科学家通过诱导黑鼠体细胞去分化获得诱导性多能干细胞（iPS），继而利用iPS细胞培育出与黑鼠遗传特性相同的克隆鼠，流程如下：

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为             ，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为             。

（2）图中2-细胞胚胎可用人工方法从灰鼠输卵管内获得，该过程称为             ；也可从灰鼠体内取出卵子，通过             后进行早期胚胎培养获得。早期胚胎培养的发育培养液中含有的成分是无机盐、        、氨基酸、核苷酸、维生素、激素以及         等。

（3）图中重组囊胚通过             技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用             方法保存。

（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的             分离培养获得。iPS与ES细胞同样具有发育全能性，有望在对人类iPS细胞进行定向           后用于疾病的细胞治疗。

根据下列有关胚胎工程的示意图，分析回答：

（1）为使A羊超数排卵，向其注射　　　　　　激素，选择　　　　　　期的卵母细胞进行体外受精；体外受精前要对B细胞进行　　　　　　处理，常用的方法是　　　　法。

（2）将早期胚胎注入D羊子宫内的技术叫　　　　　　，D羊被称为　　　　　　（填“供体”或“受体”）；为使D羊的生理状况更适合完成该技术操作，要对D羊用　　 　　　　激素进行                    处理以提高成功率。

（3）从早期胚胎分离出的ES细胞可诱导分化出不同的组织细胞，这是因为从功能上ES细胞具有　　　　　　；若取囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，要注意将　　　　　　均等分割；早期胚胎培养时，培养液中除营养成分外，还需加入　　　　　　。

干扰素是抗病毒的特效药，干扰素基因缺失的个体，免疫力严重下降。科学家设计了以下流程，利用胚胎干细胞（ES细胞）对干扰素基因缺失的患者进行基因治疗。根据所学的知识，结合图中相关信息，回答以下问题：

（1）上图中进行的是_________（填“体内”或“体外”）基因治疗，该过程中利用的生物工程技术手段有动物细胞培养技术、早期胚胎培养技术、转基因技术和_____________等。

（2）ES细胞是由早期胚胎或_____________中分离出来的一类细胞,具有_____________性，可以将其培养成人体各种组织器官。

（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的_________________，该结构除了复制原点外，至少包含__________、____________、____     _和干扰素基因等；为检测干扰素基因是否表达，可以采用_____________________的方法。

Ⅰ.一种重症联合免疫缺陷病（简称SCID），这种患者缺乏正常的人体免疫功能，只要稍被细菌或病毒感染，就会发病死亡。经研究证实，SCID病人细胞的一个常染色体上编码腺苷酸脱氨酶（简称ADA）的基因ADA发生了突变。目前，人们已经找到了治疗该疾病的方案。如下图：  

（1）运载体必须具备的条件是（     ）（多选） 

A． 能在宿主细胞中复制并保存       B．具有多个限制酶切点，以便与外源基因连接 

C．具有标记基因，便于进行筛选    D．是环状形态的DNA分子 

（2） 在此图过程中用到的基因操作工具分别是                              。  

（3） 研究人员将ADA注入淋巴细胞，而不是其他细胞，其原因是什么？

                                                                   。 

（4）图中的治疗方法是_______基因治疗法，这是___________生物技术的应用。   

Ⅱ.下图为牛胚胎移植的基本程序，请据图回答：

（1） 图中a、b、c过程分别是指  ____________、_____________、____________。

（2） 在胚胎移植过程中，供、受体母牛选择好后，要用激素进行____________处理,这样处理的原因是供体和受体生殖器官的生理变化相同，为胚胎移入受体提供了相同的生理环境，以保证移植的胚胎能够继续正常发育。 

（3）为了提高牛胚胎的利用率，常采取的方法是_____________； 处理的时期是_________。

（4）从哺乳动物早期胚胎或原始性腺中分离出来的细胞，称为ES或EK细胞。这类细胞的形态特征有___________________。   

（1）从黑鼠体内获得体细胞后，对其进行的初次培养称为              ，培养的细胞在贴壁成长至铺满培养皿底时停止分裂，这种现象称为             

（2）图中2-细胞胚胎可用____________方法从灰鼠输卵管内获得，也可从灰鼠体内取出卵子，通过              后进行早期胚胎培养获得。

（3）图中重组囊胚通过              技术移入白鼠子宫内继续发育，暂不移入的胚胎可使用              方法保存。

（4）小鼠胚胎干细胞（ES）可由囊胚的              分离培养获得，iPS与ES细胞同样具有_______________特性，有望在对人类iPS细胞进行定向诱导分化后用于疾病的细胞治疗。

