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            • 1. (1)在植物基因工程中,构建重组Ti质粒时,通常要用    分别切割    和Ti质粒,再用    进行连接.
              (2)动物细胞体外培养时,要保证被培养的细胞处于    的环境,在营养方面最终需在培养基中加入    等天然成分.细胞培养需在适宜的理化条件下进行,此外还需要一定的气体环境,其中C02的主要作用是    
            • 2. 现代生物工程技术推动了免疫学和畜牧业的发展.
              (1)制备单克隆抗体需要借助动物细胞融合技术,其过程中与植物不同的方法是使用    诱导,融合细胞首先需要经过    培养获得杂交瘤细胞;还需进行    化培养和抗体检测,经多次筛选,用专一抗体检验呈阳性才可获得足够数量的能分泌所需抗体的杂交瘤细胞,再进行体内或体外培养,大量制备单克隆抗体.
              (2)对大面积烧伤病人,借助    技术可获取大量自身健康皮肤用于移植.培养的条件需要    、合适的营养、适宜的温度、通入含有95%空气和5%CO2混合气体(维持培养液的pH).
              (3)用细胞核移植技术繁育良种牛的培育过程需要进行胚胎移植,移植前需要对受体牛进行    技术处理,对外来胚胎基本不发生    ,为胚胎在受体内的存活提供了可能.
            • 3. 人的内皮抑素(一种蛋白质)能诱导血管内皮细胞凋亡,进而抑制新血管的产生.临床上通过静脉注射含有内皮抑素基因的腺病毒感染肿瘤细胞,使肿瘤细胞产生并释放内皮抑素,抑制新生血管的形成,使肿瘤细胞进入休眠状态并诱导其凋亡.
              回答下列问题:
              (1)从肝细胞中提取总mRNA,利用逆转录酶合成    ,根据内皮抑素基因的    设计并合成引物,利用PCR技术得到大量内皮抑素基因.
              (2)在构建含内皮抑素基因的腺病毒并导人受体细胞的过程中,以    作为工具酶,以    作为载体.
              (3)在进入临床使用前,需用体外培养的血管内皮细胞进行生理、病理检测.为获得大量的血管内皮细胞,首先用    酶处理血管内皮组织,使其分散成单个细胞,制成细胞悬液,然后将其放人含    等一些天然成分的合成培养基中培养.
              (4)血管内皮细胞被重组腺病毒感染后,若通过    方法检测呈阳性并观察到细胞凋亡,则说明内皮抑素基因得到表达且具有生物学活性.
              (5)临床上将含内皮抑素基因的腺病毒通过静脉注射感染肿瘤细胞,使肿瘤生长受到抑制,这种治疗方法属于    (填“体内”或“体外”)基因治疗.
            • 4. 欲进行小鼠肝细胞在不同浓度NaCl溶液中发生体积和数量变化的实验,请根据以下提供的实验材料与用具,提出实验思路,预测实验结果并进行分析.
              材料与用具:小鼠肝细胞悬液(用质量分数为0.9%NaCI溶液配制)、质量分数为1.3% NaCl溶液、蒸馏水、试管若干支、血细胞计数板、显微镜(具有测距功能)等.
              (要求与说明:对NaCl溶液的具体稀释过程、细胞计数的具体操作过程不作要求.不考虑细胞体积变化对计数的影响.绘制曲线时的细胞体积指细胞的平均体积.) 请回答:
              (1)实验思路:
              (2)预测实验结果(在以下坐标系中,绘制细胞体积和细胞数量变化示意曲线):
                  
              (3)分析与讨论:
              ①当NaCl溶液浓度大于0.9%时,细胞体积与数量发生的变化及其原因是什么?    
              ②基于上述实验,怎样才能用肝细胞分离得到纯度较高的细胞膜?    
            • 5. 如图为人类对克隆羊技术的拓展及应用的设想.请据图回答问题:

              (1)图中所涉及的现代生物技术有 等(至少写三个).
              (2)若利用图中过程最终获得婴儿说明 具有全能性,两个婴儿性状与 基本相同.
              (3)使用培养基进行重组细胞培养时,通常要加入 等天然成分,为防止培养过程中杂菌污染,通常要在细胞培养液中添加一定量的 .培养过程中通常采用 ,将其置于含 的混合气体的培养箱中进行培养.
              (4)图中从“内细胞团到胚胎干细胞”的培养过程中,必须用 处理内细胞团,使之分散成单个细胞.
            • 6. 某实验小组为了探究细胞膜的通透性,将小鼠肝细胞在体外培养一段时间后,检测培养液中的氨基酸、葡萄糖和尿素含量,发现它们的含量发生了明显得变化(如图).请回答问题.

              (1)由图可知,随培养时间延长,培养液中葡萄糖和氨基酸含量 , 尿素含量 .由于在原培养液中没有尿素,推测其是 的产物.
              (2)培养液中的氨基酸进入细胞后,其主要作用是;被吸收的葡萄糖主要通过 作用,为细胞提供 .
              (3)转氨酶是肝细胞内参与氨基酸分解与合成的一类酶,正常情况下这类酶不会排出胞外,若在细胞培养液中检测到该类酶,可能的原因是 
              (4)由(1)和(3)可初步判断,细胞膜对物质的转运具有的特性.
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