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            • 1. (2016•大兴区一模)近年来,癌症等疾病高发,严重影响着人类健康.
              (1)海兔素是从黑斑海兔体内分离获得的一种含溴倍半萜,有学者以人肺癌细胞系A549作为体外肿瘤模型,研究了海兔素与TRAIL(肿瘤凋亡诱导因子)对肿瘤细胞的作用.如图1.
              ①配置动物细胞培养液,同时加入胎牛    ,以满足细胞代谢所需的营养物质及调节因子.
              ②将A549置于适宜温度条件下培养.待细胞密度达到90%时,加入    ,将细胞分散至单细胞悬液.
              ③用一定浓度的海兔素、TRAIL处理上述细胞悬液后,采用流式细胞仪计数.
              实验中每个浓度的TRAIL处理下都设置了对照,其处理是    ,目的是    .根据结果可知,在不同条件组合的处理之下,随着处理浓度的增加,A549肿瘤细胞的存活率    ,这表明,海兔素能够    (填“增强”或“减弱”)TRAIL的抗肿瘤作用.
              (2)肿瘤细胞往往存在对TRAIL作用的抗性,其主要原因是肿瘤细胞内抗凋亡蛋白基因的高表达.为进一步研究海兔素对TRAIL抗肿瘤作用的机制,研究者又进行了相关实验.
              用凝胶电泳方法测定相关蛋白质的含量,结果见图2(β微管蛋白为对照).结果表明,海兔素可能抑制    ,从而减轻其对TRAIL的抗性.
              (3)综上所述,海兔素对于癌症的治疗有一定的效果,且这种作用与        呈现出相关性.
            • 2. (2016•菏泽一模)P53基因是正常细胞内重要的抑癌基因,研究表明P53基因突变可导致肝脏细胞癌变.科学家研究发现P53基因对体外培养的肝癌细胞生长有抑制作用,请回答下列问题:
              (1)切下新鲜的肝癌组织,在37℃下用    消化30~40分钟,用培养液制成细胞悬液在培养箱中培养,培养液是模拟了人体    的成分配制的,在培养基中加入一定量的抗生素,其目的是    
              (2)将P53基因经过一系列的处理并与脂质体混合,将混合物滴加至肝癌细胞上,轻轻混匀.最后筛选出含有P53基因的肝癌细胞.脂质体在这个操作中的作用是    
              (3)为证明P53基因有抑癌作用,需将两种细胞接入多孔板中,并从次日开始检测每孔的细胞总数,绘制成如图所示的生长曲线.请分析曲线    代表转入P53基因的肝癌细胞.
            • 3. 为研究双氢青篙素(DHA)对人结肠癌HCT116细胞的作用,科研人员提出以下实验思路:
              (1)取HCT116细胞用胰酶消化后,再用含血清的培养液制成细胞悬液,分别接种于4块培养板(一种多孔的细胞培养器具)的培养孔内,置于CO2培养箱内培养12h.
              (2)取出培养板,吸弃培养孔内上清液后向每孔中加入含有不同浓度DHA的培养液(浓度分别为0、125、250、500nmol/L),每个浓度加3个培养孔,置于培养箱内培养.其它培养板也做相同处理.
              (3)分别于加药后12、24、48、72h后,各取一块培养板,采用MTT检测法测定各孔内培养液的光吸收值(OD值),计算抑制率[抑制率=(1-
              加药组OD
              对照组OD
              )×100%].
              (说明:MTT,即四唑氮蓝,它能被活细胞线粒体中一种与柠檬酸循环有关的酶还原成不溶于水的蓝紫色结晶,而死细胞中此酶无活性,不能产生蓝紫色结晶.故可经相关处理后测OD值反映细胞存活率和抑制率.)
              请回答:
              (1)实验目的是:    
              (2)请设计一张表格用于记录实验时所测得的数据,便于抑制率的计算.    