干扰素是治疗癌症的重要药物，它必须从血液中提取，每升人血液中只能提取0.5μg，所以价格昂贵。美国加利福尼亚的某生物制品公司用如下图的方式生产干扰素。试回答相关问题。

​

（1）若要使获得的转基因牛乳汁中含有人干扰素，构建的基因表达载体必须包括：乳腺蛋白基因的启动子、人干扰素基因、终止子、_________________（2分）和复制原点等。将基因表达载体导入受精卵最有效的方法是_________________。

（2）通常情况下，对供体和受体母牛选择后，要用激素进行_______________。并用___________激素对供体母牛做___________处理。

（3）为了实现干扰素的批量生产，早期胚胎进行移植之前要进行质量检测，并要求早期胚胎的性别为___________性 。可以通过取样________进行分子水平的早期胚胎性别鉴定；也可以在细胞水平上通过对________的分析进行性别鉴定。选择发育良好的___________或___________胚进行移植。为了提高胚胎利用效率， 可在这两个阶段进行___________，这可以看作动物___________（填“有性”或“无性”）繁殖的方法之一。

（4）近年来，关于胚胎干细胞的研究越来越多。胚胎干细胞具有发育的全能性，如图所示的细胞A和细胞B分别是________细胞、________细胞，可以从这些细胞中获得胚胎干细胞。

根据下列有关胚胎工程的示意图，分析回答：

（1）为使A羊超数排卵，向其注射　　　　　　激素，选择　　　　　　期的卵母细胞进行体外受精；体外受精前要对B细胞进行　　　　　　处理，常用的方法是　　　　　　法．

（2）将早期胚胎注入D羊子宫内的技术叫　　　　　　，D羊被称为　　　　　　（填“供体”或“受体”）；为使D羊的生理状况更适合完成该技术操作，要对D羊进行　　　　　　处理以提高成功率．

（3）从早期胚胎分离出的ES细胞可诱导分化出不同的组织细胞，这是因为从功能上ES细胞具有　　　　　　；若取囊胚阶段的胚胎进行胚胎分割，要注意将　　　　　　均等分割；早期胚胎培养时，培养液中除营养成分外，还需加入　　　　　　．

（1）该过程使用了工具酶            和DNA连接酶，完成目的基因的获取和               。

（2）完成第Ⅱ步操作得到由两个DNA切段连接成的产物有可能是载体—载体、            、               重组DNA分子。

（3）第Ⅲ步操作后，还需经过筛选出含                        的重组DNA分子的胚胎干细胞的过程，才能将该胚胎干细胞注射到囊胚中。

（4）改造后的胚胎干细胞移植回囊胚能继续发育成小鼠，其根本原因是                 。

（5）胚胎干细胞在功能上具有发育的全能性，形成组织、器官必须要进行                。

（6）在体外培养胚胎干细胞能否获得动物器官？_______ _ 。为什么？                

_________________________________________________________________。

（1）步骤①的技术名称是    ___    。

（2）将基因导入ES细胞而不是导入到上皮细胞是因为ES细胞具有    ___    。

（3）步骤③中，需要构建含有干扰素基因的    ___    。由于DNA复制时，子链只能由5′向3′方向延伸，故构建前利用PCR技术扩增干扰素基因时，可以从下图A、B、C、D四种单链DNA片段中选取    ___    作为引物。对干扰素基因片段和质粒进行酶切时，可选用限制酶的组合为    ___    或    ___   。

（4）将步骤③获得的ES细胞在荧光显微镜下观察，选择发    ___    色荧光的细胞进行体外诱导。为检测干扰素基因是否表达，可以采用    ___    方法。

我国研究人员创造出一种新型干细胞——异种杂合二倍体胚胎干细胞，具体研究过程如下图所示，请据图回答问题：

（1）图中的单倍体囊胚1最可能是由小鼠的      发育而来，所采用的技术应为     技术，培养过程中使用的培养液处含有一些无机盐和有机盐外，还需添加微生素、激素、     等营养成分以及血清等物质。

（2）图中的单倍体ES应取自囊胚的       细胞，ES在形态上表现为           。

（3）由于物种间存在     ，因此自然情况下哺乳动物远亲物种间的配子往往无法完成    作用，或者即便能完成也不能发育。但是人们为了生物学研究的便利，创造出了各类远亲物种间的杂合细胞，如小鼠-大鼠、人-鼠等杂交细胞，由于这些细胞都是由体细胞融合产生，因此杂交细胞通常含有       个染色体组。