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            • 1. 如图表示利用胚胎干细胞(ES细胞)所作的一系列研究,请据图分析回答:

              (1)过程Ⅰ将胚胎干细胞置于γ射线灭活的鼠胎儿成纤维细胞的饲养层上,并加入动物血清、抗生素等物质,维持细胞不分化的状态.在此过程中,饲养层提供干细胞增殖所需的,加入抗生素是为了______,这对于研究细胞分化和细胞凋亡的机理具有重要意义.
              (2)过程Ⅱ将带有遗传标记的ES细胞注入早期胚胎的囊胚腔,通过组织化学染色,用于研究动物体器官形成的时间、发育过程以及影响的因素,这项研究利用了胚胎干细胞具有______的特点.在哺乳动物早期发育过程中,囊胚的后一个阶段是______.
              (3)过程Ⅲ中目的基因导入胚胎干细胞最常用的方法是______,将获得的目的基因转入胚胎干细胞前需构建基因表达载体,其目的是______.
              (4)过程Ⅳ得到的小鼠畸胎瘤中里面全是软骨、神经管、横纹肌和骨骼等组织和器官.实验时,必须用X射线照射去除胸腺的小鼠,获得免疫缺陷小鼠,其目的是______,该过程研究的意义在于解决______问题.
            • 2.
              科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞(iPS),继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠.流程如图:

              (1)从黑鼠体内获得体细胞后,诱导的多能干细胞(iPS)在形态上表现的特点: ______ ,哺乳动物的胚胎干细胞是由 ______ 分离出来的一类细胞.
              (2)图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得,该过程称为 ______ ;也可从灰鼠体内取出卵子,通过 ______ 后进行早期胚胎培养获得.
              (3)图中重组囊胚通过胚胎移植技术移入白鼠子宫内能存活且继续发育,因为 ______ ,在胚胎移植前要对白鼠进行 ______ .
            • 3.
              如图表示利用小鼠胚胎干细胞(ES细胞)做的研究,请回答下列问题.

              (1)a过程表示基因工程,则其核心步骤是 ______ ,该过程所使用的工具酶有 ______ .
              (2)将基因表达载体导入ES细胞的方法是 ______ ,为检测致癌基因是否已插入受体细胞DNA,可采用 ______ 技术.
              (3)b过程可以获得更多的ES细胞,其采用的技术属于细胞工程中的 ______ 技术.
              (4)完成c、d过程的胚胎工程技术分别是 ______ 、 ______ .若要培养试管动物,除以上两种技术外,还需要运用 ______ 技术.试管动物的生殖方式属于 ______ .
              (5)用肝癌细胞作抗原刺激B淋巴细胞,再将此淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合后获得细胞代谢产物 ______ ,该产物与抗癌药物结合制成“生物导弹”,从而定向杀死小鼠体内的肝癌细胞.
            • 4.

              继乳腺生物反应器之后,科学家培养出一种转基因小鼠,其膀胱上皮细胞可以合成人的生长激素并分泌到尿液中,请回答下列问题:

              (1)人的生长激素基因能整合到小鼠染色体的DNA上,原因是____。

              (2)将人的生长激素基因导入小鼠的受体细胞时,常选用____作为受体细胞,使用____技术。

              (3)从重组细胞培养到到____个细胞的早期胚胎时可以移植,在胚胎移植前还可通过____技术获得较多胚胎。

              (4)若从早期胚胎中分离出胚胎干细胞,通过体外诱导分化,培育出____,解决临床上存在的____和器官移植后免疫排斥反应问题,还可以在添加____的培养液中维持不分化状态。

            • 5.

              在治疗人类某些疾病时,人的体细胞核移植技术得到的胚胎干细胞经诱导分化,形成相应的组织器官后,可用于组织器官的移植,操作流程如图所示。请回答:


              (1)进行图中过程①时,需将体内取出的卵母细胞在体外培养至_____________期,该期卵母细胞核的位置靠近_____________,可用微型吸管

              将之与细胞核一并吸出。

              (2)图中过程②表示将用物理或化学方法激活重组细胞,使其在发育培养液中完成分裂和________,最终形成囊胚的过程。

              (3)图中过程③④表示从囊胚中取出_____________细胞,将其培养在_____________细胞上,维持不分化的状态,以形成大量胚胎干细胞。胚胎干细胞的细胞核在形态上的特性表现为                                     

              (4)图中过程⑤表示在培养液中加入_____________,就可以诱导胚胎干细胞向不同类型的组织细胞分化,用于患者的组织器官移植。

            • 6. 2012年诺贝尔生理学或医学奖授予两位在细胞核重编程领域有重大贡献的科学家.科学家把c-Myc等4个关键基因通过逆转录病毒载体转入小鼠的成纤维细胞,使其变成诱导多能干细胞--iPS细胞,这意味着未成熟的细胞能够发展成所有类型的细胞.
              (1)基因工程中经常使用的工具酶是_____________________,常用的载体除了动植物病毒外还有____________和___________.
              (2)若想增强载体病毒颗粒的感染性,可利用______技术改造病毒外壳蛋白,直接对______进行操作.
              (3)应用______技术得到重组细胞,激活重组细胞发育成早期胚胎,使用从______中获得的胚胎干细胞,在培养中根据需要加入相应的小分子物质以促进其______得到各种组织器官,用于治疗某些疾病,这种技术称为____________.
              (4)iPS细胞在体外已成功地被诱导分化为神经元细胞、神经胶质细胞、心血管细胞和原始生殖细胞等,究其本质原因是基因__________________的结果.
            • 7.