              (3)实验中需要控制的无关变量有    (至少写出两个).每个DHA浓度需加3个培养孔,是为了    
              (4)若最终的实验结果以坐标图呈现,则纵坐标应标识为    
            • 4. 研究人员利用成年鼠嗅粘膜制备的嗅鞘细胞,在添加不同血清浓度下培养并测量其细胞生长(增殖)情况,获得实验结果如图,请据图分析回答:

              (1)将获取的嗅粘膜加入0.25%酶液中,用剪刀充分剪碎,并用吸管吹吸多次,该操作的生物学意义是
                  ,以便制成嗅粘膜细胞悬液.该过程中,所使用酶液的主要成分是    
              (2)将获得的嗅粘膜细胞悬液及时离心,将分离获得的嗅粘膜细胞加入适量的培养液,摇匀后再离心获取嗅粘膜细胞,这样操作的意义主要是去除    ,以避免其对嗅粘膜细胞正常的生命活动造成影响.将获得的嗅粘膜细胞用特定培养基置于培养箱内培养.进行原代培养时,细胞增殖的方式是    
              (3)根据实验可知,当培养液中血清浓度为40%-80%时,随血清浓度升高,对细胞的生长的促进作用表现为    .据图推测,与40%的血清浓度培养条件相比,10%的血清浓度对细胞生长的促进作用可能表现为    
            • 5. 角膜缘干细胞能更新角膜上皮细胞,角膜上皮细胞对维持角膜的透明性至关重要.回答下列问题:
              (1)将角膜缘组织剪碎,加入    处理,可获得大量游离分散的细胞.细胞悬液在培养瓶中培养,当贴壁生长的细胞发生    现象时停止增殖.
              (2)通常角膜缘干细胞的培养控制在10代以内,原因是    
              (3)离体培养角膜缘干细胞时,一般需要在合成培养基中加入    等天然成分,培养时所需的气体主要有    
              (4)研究发现,细胞因子能够调控角膜缘干细胞分化.放线菌素D能通过阻碍RNA聚合酶的功能进而抑制细胞因子的调控,由此推断该抑制过程发生在    (选填“复制”、“转录”或“翻译”)水平.
              (5)研究还发现,皮肤干细胞可以诱导分化为角膜缘干细胞,这体现了皮肤干细胞具有    .临床上常用诱导干细胞定向分化的方法修补损伤或衰老的组织器官,从而解决了    问题.
            • 6. 美国威斯康星州的一个奶牛场有一头奶牛,年产奶量达30.8t,我国奶牛产奶量年平均水平仅为3~4t.某人用该高产奶牛的耳朵细胞,采用核移植技术获得高产奶牛(如下图).

              (1)动物细胞培养的原理是    ,在此过程中为了防止培养液被污染,还需在培养液中添加一定量的    ,此外还应定期    ,防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害.
              (2)用于核移植的供体细胞,一般都选用    代以内的细胞,采集的卵母细胞也需在体外培养至    期后,再去核.
              (3)核移植中选择去核卵母细胞作为受体细胞的原因是    
              (4)将重组胚胎移入代孕母牛子宫内的最佳时期是    .胚胎移植实质上是    
            • 7. (2016春•定州市校级月考)美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱,并顺利移植到7名患者体内.培育过程如图所示,据图回答下列问题:
              (1)a过程属于细胞工程中的    ,其培养基与植物组织培养的培养基含有的营养成分的主要 不同点是前者含有    
              (2)b过程由数万个细胞繁殖到15亿个细胞是    的结果,上述过程中不但需要无菌、无毒的环境,适宜的营养,还需要适宜的     环境.
              (3)新器官与老器官的“重组”     (填“是”或“不是”)基因重组,因为新器官与老器官的    相同.
              (4)“新膀胱”移植后,    (填“会”或“不会”)成为抗原,因为新老器官具有     的蛋白质等物质.
              (5)除上述方法外,还可将患者的体细胞核移人去核的    中,这是利用体细胞核移植,形成相应的组织、器官.
