现有甲、乙两个烟草品种(2n=48)，其基因型分别为aaBB和AAbb，这两对基因位于非同源染色体上，且在光照强度大于800勒克斯时，都不能生长，这是由于它们中的一对隐性纯合基因(aa或bb)作用的结果。取甲乙两品种的花粉分别培养成植株，将它们的叶肉细胞制成原生质体，并将两者相混，使之融合，诱导产生细胞团。然后，放到大于800勒克斯光照下培养，结果有的细胞团不能分化，有的能分化发育成植株。请回答下列问题：

(1)甲、乙两烟草品种花粉的基因型分别为___________和____________。

(2)将叶肉细胞制成原生质体时，使用______________________________去除细胞壁。

(3)在细胞融合技术中，常用的促融剂是________________。

(4)细胞融合后诱导脱分化产生的细胞团叫_______________。

（4）某生态农业把鱼塘、农田、果园和牛羊养殖场有机地组合在一起，优化了系统结构，遵循系统学与工程学原理中的____________的原理。

​（7）从分子水平检测目的基因存在与鉴定目的基因表达的方法依次为_______________、_______________。

某二倍体植物是杂合体，如图为其花药中未成熟花粉在适宜的培养基上培养产生完整植株的过程。据图回答。

(1)图中①表示的是该花粉培养过程中的________过程，X代表的是_________，③表示的是分化(或发育)过程，④表示的是诱导生根过程。

(2)图中从愈伤组织形成完整植株的途径有两条，具体通过哪一条途径主要取决于培养基成分中植物激素 的种类及其浓度配比，由花粉发育成的完整植株均为________植株(甲)。未成熟花粉经培养能形成完整植株，说明未成熟花粉具有________________________。

(3)植株甲进行__________________处理，才能结实，产生后代(乙)，否则植株甲只有通过无性生殖的方式才能产生后代(丙)。乙、丙两种植株中，能产生可育花粉的是________植株。

兰花育性差但市场需求巨大，某生物公司欲利用现代生物技术培养兰花。回答下列相关问题：

(1)欲培养无病毒的高品质兰花宜选择____________作为外植体。培养一段时间后，会经过___________形成愈伤组织，愈伤组织的特点是_________________________。

(2)若在培养过程中先用生长素，再用细胞分裂素，则愈伤组织的生长状况是__________。愈伤组织在一定的培养条件下，又可再分化出___________，最终长成兰花小植株。

(3)若研究人员对两个品种的兰花进行体细胞杂交，首先用_________法获得原生质体，然后用___________（试剂）诱导原生质体融合。原生质体融合的原理是_______________。融合后的原生质体再生细胞壁过程与细胞内_____________（细胞器）有密切关系。

(4)在植物组织培养的过程中，由于培养细胞一直处于___________状态，因此容易受到培养条件和外界压力（如射线、化学药物等）的影响产生突变，科研人员可从这些突变体中筛选出新品种兰花。

为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。

（1）将重组DNA分子导入植物细胞的常用方法有______________________法。(要写出两种) 

（2）由导入目的基因的水稻细胞培养成植株需要利用____________________技术，该技术的核心是________________和_________________。 

（3）为了确定耐盐转基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素标记的______________做探针进行分子杂交检测，又要将水稻___________________方法从个体水平鉴定水稻植株的耐盐性。

I．玉米自交系（遗传稳定的育种材料）具有高产、抗病等优良性质，但难以直接培育成转基因植株。获得抗除草剂转基因玉米自交系，技术路线如下图。

（1）为防止酶切产物自身环化，构建表达载体需用2种限制酶，选择的原则是______（单选）。

①Ti质粒内，每种限制酶只有一个切割位点

②G基因编码蛋白质的序列中，每种限制酶只有一个切割位点

③酶切后，G基因形成的两个黏性末端序列不相同

④酶切后，Ti质粒形成的两个黏性末端序列相同

A．①③           B．①④        C．②③       D．②④

（2）下表是4种玉米自交系幼胚组织培养不同阶段的结果。据表可知，细胞脱分化时使用的激素是__________，自交系_______的幼胚最适合培养成愈伤组织作为转化受体。

（3）农杆菌转化愈伤组织时，T-DNA携带插入其内的片段转移到受体细胞。筛选转化的愈伤组织，需使用含_____________________的选择培养基。

（4）转化过程中，愈伤组织表面常残留农杆菌，导致未转化愈伤组织也可能在选择培养基上生长。含有内含子的报告基因只能在真核生物中正确表达，其产物能催化无色物质K呈现蓝色。用K分别处理以下愈伤组织，出现蓝色的是_______________（多选）。

