回答下列（一）、（二）小题：

(一)转基因抗病香蕉的培育过程如下图所示。图中PstⅠ、SmaⅠ、EcoRⅠ、ApaⅠ等为限制酶，质粒和抗病基因上的箭头表示限制酶的切割位点。下表表示四种限制酶的识别序列及酶切位点。

（1）若要获得抗病基因，不能用限制酶SmaⅠ对图中对应的位点进行切割，因为若在SmaⅠ位点进行切割会________________________。要获得含抗病基因的重组质粒可用___________和_____限制酶切割质粒。它们能使特定部位的两个脱氧核苷酸之间的____________________ 断开。

（2）卡那霉素会抑制香蕉愈伤组织细胞的生长。欲利用含卡那霉素的培养基筛选已导入抗病基因的香蕉细胞，重组质粒中应同时含有_________________基因，作为标记基因。

（3）将重组DNA分子导入香蕉受体细胞的常用方法是_______________法。

（4）图中导入抗病基因的香蕉组织块一般需要通过________________的方法，可培育成能表现新性状的植株，该方法依据的原理是：_______________________________。

(二)图甲是抗寨卡病毒（一种RNA病毒）单克隆抗体制备的过程图，图乙是克隆羊培育过程示意图，请据图回答下列问题：

（1）图甲和图乙所示的过程中，应该都会用到的动物细胞工程技术是____________。

（2）图甲中②过程常需要借助动物细胞融合技术，其过程中动物细胞融合所特有的方法是使用____________诱导细胞融合。

（3）利用基因工程生产寨卡病毒的疫苗时，需要将重组DNA导入细菌细胞中，这一步骤常用的方法是____________。

（4）核移植时受体应选用_____________期的卵母细胞。

（5）在制备单克隆抗体的过程中，进行了两次筛选，第一次筛选是利用HAT______（填“选择”或“鉴别”）培养基，由于骨髓瘤细胞无法在HAT培养基上生存，故只有____________细胞能长期存活；第二次筛选获得____________。

（6）通过上述方法得到的抗体与常规的血清抗体相比最大的优点是______________。

若要制备杂交瘤细胞，需取免疫后小鼠的B淋巴细胞（染色体数目40条），并将该细胞与体外培养的小鼠骨髓瘤细胞（染色体数目60条）按一定比例加入试管中，再加入聚乙二醇诱导细胞融合，经筛选培养及抗体检测，得到不断分泌抗A抗体的杂交瘤细胞。回答下列问题：

（1）制备融合所需的B淋巴细胞时，所用免疫小鼠的血清抗体效价需达到16000以上，则小鼠最少需要经过        _________次免疫后才能有符合要求的。达到要求后的X、Y、Z这3只免疫小鼠中，最适合用于制备B淋巴细胞的是      小鼠，理由是                     。

（2）细胞融合实验完成后，融合体系中除含有未融合的细胞和杂交瘤细胞外，可能还有       ，体系中出现多种类型细胞的原因是            。

（3）杂交瘤细胞中有      个细胞核，染色体数目最多是      条。

（4）未融合的B淋巴细胞经多次传代培养后都不能存活，原因是           。

  (1)在培育转入甲型H1N1病毒抗体基因牛的过程中，①过程需要的工具酶是_____________，②过程常用的方法是_____________。

  (2)转入甲型H1N1病毒抗体基因的牛可通过分泌乳汁来生产甲型H1N1病毒抗体，在基因表达中，甲型H1N1病毒抗体基因的首端必须含有________，它是________识别和结合的位点。③过程培养到桑椹胚或囊胚阶段，可以采用________技术，培养出多头相同的转基因牛。

  (3)prG能激发细胞不断分裂，通过基因工程导入该调控基因可制备单克隆抗体，Ⅰ最可能是________细胞，Ⅱ代表的细胞具有________________________________________的特点。

  (4)制备单克隆抗体也可以用动物细胞融合技术。与动物细胞融合过程不同，植物体细胞杂交在细胞融合之前要用________________对细胞进行处理。

如图所示为细胞融合技术的一些过程：

 (1) 若A细胞为骨髓瘤细胞，B细胞为B淋巴细胞，可以用_______（ 写出一种）方法诱导融合。融合后的细胞种类多样，需要用特定的选择培养基筛选既能_____又能_______的D细胞。之后将D细胞在体外大规模培养，就可以从细胞培养液可以提取大量的纯度高、______的单克隆抗体了。      

