8.
Rag
2基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞.科研人员利用胚胎干细胞(ES细胞)对Rag
2基因缺失小鼠进行基因治疗.其技术流程如图:
(1)步骤①中所选的卵母细胞应处于
______
期.
(2)步骤②中,重组胚胎培养到囊胚期时,可从其
______
分离出ES细胞,ES细胞在形态上表现为
______
的特点.
(3)步骤③中,需要构建含有Rag
2基因的
______
.可以根据Rag
2基因的核苷酸序列设计合成
______
,利用
______
技术扩增Rag
2基因片段.用HindⅢ和PstⅠ限制酶分别在目的基因所在DNA片段两侧进行酶切获得Rag
2基因片段.为将该片段直接连接到表达载体,所选择的表达载体上应具有
______
酶的酶切位点.
(4)为检测Rag
2基因的表达情况,可提取治疗后小鼠骨髓细胞的蛋白质,用抗Rag
2蛋白的抗体进行
______
.