A．无农杆菌附着的未转化愈伤组织

B．无农杆菌附着的转化愈伤组织

C．农杆菌附着的未转化愈伤组织

D．农杆菌附着的转化愈伤组织

（5）组织培养获得的转基因植株（核DNA中仅插入一个G基因）进行自交，在子代含G基因的植株中，纯合子占_____________。继续筛选，最终选育出抗除草剂纯合自交系。

II．胚胎工程是指对动物_______________或____________所进行的多种显微操作和技术处理。此工程是以体内受精过程和早期胚胎发育为理论基础的。哺乳动物精卵细胞发生上最大的区别是卵子在        （时期）完成___________________。受精作用发生时精子首先发生__________，之后当第一个精子接触卵细胞膜时发生_________________________。受精作用的场所是_____________。受精卵形成后，开始进行旺盛的有丝分裂。经历卵裂期、_____________、________________、原肠胚，经组织器官分化，发育成完整的生物个体。其中__________出现最早的分化现象。

（2）体外重组的质粒可通过Ca²⁺参与的_______方法导入大肠杆菌细胞：而体外重组的噬菌体DNA通常需与_______组装成完整噬菌体后，才能通过侵染的方法将重组的噬菌体DNA导入宿主细胞，在细菌、心肌细胞、叶肉细胞中，可作为重组噬菌体宿主细胞的是__________。

（3）某农业生态工程基地按照生态和经济规律，对种植业和养殖业进行了优化设计．通过套种、间种和轮种等技术的应用，增加农作物的种类，使种植的农作物为该生态系统组成成分中的消费者提供更多种类的食物。应用的生态学原理是___________________。

黄连素具有促进排卵和提高受孕率的生殖疗效。作为一种重要的生物碱，黄连素可从中草药黄连、黄柏、三颗针等植物中提取。临床常用来治疗细菌性胃肠炎、痢疾等消化道疾病。请回答下列有关问题。

（1）某生物科研小组利用植物组织培养技术快速大量繁殖含黄连素的黄连等植物。该技术利用的原理是____________________。在培养过程中，离体的黄连茎切段需经过__________、__________，然后培养出根、芽，才能形成完整的黄连小植株。

（2）黄连素具有促进排卵的疗效。卵子在发生过程中，减数第二次分裂是在__________的过程中完成的。获能的精子与卵子相遇时，首先发生 ____________________反应，使顶体内的酶释放出来。卵子完成受精的标志是____________________。 

（3）某生物科研小组想利用基因工程的方法获取催化合成黄连素的酶。基因工程操作过程中的核心步骤是__________；将目的基因导入大肠杆菌细胞内，首先要用__________处理细胞，使之成为感受态细胞。

应用植物组织培养技术，不仅可实现种苗的快速繁殖、培育无病毒植株，也可加快作物及苗木育种。下面是培育柑橘耐盐植株的实验流程：

回答下列问题：

（1）愈伤组织是由离体的茎段经___________过程形成的，此时愈伤组织细胞___________（填“具有”或“不具有”）细胞的全能性。

（2）对愈伤组织进行了两次处理，处理1中γ射线照射的目的是______________，用γ射线不直接处理茎段而是处理愈伤组织，原因是_____________________________；处理2中添加的物质X为___________。

（3）植物组织培养技术也被广泛应用于其他作物的育种中。在培育番茄—马铃薯、三倍体无子西瓜、人工种子、农杆菌转化法获得抗虫棉中，必须用到植物组织培养技术的是________________________。

紫杉醇是从红豆杉属植物树皮中提取分离出来的一种代谢产物，具有显著的抗癌效果。下面是几种生物合成紫杉醇的方法，请回答相关问题：

（1）若利用微型繁殖技术大量生产红豆杉幼苗，则该技术利用的原理是____________________。在植物组织培养的培养基中除无机营养成分、有机营养成分、琼脂外，还需要添加_____________。红豆杉的形成层在生长发育过程中并不能合成紫杉醇的根本原因是_____________________。

（2）科学家从太平洋红豆杉中获取相关基因片段后，再对目的基因进行扩增并在大肠杆菌中完成转化过程。

（3）为了培养能高效产生紫杉醇的红豆杉——柴胡植株，科研人员将红豆杉的愈伤组织和柴胡的愈伤组织用纤维素酶和果胶酶处理后，获得有活力的____________________，再用诱导剂____________使其融合，最后选择能够高效合成紫杉醇的杂交细胞进行培养。