 (2) 若A、B为单倍体烟草植物的原生质体，那么已经用___________酶降解脱掉了细胞壁。D细胞成活的标志是________。利用该技术培育烟草新品种依据的生物学原理是 ________________。

(3) 若将二倍体基因型为AaBB的白菜体细胞，与二倍体基因型为ccDd的甘蓝体细胞融合，再由融合细胞培养成新个体，完成整个过程所用到的技术是________，新个体的基因型是______，是____倍体生物。

下面为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图，据图回答下列问题：

(1)图中向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有________________(填写抗体的名称)的混合物，这种方法制备的多克隆抗体不仅产量低，而且纯度低。与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点在于它的__________________，并能大量制备。

(2)图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有________；如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有________种类型。

(3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出________，筛选②的目的是筛选出______________________。筛选时所用的培养基是特定的________培养基。

(4)科学工作者正在研究的用于治疗癌症的“生物导弹”就是________________。用“生物导弹”治疗癌症的方法优于化疗的原因是___________。

(5)由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的______________和____________两大技术。

下图是利用单克隆抗体技术制备三聚氰胺特异性抗体的过程，请据图回答：

（1）对小鼠注射抗原分子的目的是_____________。

（2）图示过程涉及到动物细胞培养，动物细胞培养需要定期更换培养液，目的是__________。

（3）将融合细胞在_________培养基中培养，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞生长。

（4）将筛选得到的杂交瘤细胞，经过________或小鼠腹腔内培养，获取大量的单克隆抗体。

（5）制备的三聚氰胺单克隆抗体可用于检测乳制品中存在的微量三聚氰胺，说明三聚氰胺单克隆抗体具有_______________等特点。

回答下列（一）、（二）小题

（一）如图是“分离以尿素为氮源的微生物”实验的基本流程，请回答下列问题：

（1）该实验培养基应该含有_____．

A．尿素       B．氯化钠        C．葡萄糖         D．琼脂

（2）稀释过程中需要用到的仪器是________，尿素溶液可用_______使之无菌．若要检查B过程灭菌是否彻底，可以采用的方法是_________．

（3）图中步骤C为_____．相对于划线分离法，过程D涂布分离法的优点是_________．

（4）如果菌落周围出现_____色环带，说明该菌落能分泌脲酶．

（二）如图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究．据图回答相关问题．

（1）X、Y、Z细胞的名称分别是__________、__________、__________．

（2）与纤维母细胞相比，诱导干细胞的全能性较_____．②过程的实质是____________．

（3）③过程中需用到的生物诱导剂是________．

（4）④处需要筛选，其目的是______________________________________．

细胞的融合技术有着广泛的应用。下列为细胞融合的简略过程，请据图回答相关问题：

(1)若a、b分别为精子和卵母细胞，则从良种母牛体内采集的卵母细胞，一般要培养到________________阶段才能进行体外受精。

(2)若a、b表示两种植物体细胞，在融合前，往往用____________________去除细胞壁。采用化学法形成c时，一般是用________________作为诱导剂。由d细胞形成杂种植株的原理是______________________，这种育种方法的优点是____________________________。

(3)若a、b分别为骨髓瘤细胞和B淋巴细胞，则d细胞的特点是______________。用特定的选择培养基筛选获得d细胞，然后经_________________筛选获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。其中d细胞克隆化培养的方法有两种：______________，这样经克隆化培养后制备的抗体有____________________________的特点。

如图为细胞融合的简略过程，请据图回答：

(1)若A、B是植物细胞，在细胞融合之前已处理，除去了                    ；A、B到细胞C的过程中，常用的物理方法是            。融合完

成的标志是                       。

(2)若A、B是植物细胞，则形成的D细胞还要应用                技术把D培养成植株。

(3)若A、B是动物细胞，一般取自幼龄动物组织或胚胎，然后用        酶使其分散开来；

(4)若该过程是制备单克隆抗体，A为小鼠效应B细胞，图中B为                   。

(5)若该过程仍是制备单克隆抗体，在A、B到C的过程中，所形成的C有     种，用来培养的D细胞应该是                 。

如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图，据图回答下列问题：

(1)与多克隆抗体相比，单克隆抗体突出的优点__________________，并能大量制备。

(2)图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，说明细胞膜具有________，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有________种类型。

(3)图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出______________，筛选②的目的是筛选出________________________________。最终筛选获得的杂交瘤细胞的特点____________________________。

 (4)由图中可看出，单克隆抗体的制备过程中，运用了动物细胞工程中的________________和________________两大技术。

(5)如果重组细胞为贴附性细胞，则在进行原代培养时，会表现出________和________等特点。