分又兼具果醋醒酒护肝、助消化、降低血脂、软化血管等养生保健功能,深受广大消费者青睐。下图为鸭梨醋饮的制作流程简图,请据图回答问题。

              (1)为了提高该微生物的利用率,最好用       法对其进行固定。固定后应在固定溶液中浸泡一段时间,然后       ,转移至鸭梨汁中发酵。

              (2)过程②需要控制的条件      (至少列举两点)。过程②所用微生物与过程①所用的微生物结构上最显著的区别是        

              (3)若利用新鲜的鸭梨获取DNA,应事先去皮剪成小块,后添加      ,进行搅拌和研磨,再过滤收集滤液。

              (二)日常生活中使用的加酶洗衣粉是指含有酶制剂的洗衣粉。

              (4)由下图推知,该实验的目的是      ,50℃时加酶洗衣粉中碱性蛋白酶的最适含量是        

              (5)下表是添加脂肪酶的加酶洗衣粉和普通洗衣粉洗涤效果的实验记录,请据表回答问题:

              若实验组1号洗净所需时间接近7 min,最可能的原因是       

              (6)根据以上实验结果,写出两项提高加酶洗衣粉洗涤效果的措施:       

            • 9.

              下图1表示制备固定化酵母细胞的有关操作和利用固定化酵母细胞进行酒精发酵的示意图,图2是“DNA粗提取与鉴定”相关实验步骤。请回答下列问题:

                     

                                            图1                                                          

               (1) 图1中,X溶液为 ,其作用是使 。发酵过程中用搅拌器搅拌的目的是为了使

              (2) 在用海藻酸钠包埋酵母菌形成凝胶珠的过程中,加热溶解海藻酸钠时需注意用 加热,然后将溶化好的海藻酸钠溶液 后,再加入酵母菌充分搅拌混合均匀。

              (3) 图2中,a表示释放核物质后进行过滤的过程,过滤后取 (选填“滤液”或“析出物”)进行下一步实验;b表示的相关操作过程中,加入2 mol·L-1 NaCl溶液的作用是 ;c表示在滤液中加入冷却的95%的酒精,其目的是

                                             图2

            • 10.

              某生物兴趣小组在学习了DNA的粗提取和鉴定实验后,尝试开展RNA的粗提取和鉴定实验。通过查阅资料,制订了以下的实验方案:

              【实验课题】酵母RNA的提取和鉴定

              【实验目的】1.从酵母中提取RNA;2.鉴定RNA。

              【实验原理】微生物是工业上大量生产RNA的原料,其中以酵母尤为理想,因为酵母核酸中主要是RNA,DNA很少,菌体易收集,RNA易分离。RNA不溶于乙醇和无水乙醚。利用稀碱法(稀碱能使细胞壁溶解)或高盐法(高浓度的盐改变细胞膜的通透性)来释放RNA。RNA水解液(加硫酸、加热)+苔黑酚-FeCl3试剂加热直到沸腾1分钟,会呈现墨绿色。

              【实验材料】干酵母粉、离心机、烧杯、试管、玻璃棒等;0.2%氢氧化钠、95%乙醇、无水乙醚、乙酸、10%硫酸溶液、苔黑酚-FeCl3试剂等。

              【实验步骤】

              ①称6克干酵母

              ②加0.2%氢氧化钠45mL,沸水加热20分钟,搅拌,后加乙酸7滴

              ③离心10分钟后取上清液

              ④边搅拌边缓慢加95%乙醇并静置10分钟

              ⑤离心后先用95%乙醇洗两次,再用无水乙醚洗两次

              ⑥获得RNA粗制品

              ⑦RNA鉴定

              请根据实验方案,思考并回答下列问题:

              (1)酵母菌细胞中含有RNA的结构有细胞核、                   。酵母菌也是便于用来研究细胞呼吸不同方式的好材料,理由是             

              (2)实验步骤⑤中,离心后取     用乙醇、无水乙醚进行洗涤。

              (3)RNA提取过程要注意温度的控制,在20~70℃的温度范围内停留的时间不能太长,其原因是     

              (4)稀碱法提取RNA须在沸水浴中进行的目的,一是     ,二是     ,以便获得更多更纯净的RNA。

              (5)若用花椰菜来提取DNA,可用       瓦解细胞膜,然后充分研磨,实验中研磨速度要     

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