            • 8. 严重复合型免疫缺陷症的基因治疗方法是:先从病人体内获得淋巴细胞进行体外培养,然后将腺苷酸脱氨酶基因利用逆转录病毒作为运载体转移到淋巴细胞,再筛选成功转移的细胞增殖培养,最后重新输入患者体内.回答下列问题:
              (1)体外培养淋巴细胞,应保证处于    环境,在合成培养基中通常加入适量的    等天然成分,培养应在含5%CO2的培养箱中进行,CO2的作用是    
              (2)该基因治疗过程是在逆转录病毒的    作用下,使RNA逆转录为DNA,与目的基因整合后插入到淋巴细胞基因组中.基因表达载体除含有目的基因外,还必须含有    等控制基因表达的信号序列.
              (3)淋巴细胞主要在人体的    (器官)中分化形成,并参与人体的    免疫.
              (4)淋巴细胞的DNA上是否插入了目的基因,一般用    标记的腺苷酸脱氨酶基因作为探针,进行DNA分子杂交检测.
            • 9. 骨肉瘤是最常见的恶性成骨性肿瘤之一.科研人员研究曲古抑菌A(TSA)对人骨肉瘤细胞凋亡的影响及作用机制,为临床治疗寻找新方向.实验过程如下:
              步骤1:用含青霉素和链霉素的高糖培养基,在37℃、5% CO2培养箱中培养人骨肉瘤细胞一段时间.
              步骤2:取适宜浓度的处于生长旺盛期的人类骨肉瘤细胞,用加入不同浓度的TSA(0~200ng•mL-1)的培养基继续培养24h.
              步骤3:对各组细胞进行抽样检测,检测方法是先用台盼蓝试剂(一种细胞活性染料)染色再用血细胞计数板计数,统计细胞存活率(
              未染色细胞数
              细胞总数
              ×100%),结果如图1.
              步骤4:分别提取TSA浓度为0ng•mL-1、25ng•mL-1、50ng•mL-1处理的3组细胞,测量细胞中与凋亡相关的基因(Bax、Bcl-2)和β-肌动蛋白基因(不同的组织细胞中表达相对恒定)表达的蛋白质量并计算比值,结果如图2.

              分析回答:
              (1)与正常成骨细胞相比,骨肉瘤细胞容易在体内分散和转移,其主要原因是    .高糖培养基中加入青霉素和链霉素的目的是    ,细胞培养箱中保持5% CO2的作用是    
              (2)步骤2中,设置0ng•mL-1 TSA实验的主要目的是    
              (3)用台盼蓝试剂检测细胞活性的主要原理是    
              (4)图1所示结果表明    
              (5)根据图2判断,骨肉瘤细胞中    基因过度表达会加速细胞凋亡.
            • 10. 美国科学家已经在实验室中成功培育出膀胱,并顺利移植到7名患者体内.这种技术为那些急需器官移植的患者带来福音.回答下列问题:
              (1)科学家从患者的膀胱上取下一小块活细胞样本,将其中的肌肉细胞和膀胱上皮细胞分别置于不同的培养皿中培养.在培养之前,需用    处理以分散细胞,细胞在培养皿中的培养过程属于    代培养.与植物组织培养的培养基相比,其培养基的主要不同点是含有    
              (2)约一周后将培养皿中培养的细胞放在由胶原质制成的“支架”上继续培养,再过7周左右,原先的数万个细胞已经繁殖到15亿个左右,布满“支架”,膀胱上皮在内,肌肉在外,形成“新膀胱”.细胞数目大量增加,其增殖方式是    ;由这些细胞再形成肌肉和膀胱上皮的过程中要经过    
              (3)医生将“新膀胱”移植到患者膀胱的上面,这样新器官会继续生长并与老器官“重组”取代老器官中丧失功能的部分.新器官与老器官的“重组”    (填“是”或“不是”)基因重组;“新膀胱”移植后,    (填“会”或“不会”)引起免疫排斥反应.
              (4)除上述方法外,还可将患者的体细胞核移入去核的    中,利用体细胞    技术,形成相应组织、器官用于疾病的治疗.
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