              近日中科院公布了一项名为“NSI第三代免疫缺陷小鼠”的技术。这意味着在不久之后,肿瘤患者在选择治疗、用药方案时,可以拥有一名小岛鼠“替身”,用以提高洽疗精准率,降低患者痛苦。请回答:

              (1)通常制各免疫缺陷小鼠时,要去掉骨髓、吞噬细胞和NK细胞(自然杀伤细胞,机体重要的免疫细胞)此外,还需完全去掉小鼠体内的______________和______________等免疫细胞。

              (2)该“免疫缺陷小鼠”是通过基因敲除来实现的。首先选取老鼠的______________细胞(早期胚胎干细胞/T细胞),去掉______________(免疫基因/免疫抑制基因),再将该细胞移植到代孕母鼠体内,获得第一只基因缺陷小鼠。以后利用______________育种技术即可获得大量免疫缺陷小鼠,这种育种技术的原理是______________。

              (3)构建多只带有癌症患者等量肿瘤细胞的NSI小鼠,均分为甲、乙、丙三组。通过检测小鼠肿瘤细胞的数量,可评估不同药物抗肿瘤的效果。方案见下表。已知药物l和药物2均有一定抗肿瘤活性,请补充预期结果和结论:


              若甲、乙、丙三组中肿瘤细胞的数量关系表现为______________,则小分子药物l的抗肿瘤效果更强。

              若甲、乙、丙三组中肿瘤细胞的数量关系表现为______________,则小分子药物2的抗肿瘤效果更强。

            • 8.

              下图是某实验室做的通过动物纤维母细胞等获得单抗的实验研究。据图回答相关问题。


              (1)X、Y、Z细胞的名称分别是骨髓瘤细胞、      _、_      

              (2)①过程类似于植物组织培养技术中的_        程。与纤维母细胞相比,诱导干细胞的全能性较高。②过程的实质是__      

              (3)胚胎干细胞是从动物胚胎发育至_      _期的内细胞团或胎儿的__      __中分离得到的一类细胞。

              (4)④处需要筛选,其目的是__      __。

              (5)若用含放射性32P标记的核苷酸的培养基培养Z细胞,能测到放射性32P的细胞器是_        。

            • 9.

              人的血清白蛋白通常从人血中提取。由于艾滋病病毒(HIV)等人类感染性病原体造成的威胁与日俱增,使人们对血液制品顾虑重重。如果应用一定的生物工程技术,将人的血清白蛋白基因转入奶牛细胞中,利用牛的乳腺细胞生产血清白蛋白就成为可能。其过程大致如下:

              a.将人体血清白蛋白基因导入“奶牛胚胎”的细胞中,形成细胞①;

              b.取出细胞①的细胞核,注入去核牛卵细胞中,形成细胞②;

              c.电脉冲刺激细胞②促使其形成早期胚胎;

              将胚胎移植到母牛的子宫内,最终发育成转基因小牛。

              (1)人体血清白蛋白基因通常可以从基因文库中获取,含有一种生物所有基因的文库称为                文库,获得的血清白蛋白基因可以利用PCR技术进行扩增,该技术要用到一种特殊的          ___酶。

              (2)人体血清白蛋白基因一般利用_     技术导入“奶牛胚胎”细胞中。当受精卵分裂到囊胚期时,需要取囊胚的_    _细胞做DNA分析,进行性别鉴定,以确保发育成熟的牛能分泌乳汁。

              (3)实验过程b利用的技术是_   ,胚胎工程操作中终端的环节是_   _。

              (4)该过程培养的牛被称为克隆牛。与其相比,试管牛培育过程特有的生物技术     。

              (5)若将早期胚胎分离成若干个胚胎细胞,让其分别发育成小牛,这些小牛的基因型相同,此项技术称为   ,在对囊胚阶段的胚胎进行操作时,需要特别注意的问题是__   ,否则会影响胚胎的恢复和进一步发育

              (6)运用细胞培养技术可以从哺乳动物的早期胚胎中获得胚胎干细胞(ES细胞)进行培养,在培养过程中,必须用_       处理内细胞团,使之分散成单个细胞。为了维持ES细胞不分化的状态一般将ES细胞放在           细胞上,或在添加抑制因子的培养液中进行培养。

            • 10. 胰岛B细胞移植是一种有效治疗糖尿病的方法.利用小鼠再生胰腺提取物(RPE)可定向诱导人
              羊膜间充质干细胞(hAMSCs)分化成胰岛B细胞.回答问题:
              (1)取人羊膜组织刮除血块的上皮细胞,冲洗后剪碎,然后用______处理,最终制成hAMSCs悬液,将细胞悬液放入培养瓶中进行原代培养,当细胞帖壁生长到一定阶段时,出现______现象,此时细胞停止分裂增殖,这时需要将细胞进行相关处理,然后进行传代培养.
              (2)取传至第3带的hAMSCs放入细胞培养板,同时加入RPE进行诱导分化培养.该代hAMSCs能保持细胞正常的______.诱导分化培养15天后,提取细胞______,用胰岛素基因探针进行分子杂交,可初步检测hAMSCs是否分化成胰岛B细胞.
              (3)hAMSCs细胞在RPE作用下,可以定向分化形成具有正常胰岛B细胞功能的细胞,其根本原因是______.培养hAMSCs细胞的培养液中营养成分包括______(至少写两种)
              (4)人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和免疫排斥,目前临床通过使用______抑制T细胞的增殖来提高器官移植的成活率.
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