转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表示四种限制酶的识别序列及酶切位点，据图回答下列问题。

（1）若要获得抗病基因，可用_____________限制酶切，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会_________________。切割质粒与获取目的基因用的是___________（相同、不同）的限制酶。切割好的质粒与目的基因需要在_______________酶的作用下形成含抗病基因的重组DNA分子。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有__________________基因作为标记基因。

（3）图中将重组DNA分子导入香蕉受体细胞用到的方法是_____________法。

（4）为了进一步确定目的基因是否翻译成蛋白质，可用的检测方法是________。

（5）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________________的方法，可培育成能表现新性状的植株。图中①到②表示______过程，②到③表示______过程。

下图所示为科学家利用番茄叶细胞和马铃薯叶细胞杂交培育“番茄-马铃薯”植株的过程，请回答下列问题：

(1)图示技术名称是______________；过程⑤⑥⑦的细胞工程技术是__________，其依据的原理是_____________________。

(2)①②过程使用了_________________酶，以获得植物的原生质体；在动物细胞培养技术中，使细胞分离开来的酶是_________________。

(3)过程③在化学药剂_________________的作用下会发生植物原生质体的融合；动物细胞融合的方法与植物细胞不相同的是____________________。

(4)过程__________属于脱分化，完成此除了需要各种无机营养外，还需要在培养基中加入_____________、______________。（两类物质功能不同）

(5)过程__________属于再分化，诱导生根时，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较④过程________(填“高”或“低”)。

下面是获取某种二倍体抗虫植株的技术流程图：

请完成下列问题：

（1）上图中二倍体植物愈伤组织是外植体在适宜的_________________及温度、PH等条件下培养形成的，这一过程被称为___________。

（2）在获取抗虫植物的技术流程中，______________ 、__________________和工具酶等物质均来自微生物。

（3）下图中A、B、C、D四段DNA单链是根据毒蛋白基因对应片段合成的。假定在该DNA复制中，其中以a链为模板的复制，其子链是由左向右延伸的。

则在流程图的过程①中应选择___________（填字母）作为引物。如果选取的引物，使过程①的效率很低，则所选的引物中可能存在___________和_______________。

（4）如果要获取检测毒蛋白的单克隆抗体，通常要在动物细胞工程中_________和__________ 等技术的支持。

用植物组织培养来生产青蒿素是目前青蒿素研究的一大热点,可能成为大规模生产青蒿素的重要手段。研究发现，青蒿素的生物合成具有强烈的光依赖性,黑暗培养的青蒿毛状根即丧失合成青蒿素的能力。青蒿素的获得途径如图

(1)图中①表示青蒿素组织培养中细胞的       过程。过程②培养基中的生长素和细胞分裂素用量的比值        (填“高”或“低”)时，有利于芽的分化。

(2)利用植物组织培养培育脱毒苗时，一般选取      作为外植体，其依据是                                              。

(3)将愈伤组织分离成单细胞时，常用的酶是           和           。

(4)除了提供各种营养物质外，过程③还需要         条件，原因是                           。

应用生物工程技术获得人们需要的生物新品种或新产品。请据图回答下列问题。

(1)要使人的生长激素基因在牛的垂体细胞中特异性表达,完整的基因表达载体要包括目的基因、_________、__________________、标记基因等部分.在③之前要检测早期胚胎细胞是否已经导入人生长激素基因,宜采用_________________技术.③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段,可以采用______           _____技术,培育出多头相同的转基因牛犊。

(2)prG能激发细胞不断分裂,通过基因工程导入该调控基因来制备单克隆抗体,Ⅰ最可能是___________细胞,Ⅱ代表的细胞具有____              ________的特点.

(3)在抗虫棉培育过程中，④过程中的受体细胞如果采用愈伤组织细胞，则与采用叶肉细胞相比较，其优点是_______________________________，⑤过程采用的技术是___________________________。科学家预言，此种“转基因抗虫棉”独立种植若干代以后，将出现不抗虫的植株，此现象来源于_______________。

如图是科学工作者利用苏云金杆菌体内的抗虫基因培育转基因抗虫水稻的培育过程。请据图回答下列问题：

（1）实验中如果用EcoR Ⅰ切割多个外源DNA片段和质粒，则酶切产物用DNA连接酶进行连接后，两两连接所形成的产物有    种，实验中最好选择               切割外源DNA片段和质粒。

（2）图示中属于脱分化阶段的是            （填序号），该过程需要在培养基中添加营养物质和                等成分。

（3）转基因抗虫水稻的目的基因是否完成表达，从分子水平上的检测方法是          ，从个体水平上的检测方法是                             。      

（4）科学家发现该抗虫毒蛋白的杀虫效果不佳，然后通过            或基因合成，对现有抗虫毒蛋白进行改造，这项技术属于               工程。

如图是植物组织培养的简略表示．据此回答：

(1)科学家首先从绞股蓝细胞中提取抗TMV基因转录的RNA，然后合成目的基因。图中过程①表示________________。

(2)过程③构建重组Ti质粒时，必须使用____________和________________两种工具酶。

(4)在过程⑤培养基中除含有卡那霉素及植物必需的各种营养成分外，还必须添加________________________，以保证受体细胞能培养成再生植株。

如图为植物体细胞杂交过程示意图。据图回答：

(1)步骤①是________________________________________________________，一般需要使用__________________________来完成此操作。

(2)步骤②一般常用的化学试剂是______________________，目的是___________________________________________________________。

(3)在利用杂种细胞培育成为杂种植株的过程中，运用的技术手段是______，其中步骤④相当于_____________,步骤⑤相当于_________________________。

(4)若远缘杂交亲本A和B都是二倍体，则杂种植株为________________倍体。

(5)从理论上讲，杂种植株的育性为______________________。若运用传统有性杂交方法能否实现？_________________，原因是_________________________。因此，这项研究对于培育作物新品种方面的重大意义在于________                  __________。

[生物——选修3：现代生物科技专题]

科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄—马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番肺和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示，请据图回答下列问题：

（1）过程①常用的酶是________________，细胞融合完成的标志是____________________________________。

（2）植物体细胞杂交依据的生物学原理有__________________________________________。

（3）植物原生质体融合过程常利用化学试剂__________诱导融合，在鉴定杂种原生质体时可用显微镜观察，根据细胞膜表面荧光的不同可观察到____________种不同的原生质体（只考虑细胞两两融合的情况），当观察到_____________________________________________________时可判断该原生质体是由番茄和马铃薯融合而成的。

（4）过程④中的培养基常添加的植物激素是______________________________。

（5）若番茄细胞内有m条染色体，马铃薯细胞内有n条染色体，则“番茄—马铃薯”细胞在有丝分裂后期含____________条染色体。